Комплексообразование с профлавином

Зависимость времен релаксации комплексообразования профлавина с а-химотрипсином от суммы равновесных концентраций реагентов [c.201]

В качестве примера сравним характеристики комплексообразования с активным центром а-химотрипсина двух красителей [61], а именно профлавина [c.30]

Рис. 102. Определение элементарных констант скоростей комплексообразования трипсина с профлавином с помощью релаксационного метода т — времена релаксации при различных значениях равновесной концентрации реагентов

Константы равновесия в том и другом случае отличаются незначительно (в 2—4 раза). В то же время при переходе от профлавина к родамину 6Q процесс комплексообразования красителя с активным центром замедляется почти в 10 paat Структуры молекул этих лигандов различаются в основном лишь тем, что молекула родамина 6Q содержит дополнительное бензольное кольцо. Как показало изучение температурной зависимости кинетики комплексообразования, энергия активации этого процесса порядка 17 ккал/моль (71,4 кДж/моль). С другой, стороны, известна, что энергия активации процессов, контролируемых диффузией, не превышает, как правило, 5 ккал/моль (21 кДж/моль) [62, 63]. Поэтому следует заключить, что образование комплекса химотрипсина с более объемной молекулой родамина 6G возможно лишь в результате конформационных изменений в молекуле фермента. Такой механизм (1.8) комплексообразования органических молекул с белками, по-видимому, весьма распространен. [c.31]

В качестве примера рассмотрим механизм комплексообразования с активным центром а-химотрипсина красителя профлавина [411. Кинетическая кривая комплексообразования описывается суммой двух экспоненциальных членов. Из их цоказателей были найдены два времени релаксации и т . На рис. 70 представлена зависимость функции от суммы равновесных концентраций фермента и красителя. В соответствии с уравнением (5.214) по тангенсу угла наклона этой зависимости определяется константа скорости Отрезок, отсекаемый на оси ординат, дает сумму констант 21 + 23 + Соответственно из зависимости функции от равновесных концентраций фермента [c.210]

Связывание актиномицина и АК идет ступенчато, через ряд промежуточных форм. Комплексообразование меняет конформацию ДНК. Рентгенографическое исследование показало, что ДНК в комплексе с профлавином имеет больший щаг спирали, чем у свободной ДНК и частично раскручивается [139]. Опыты со сверхскрученной (зирегсоИес ) кольцевой ДНК показали, что -В присутствии АК и актиномицина она раскручивается [140,, 141]. В такой ДНК основная правая спираль закручена в правую спираль более высокого порядка. Раскручивание сверхскрученной ДНК при образовании комплекса приводит вследствие топологических особенностей кольцевой структуры самой ДНК к изменениям геометрии всей макромолекулы. Установлено существование критической концентрации лиганда, отвечающей полному раскручиванию сверхспирали дальнейшее добавление красителя вызывает закручивание ДНК в обратном направлении с образованием левой сверхспирали. Эти факты обнаруживаются методом седиментации. [c.528]

Рассмотрим механизм комплексообразования активным центром а-химотрипспина красителя профлавина. Кинетическая кривая комплексообразования описывается суммой двух экспонециальных членов, из которой соответственно были найдены времена релаксации Т и X,. На рис. 2.47, а представлена зависимость функции т + от суммы равновесных концентраций фермента и красителя. По тангенсу угла наклона этой зависимости определяется константа скорости 2- Отрезок, отсекаемый на оси ординат, дает сумму констант 2 1 + 2 3 3 2- Соответственно из зависимости функции т Т2 от равновесных концентраций фермента и красителя определяются [c.176]

Реакция образования комплекса индометацин — PGH-син-тетаза имеет константу скорости бимолекулярного взаимодействия 6,3-10 М" с . Это значение на семь порядков ниже диффузионно контролируемого предела. Однако в настоящее время накапливается все больше фактов, свидетельствующих в пользу того, что кинетика образования комплексов с низкомолекулярными лигандами может быть чувствительна к структуре органического лиганда. Так, введение в аспарагиновую кислоту метильной группы почти в Ю раз уменьшает константу скорости комплексообразования этого субстрата с активным центром аспартатаминотрансферазы. При переходе от профлавина к родамину GG, имеющему геометрически большую молекулу, процесс комплексообразования лиганда с активным центром а-химотрипсина замедляется в 10 раз, в то время как константа равновесия практически не меняется. [c.215]