Аналоги нуклеотидов

Случайный мутагенез с использованием аналогов нуклеотидов [c.166]

Е. соИ. При последующей репликации векторной ДНК в комплементарную цепь включаются нуклеотиды, отличные от исходных, в том сайте, где находится аналог нуклеотида. В результате в клонированный ген вносится мутация. [c.167]

Синтетические аналоги нуклеотидов, области их применения [c.176]

Принцип кодирования здесь сыграл, быть может, одну из своих самых блестящих ролей. Молекулы матриц ДНК обладают способностью к самовоспроизведению в системах, содержащих требуемый материал и катализаторы. Были ли ранние формы матриц сходны с известной ДНК или нет — трудно сказать, но их способность размножаться, присоединяя по комплементарному принципу какие-то аналоги нуклеотидов, не следует подвергать сомнению. [c.154]

СИНТЕТИЧЕСКИЕ АНАЛОГИ НУКЛЕОТИДОВ [c.12]

Целесообразно периодически культивировать клетки в присутствии токсического аналога нуклеотидов, использованного для селекции данной линии. В некоторых лабораториях клетки культивируют в его присутствии постоянно, однако это вряд ли яв- [c.104]

Следует отметить, что существование различных путей синтеза и гидролиза АТФ в митохондриях в неявном виде неоднократно предлагалось различными авторами в течение двух последних десятилетий [29—33], однако, по-видимому, из-за недостаточно четких формулировок подобные гипотезы не получили развития. Частным случаем общей схемы [28] является представление, развиваемое Шефером и сотрудниками, согласно которому электрохимический потенциал ионов водорода является регулятором соотношения между потоками реагентов, проходящими по пути 1—6 и 1—4 [88—90]. Согласно Шеферу, конформация Fi, определяемая по сродству фермента к аналогам нуклеотидов, сильно зависит от Следствием этого является существование аналогов нуклеотидов, избирательно блокирующих либо гидролиз, либо синтез. АТФ [91]. [c.46]

Разрешение этих вопросов позволило бы с помощью аналогов нуклеотидов направленно изменять регуляторные свойства N-белка. До сих пор изучение характеристик топографии регуляторного центра проводилось в основном лишь косвенными методами. [c.110]

При использовании методов включения аналогов нуклеотидов или мутагенеза бисульфитом одноцепочечных брешей (см. рис. 6.6, 6.8) на молекуле двухцепочечной ДНК необходимо специфично осуществлять разрыв одной цепи. [c.178]

Регуляция Р. осуществляется по аллостерич. механизму. Нуклеозидтрифосфаты и дезоксилуклеозидтрифосфаты мр-гут, в зависимости от условий, служить как активаторами, так и ингибиторами ферментов из E. oli и клеток животных. Известен также ряд специфич. ингибиторов ферментов (в т. ч. необратимого действия), гл. обр. производных гидрок-симочевины и нек-рых аналогов нуклеотидов. [c.264]

Описанный путь синтеза может служить, по-видимому, препаративным методом получения уклеотидил-(5 М)-аминокислот (пептидов) 113 любых нуклеозидов. Особенно его можно рекомендовать в тех случаях, когда синтез нуклеотидо-(P N)-пептида осуществляется из нуклеозида, т. е. включает стадию фосфорилирования (например, производных минорных нуклеотидов илИ различных синтетических аналогов нуклеотидов). Метод, однако, имеет существенные недостатки. Он очень трудоемкий, насчитывает значительное количество стадий, включая подготовительные синтезы очень неустойчивых соединений (например, ангидрида дифенилфосфорной и бензилфосфористой кислот), которые готовят непосредственно перед основным синтезом. Недостатком метода является также необходимость предварительной защиты в исходном нуклеозиде гидроксильных групп, не подлежащих фосфори-лированию удаление защитных групп из нуклеотидопептида часто связано с большими трудностями. [c.349]

Аналогичным путем была получена 4-тио-l-рибофураноза. Названные соединения были использованы авторами [211] для синтеза D-и l-аналогов нуклеотидов о-и ь-4 -тиоаденозина. [c.78]

МО иметь большое количество идентичных молекул ДНК. Наработку интересующей последовательности можно осушествить клонированием соответствующего фрагмента. Проиллюстрированный на рис. 36.6 метод секвенирования по Максаму-Гилберту основан на химическом расщеплении ДНК по определенному основанию. Другой ферментативный метод—метод Сэнгера—базируется на применении аналогов нуклеотидов, прерывающих синтез комплементарной цепи ДНК по одноцепочечной матрице в месте встраивания в цепь соответствующего аналога. [c.44]

Несмотря на удобство введения такого рода мутаций в ДНК in vitro, химический мутагенез накладывает ограничения на спектр возникающих мутаций, так как лишь определенные остатки нуклеотидов ДНК претерпевают обязательные изменения. Поэтому многие мутации никогда не могут быть получены с помощью химических мутагенов. Проблему можно частично решить, используя для репарации одноцепочечных брешей ДНК аналоги нуклеотидов, например, N-гидроксицитозинтри-фосфат, который в составе ДНК одинаково хорошо спаривается с А и G, или создавая такие условия, при которых репарирующая ДНК-полимераза начинает ошибочно включать в синтезируемую цепь ДНК некомплементарные матрице нуклеотиды. Все перечисленные выше методы локального мутагенеза, осу- [c.325]

Таким образом, некий идеальный фермент для секвенирования ДНК должен был бы быть, во-первых, относительно дешевым и при этом характеризоваться высокой полимеразной активностью, включая и процессивность и скорость полимеризации, отсутствием всяких экзо-нуклеазных активностей, не привередливостью к различным модифицированным аналогам нуклеотидов, а также устойчивостью к повышенным температурам. Забегая вперед, можно сказать, что и секвена-за (версия 2.0) и термосеквеназа во многом отвечают приведенным вы- [c.80]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология