спектры тепловая денатурация

Большинство исследований, описанных выше, было выполнено на частично гидратированных порошках белка или пленках. Необходимо сравнить конформации белка в этом состоянии и в растворе. Существует достаточное количество фактов, подтверждающих отсутствие изменения конформаций белка в интервале между содержанием воды 0,2 г/г белка и разбавленным раствором 1) ферментативная активность наблюдается и при степени гидратации, равной 0,2 2) вид ИК-спектра изменяется непрерывно по мере увеличения степени гидратации выше 0,1 г воды/г белка и согласуется с предположением о гидратации поверхностных групп без изменения конформации белка 3) температура тепловой денатурации увеличивается с уменьшением степени гидратации ниже 0,7 4) парциальные удельные объемы у некоторых белков в разбавленном растворе и в твердом состоянии при степени гидратации выше 0,2 г воды/ г белка одинаковы 5) спектр кругового дихроизма лизоцима в пленке очень схож со спектром этого белка в растворе РО]. [c.131]

Спектры ПМР белков чрезвычайно сложны, однако в их расшифровке достигнуты весьма значительные успехи [170—175]. На рис. 2-41 приведены спектры ПМР -фермента рибонуклеазы, полученные при 60 и 220 МГц. Как легко видеть, при более высокой частоте разрешение выше. Обращает на себя внимание и тот факт, что после тепловой денатурации фермента (до 72,5°С) многие сигналы спектра, снятого при 220 МГц, оказываются более узкими. Это означает, что в результате денатурации все однотипные боковые группы белка попадают в примерно эквивалентное окружение. Кроме того, было показано, что спектры ПМР для белков, находящихся в кон- зормации статистического клубка, хорошо соответствуют спектрам, которые можно получить, исходя из стандартных химических сдвигов отдельных аминокислот [171], что согласуется с изложенным выше. [c.187]

Холлис и сотр. [77] наблюдали высокопольную область спектра а-химотрипсина на частоте 100 МГц. Молекула имеет грубо сферическую форму [12], молекулярная масса равна около 25000. Тепловая денатурация а-химотрипсина изучалась путем измерения температурной зависимости ширины линий протонов алифатических боковых цепей. Результаты соответствуют двухпозиционному процессу денатурации (см. с. 355), что подтверждается и другими физическими измерениями. Однако до сих пор об этом белке с помощью ЯМР получена лишь минимальная информация. [c.383]

Фотоденатурация нуклеиновых кислот является следствием разрушения кооперативной системы слабых нековалентных связей (водородные, гидрофобные и т. д.) и частичного (локального) или полного нарушения двуспиральной структуры Уотсона — Крика (эффект расплетания ). Наиболее вероятно, что денатурация нуклеиновых кислот представляет собой вторичный темновой процесс, вызванный образованием фотопродуктов, хотя не исключена возможность прямого разрыва слабых связей при тепловой диссипации энергии электронного возбуждения оснований, как это предполагается для белков. Несмотря на то, что спектр действия денатурации ДНК совпадает со спектром поглощения тимидина, причастность тиминовых димеров к образованию денатурированных участков в ДНК остается до сих пор сомнительной. Г. Б. Завильгельским твердо установлено, что локальные нарушения вторичной структуры ДНК при ее облучении коротковолновым светом определяются индукцией сшивок между комплементарными нитями ДНК. Наиболее точно такой вывод подтверждается опытами, в которых миграционным путем с ацетофенона на тимин изменялось количество тиминовых димеров в ДНК. При этом каких-либо различий в кривых плавления, отражающих состояние вторичной структуры, у образцов ДНК, содержащих 0,17 и 30% димеров, обнаружить не удалось. В то же время кинетика образования сшивок и локальных денатурационных участков в ДНК идентична. [c.241]

Детальный анализ спектров ЯМР, снятых при 220 МГц в процессе тепловой денатурации, был проведен для лизоцима. На рис. 21.15 представлены эти спектры для DjOIpD 5) при 35, 65 и 80° С (в качестве растворителя использовалась DjO, а не HjO, так как спектры HjO и белка частично перекрываются). Слева приведены участки спектров, расположенные в слабопольиой области, справа — в области сильных полей. Линии резонансного поглошения протонов NH-rpynn, обычно расположенные в интервале 6—11 м. д., отсутствуют, так как протоны заменены атомами дейтерия. Спектр в области от 3 до 6 м. д. не показан, поскольку он сильно загрязнен линиями от HDO. [c.230]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология