Лизоцим, адсорбция на IR

Рис. 17. Уширение полос из-за, адсорбции на стенках.. Условия капилляр - 50 мкм 42/50 см поле -300 В/см буфер - 50 мМ фосфат, 20 мМ сульфат лития, 10-50 мМ ДАП pH 3.5 ввод пробы давлением, I с. детектирование -214 нм проба -0,5 мг/мл лизоцим.

Одним из недостатков бумаги является заметная адсорбция и денатурация белков на ней. Практически это явление всегда в той или иной мере имеет место. В этом отношении многообещающим является сравнительно новый листовой материал — пористая ацетат-целлюлозная пленка, применяемая обычно для изготовления мембранных фильтров. Начало применению этого материала было положено Коном в 1957 г. Сейчас некоторые фирмы производят листы довольно больших размеров (36x5 сж), хотя можно работать и с меньшими листками. Толщина листка такова (около 0,1 мм), что позволяет работать лишь с малыми количествами вещества (около 0,1—20 мкл раствора, содержащего 5— 500 мкг белка). Было показано, что адсорбция белка крайне мала, разделение обычно очень хорошее даже для тех белков, которые сильно адсорбируются на бумаге (инсулин, лизоцим). После окрашивания зон, погрузив листок в жидкость с показателем преломления, близким к 1,474, можно сделать его полностью прозрачным как для видимого света, так и для ультрафиолета, что облегчает количественный анализ. Подробное описание методики работы с ацетатом целлюлозы можно найти в работе [35]. [c.93]

Структурообразование в мвжфазном слое связано с конформацион-ннми изменениями макромолекул при адсорбции, сопровождающимися уменвиением растворимости белка в связи с денатурацией (сывороточный альбумин, лизоцим), либо в связи с процессом ренатурации - образованием коллагеноподобных спиралей (желатина). В результате больного числа межмолекулярных связей на межфазной границе возникают агрегаты макромолекул, т.е. частицы новой лиофильной фазы. Накопление и сращивание частиц новой лиофильной фазы с образованием контактов (водородные или гидрофобные связи) мехду вини и приводит к появлению двухмерной структуры геля, характеризующейся твердообразными механическими свойствами. [c.201]

Для адсорбции белков широко применяют различные алюмо-силикатные глины бентониты, фуллерову землю и каолин [343, 344]. Например, лизоцим можно адсорбировать на бентоните непосредственно из белка куриных яиц, после чего примеси вымывают водным раствором пиридина, а лизоцим элюи-руют 5%-ным водным раствором пиридина, рН которого доведен до 5,0 при помощи серной кислоты [343]. Бентонит был применен также для адсорбции полисахарида из очищенной дрожжевой инвертазы [161]. С другой стороны, диатомит не адсорбирует большинства белков в сколько-нибудь значительной степени. [c.75]

Более полно изучен лизоцим, выделенный из белка куриного яйца. Кристаллический лизоцим получают непосредственно из яичного белка путем адсорбции на бентонитной глине. С глины лизоцим элюируют 5%-м водным пиридином при pH 5, затем фермент осаждают сернокислым аммонием, подвергают диализу и лиофильно сушат. [c.395]

Недавно найдены два пути преодоления этих трудностей. Первый путь — это амфифильная адсорбция на геле агарозы (разд. 4,8), при которой все белки адсорбируются на гранулах агарозы в растворе сульфата аммония 70—80%-ного насыщения, тогда как небелковый материал вымывается. При экстракции гранул агарозы буфером белок переходит в раствор, который далее фракционируют обычным способом. Второй путь — использование соответствующего метода экстракции. При обработке клеток лизоцимом обычно не образуется слишком много капсульных камедеподобных веществ — лизоцим растворяет их, но не разрушает все бактериальные клетки. Для получения до- [c.50]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология