Равновесие в градиенте плотности

Белки являются амфолитами, т. е. они содержат как положительно, так и отрицательно заряженные группы. Для всех амфолитов характерна зависимость их заряда от pH при низких pH они заряжены положительно, а при высоких — отрицательно. Для каждого амфолита существует такое значение pH, при котором он является незаряженным это значение называется изоэлектрической точкой. В изоэлектрической точке амфолит не движется в электрическом поле. В градиенте pH молекулы белка будут перемещаться до тех пор, пока не достигнут точки градиента, где они становятся незаряженными после этого они перестают двигаться. В случае смеси белков каждый белок будет перемещаться до точки градиента pH, соответствующей его собственной изоэлектрической точке. Такой метод разделения белков, основанный на различиях изоэлектрических точек в градиенте pH, называется изоэлектрической фокусировкой и является электрофоретическим аналогом центрифугирования с достижением равновесия в градиенте плотности (гл. 11). Процесс движения двух различных белков с отличающимися изоэлектрическими точками схематически показан на рис. 9-15. [c.239]

Теория седиментационного равновесия в градиенте плотности усложняется тем, что 1) для создания градиента обычно применяют очень высокую концентрацию соли (5—7 М), что не позволяет рассматривать систему как двухкомпонентную, 2) положительно и отрицательно заряженные ионы соли распределяются в объеме неодинаково, так как они обладают разными молекулярными массами и коэффициентами диффузии, а это приводит к созданию градиента электрического потенциала, и 3) скорости центрифугирования настолько высоки, что уже нельзя пренебрегать влиянием давления. По этой причине данный метод обычно не используется для определения молекулярных масс, однако, так как его можно применять, если данные обрабатываются соответствующим образом, приведем краткое его описание. [c.331]

СЕДИМЕНТАЦИОННОЕ РАВНОВЕСИЕ В ГРАДИЕНТЕ ПЛОТНОСТИ [c.123]

Седиментационное равновесие в градиенте плотности позволяет установить изменение градиента плотности в растворе полимера, который достигается в столбике жидкости, представляющей собой смесь легкого и тяжелого растворителей, при равновесии между седиментацией и диффузией под влиянием слабого центробежного поля. [c.123]

Для того чтобы правильно рещить задачу о равновесии в градиенте плотности, необходимо выразить в явной форме термодинамические соотнощения, описывающие поведение всех трех компонентов. Молярная концентрация макромолекул достаточно велика, и ее [c.261]

При равновесии в градиенте плотности величина плавучей плотности определяет в растворе ту точку, где концентрация макромолекул максимальна, т.е. в этой точке дс дх = = Ои [c.263]

Седиментационное равновесие в градиенте плотности [c.329]

Измерение молекулярной массы методом седиментационного равновесия в градиенте плотности [c.331]

Измерение молекулярной массы методом седиментацион ного равновесия 326 Определение молекулярной массы методом приближения к равновесию (метод Арчибальда) 328 Седиментационное равновесие в градиенте плотности 329 Измерение молекулярной массы методом седиментационного равновесия в градиенте плотности 331 Определение плотности путем седиментации в градиенте плот-ности 332 Приложение 344 [c.578]

Измерения седиментационного равновесия в градиенте плотности дают информацию о средневесовом молекулярном весе (Л7ш) и химической неоднородности макромолекул. [c.123]

Равновесие в градиенте плотности. Этот метод существует в двух модификациях с преформированным [c.193]

До сих пор мы рассматривали случаи, когда плотность изучаемых молекул намного превышала плотность растворителя. В этом разделе будет описан важный метод седиментационного равновесия в градиенте плотности (его разработали Мэтью Мезелсон, Франклин Шталь и Джером Виноград), в котором плотность растворителя почти такая же, как и плотность изучаемой молекулы. Этот метод требует присутствия третьего компонента (обычно соли цезия) с низкой молекулярной массой и высокой плотностью. При центрифугировании раствора соль перераспределяется [в соответствии с уравнением (13)] с достижением равновесия, образуя тем самым градиент концентрации, который имеет меньшую плотность сверху и большую — у дна пробирки, т. е. градиент плотности. Макромолекулы при этом [c.329]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология