Использование различий в изоэлектрических точках

Использование различий в изоэлектрических точках [c.531]

Компенсирующее движение объема раствора взамен переносимого растворенного вещества было применено с целью использования всего объема /-образной трубки для разделения. Принцип последнего метода понятен из рис. 40. Если мы хотим разделить два вещества А и Б, мы должны сперва подобрать наиболее подходящий pH для разделения, при котором различия в подвижности между ними максимальны. Обычно это pH не совпадает с точкой, при которой оба вещества переносятся с одинаковой скоростью в противоположных направлениях (см. кривые подвижности белков серума, данные Тизелиусом [137] в 1937 г.). Различие в подвижности гораздо больше в щелочной области, чем в области, лежащей между изоэлектрическими точками. Разделение между двумя веществами А и Б в этом случае будет протекать с большей скоростью при тех pH, при которых компоненты переносятся в одинаковом направлении. Опыт, однако, пришлось бы приостановить, когда более быстрый компонент достигает верхнего предела — /-образной трубки, т. е. в момент, когда лишь сравнительно малые объемы чистых компонентов успели отделиться друг от друга. [c.277]

В изоэлектрическом фракционировании, или фокусировании, сокращенно ИФ) используется градиент концентрации ионов, который влияет на заряд разделяемых компонентов, например Н+ и комплексообразующих ионов. Самый обычный пример — ИФ амфотерных макромолекул, главным образом белков при градиентном изменении pH. Белки значительно различаются по своим изоэлектрическим точкам, т. е. по значениям pH, при которых они имеют нулевой заряд. При pH меньшем, чем изоэлек-трическая точка, белок приобретает положительный заряд, и поэтому движется в электрическом поле как катион. При наличии градиента pH, который увеличивается от анода к катоду, ион движется к точке, у которой он потеряет свой положительный заряд или станет полностью электрически нейтральным. Такой градиент pH можно создать с помощью системы буферных растворов. Однако описанный метод не нашел широкого применения. Свенсон [95] теоретически обосновал и подтвердил практически преимущества применения устойчивого естественного градиента pH. Градиент такого типа наблюдается при электролизе смеси амфотерных веществ. Стационарное состояние устанавливается в том случае, когда амфолиты располагаются в порядке увеличения изоэлектрической точки р1 от самого низкого значения (вблизи анода) до самого высокого (вблизи катода). Практическое использование этого метода возможно при подборе подходящей смеси амфолитов-носителей. Амфолиты долж- [c.318]

МОЖНО легко заменить на ионы фтора или ионы кислорода НгРО , либо другие родственные ноны. Дегидратация поверхности при высокой температуре является обратимой. Поверхность Т10г амфо-терна, и ее изоэлектрическая точка лежит вблизи pH 6,6. На ней могут образовываться поверхностные сложные эфиры. Можно различить, кроме того, два типа гидроксильных ионов с несколько различающейся активностью. Поверхность приобретает сильные кислотные свойства при восстановлении ионов в ионы Эгот процесс осуществляется и при действии УФ-облучения. Механизм такого восстановления и свойства восстановленных поверхностей заслуживают дальнейшего изучения с точки зрения использования двуокиси титана в качестве пигмента. [c.267]

В 1963 г. Мальмстрём с сотр. [56] опубликовал серию работ, в которых изложил результаты тщательно выполненных экспериментов с использовании классического термодинамического метода равновесного диализа, дополненного методом электронного парамагнитного резонанса. Уделяя особое внимание тому, чтобы показать, что равновесие действительно достигается, и обрабатывая свои данные новым методом графического анализа, эти исследователи заключили, что связывание железа трансферрином можно описать, предположив участие в связывании двух эквивалентных невзаимодействующих центров. Если это так, то напрашивается вывод, что трансферрин в растворах не полностью насыщен железом и должны сосуществовать три типа белковых частиц частицы с двумя связанными атомами железа, частицы только с одним связанным атомом и частицы, не содержащие металла [59]. Вернер и Вебер [21] на основании электрофоретических диаграмм, скорее интуитивно, различили три типа молекул в неполностью насыщенных железом растворах кональбумина. Однако они не сопоставили это наблюдение со своими заключениями, сделанными на основании исследования равновесия. Позднее это предположение было детально подтверждено для трансферрина с помощью фронтального электрофореза методом движущейся границы [59], а окончательно для кональбумина методом изоэлектрического фокусирования [60]. Было высказано предположение, что частицы, обладающие промежуточной подвижностью при электрофорезе и в опытах по изоэлектрическому фокусированию, могут представлять собой димер апопротеина и белка, насыщенного железом [61]. Однако позднее было доказано, что это предположение несостоятельно [41]. [c.341]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология