Реципиентная популяция III

Успешное осуществление трансформации определяется использованием высокомолекулярной двухцепочечной ДНК и созданием специфичных условий, в которых популяция реципиентных клеток проявляет максимальную компетентность. Последнее часто зависит от таких факторов, как стадия в цикле роста популяции реципиента, питательная ценность культуральной среды, уровень аэрации, pH, наличие нужных концентраций двухвалентных катионов и в большинстве случаев генотип реципиента. [c.66]

Таким образом, благодаря такой мутации клетки реципиентного штамма, содержащие гибридную плазмиду, которая обеспечивает повышенный синтез этой аминокислоты, будут иметь селективное преимущество перед клетками, утратившими плазмиду. Это обеспечивает стабильное развитие популяции клеток, несущих указанную плазмиду и продуцирующих аминокислоту. [c.188]

Условия, при которых популяция рекомбинантных ДНК смешивается с популяцией реципиентных клеток, должны быть такими, чтобы в каждую клетку попало только по одной рекомбинантной молекуле. Это позволяет изолировать рекомбинантные молекулы друг от друга. [c.227]

Такое перемещение аллелей в пределах популяции называют потоком генов , но строго говоря, этот термин относится к перемещению аллелей из одной популяции в другую в результате скрещивания между членами этих двух популяций. Случайное внесение новьгх аллелей в реципиентную популяцию и удаление их из донорной популяции изменяет частоту аллелей в обеих популяциях и ведет к повышению генетической изменчивости. Несмотря на то что поток генов вносит в популяции генетическую изменчивость, в смысле эволюционного изменения его действие оказывается консервативным. Распространяя мутантные аллели по всем популяциям, поток генов приводит к тому, что все популяции данного вида приобретают общий генофонд, т. е. различия между популяциями уменьшаются. Поэтому прерывание потока генов между популяциями служит одной из предпосылок для образования нового вида. [c.320]

Мифация населения по регионам или странам с оседлостью в новом месте — теперь уже неизбежный спутник многих социальных процессов (беженцы, поиски работы и т.д.). Миграция может отражаться на эпидемиологии генных болезней. Она уменьшает или увеличивает частоту носителей патологических генов в донорских или реципиентных популяциях вплоть до эффекта родоначальника или уравнивания частот в популяциях. [c.152]

С этой целью они смешивали культуры Hfr- и F -бактерий в соотношении 1 клетка Hfr-штамма на 10 Р -клеток (при плотности примерно 10 бактерий в 1 мл) и инкубировали смесь в течение различных периодов времени. Из инкубационной смеси брали пробы, разводили их и высевали на минимальный глюкозный агар, содержащий метионин и стрептомицин (для отбора рекомбинантов Thr+ Leu" Str ), или на минимальный га-лактозный агар, содержащий треонин, лейцин, метионин и стрептомицин (для отбора рекомбинантов Gal Str ). Полученный ими результат показан прерывистой линией на фиг. 110. Как видно из этого графика, число рекомбинантов возрастает прямо пропорционально времени, прошедшему с момента, когда родительские культуры были смешаны, и до образования плато, что наступает примерно через 1 ч, когда на 100 клеток Hfr насчитывалось 18 рекомбинантов Thr Leu" Str и 5 рекомбинантов Gal+ Str Это значение максимальной частоты рекомбинации, очевидно, b JIOO раз превышает те значения, которые были получены ранее Кавалли и Хейсом в скрещиваниях с Hfr-штаммами, и, следовательно, показывает, что более 10% клеток любой популяции Hfr способны переносить часть своего генетического материала в реципиентную F"-клетку. Сплошной линией на фиг. ПО показаны результаты примерно такого же-опыта по изучению кинетики переноса генов. Однако в этом случае в метод была внесена небольшая, но чрезвычайно важная модификация пробы из конъюгационной смеси клеток Hfr и F, так же как и в первом случае, разводили через определенные промежутки времени после начала контакта между родительскими клетками, но перед высевом на селективный агар разведенные пробы в течение 2 мин перемешивали в смесителе Уоринга. Под действием возникающего в жидкости срезывающего уси- [c.223]

В-третьих, реципиентный штамм должен иметь мутации, которые поддерживают стабильное сохранение клеток с гибридной плазмидой в условиях ферментации. Выщепление гибридных плазмид — это нередкое явление, и так как бесплазмидные штаммы обычно характеризуются большей скоростью роста, то они накапливаются в популяции. Для стабилизации клеток бактерий, несущих гибридные плазмиды, которые обеспечивают синтез большого количества аминокислоты, реципиентный штамм должен нести мутацию, частично блокирующую смежный этап метаболизма этой аминокислоты. При этом блок смежного, например последующего, этапа метаболизма аминокислоты должен компенсироваться высокими концентрациями заданной аминокислоты. [c.187]

Известно, что компетентные клетки способны включать-большое количество донорной ДНК, причем одна реципиентная клетка может включать несколько разных молекул донорной ДНК в один геномный сайт. Этот феномен позволяет выделять компетентные субпопуляции из общей массы реципиентных клеток и маркировать геном млекопитающих. Если донорная ДНК смешана с плазмидной, кодирующей селективный для клеток млекопитающих маркер, селекция по плазмидному гену после трансфекции позволяет выделить популяцию трансфицированных клеток. Такое обогащение облегчает дальнейшую очистку реципиентных клеток. Этот прием оказался успешным при клонировании генов, кодирующих клеточные поверхностные антигены. В данном случае для обогащения использовали антитела, а для разделения субпопуляций клеток флуоресцентный сортер (FA S) [46]. [c.28]

Каждая реципиентная клетка в популяции должна быть отделена от всех остальных, чтобы можно было вьщелить клон клеток или вирусов, содержащих уникальную рекомбинантную молекулу. [c.227]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология