Вирус количественный тест

При проведении большинства биологических исследований необходимо, чтобы в распоряжении исследователей был хотя бы один количественный тест. Поэтому не удивительно, что периоду больших успехов в изучении вирусов растений и животных предшествовал период развития надежных методов количественной оценки инфекционности вирусов [101, ИЗ, 214]. [c.19]

На ранних этапах изучения инфекционной РНК ВТМ важно было установить отсутствие в ней вирусного белка с большей точностью, чем это позволяет чувствительность описанных методов. При использовании стандартных методов выделения нуклеиновых кислот содержание белка в выделенном препарате редко бывает ниже 1 %, а в случае ВТМ это соответствует комплексу одной молекулы РНК ВТМ с одной субъединицей оболочечного белка. Однако если выделять РНК в присутствии бентонита, то загрязнение препарата белком значительно снижается. А в случае ВТМ содержание примеси можно снизить еш,е больше (до 1 белковой субъединицы на 20—50 молекул РНК), если использовать метод реконструкции вируса (см. ниже). Определение следовых количеств примесей всегда сопряжено с трудностями методического характера, а достоверность результатов, полученных с помощью различных тестов на минимальных концентрациях веществ, сомнительна. Для определения примеси белка в препаратах вирусных нуклеиновых кислот были поставлены опыты с радиоактивной меткой ( 8) белка. Все, что удалось извлечь из этих опытов, сводится к тому, что содержание остаточного белка, судя по количеству метки, соответствует 0,04% (при пересчете на содержание серы в белковой оболочке ВТМ). Действительно, то соотношение аминокислот, которые в следовых количествах были обнаружены в препаратах нуклеиновых кислот, не соответствует количественным соотношениям этих же аминокислот в белковой оболочке. Тот факт, что препараты, содержащие 0,04 и 1% белка, не различаются по своей инфекционности (на 1 мг РНК), убедительно доказывает, что инфекционность — свойство, присущее вирусной РНК [142, 455]. Положение это убедительно было доказано только для РНК ВТМ. Однако нет никаких оснований сомневаться в том, что вывод этот носит общий характер и что инфекционность всех вирусов заключена в их нуклеиновых кислотах. [c.179]

Для быстрой количественной и объективной оценки активности противовирусных препаратов в культуре клеток и в отношении респираторпо-синцитиальпого вируса разработана тест-система на основе метода ИФА (8). Целью нашей работы явилось изучепие в этой системе нового противовирусного препарата растительного происхождепия гипорамипа, разрешенного Минздравом России для лечения и профилактики гриппа. [c.282]

Поскольку ретровирусные частицы содержат РНК-зави-снмую-ДНК-полимеразу, определение активности этого фермента может служить удобным критерием титра вирусного препарата. Однако этот метод неприменим к препаратам, не содержащим хелперных элементов, поскольку нетрансфицированные упаковывающие клетки спонтанно продуцируют заметные количества частиц, несущих обратную транскриптазу [17]. Для препаратов, в которых присутствует хелперный вирус, тест на активность обратной транскриптазы представляет собой наиболее простой способ качественого анализа большого числа образцов. Количественное титрование требует приготовления серии стандартов для построения калибровочной кривой. [c.297]

Для определения антигенспецифичных Т-клеток часто используют тест стимуляции лимфоцитов - пролиферативный ответ Т-клеток на антиген, выявляемый по включению ими Н-тимидина (рис. 29.25). Цитотоксическую активность клеточных популяций обычно определяют по их способности лизировать клетки-мишени (например, инфицированные вирусами, опухолевые или аллогенные клетки). Количественно лизис клеток-мишеней определяют при помоши теста с высвобождением меченого хрома (рис. 29.26). [c.542]

Серологические методы имеют следующие основные недостатки 1) пользуясь ими, можно определить количество вирусного белкового антигена, но не количество обладающего инфекциогшостыс вируса в некоторых случаях этот факт, конечно, имеет преимущество 2) постановкой теста иа инфекционность обычно удается обнаружить и измерить приблизительно от /к> до 7юо количества вируса, требуемого для проведения реакции преципитации в пробирке. Однако при некоторых модификациях этот метод требует меньше материала, чем при измерении инфекционности 3) линейная агрегация палочкообразных вирусов может заметно влиять на результаты некоторых методов количественного определения, описанных ниже 4) до сих пор (и это самое главное) эти методы мо кио использовать лишь в отношении ограниченного числа вирусов растений, хотя число это очень быстро увеличивается [1829]. [c.28]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология