Ауксотрофные мутации

Прежде чем обсуждать генетику бактерий, мы должны познакомиться с типами изучаемых мутаций и с используемыми для них обозначениями. Е. соИ дикого типа растет в лабораторных условиях на очень простой среде, единственным органическим составляющим которой служит источник углерода как правило это глюкоза. Штаммы дикого типа прототрофны (см. главу 4) они способны синтезировать любые сложные органические молекулы, необходимые для их метаболизма и роста. Эти биосинтетические способности (анаболические функции) требуют работы (экспрессии) многих существенных (т.е. необходимых для существования бактерий) генов. Многие мутации, нарушающие экспрессию необходимых биосинтетических функций, называются условно летальными (см. главу 7), поскольку бактерии с такими мутациями могут существовать только при добавлении в среду необходимых органических молекул. Такие мутанты называются ауксотрофами (т.е. требующими дополнительного питания). При изучении организации бактериальных генов мы будем рассматривать ауксотрофные мутации только в качестве генетических маркеров. Более подробно они будут обсуждаться в главе 10. Фенотип ауксотрофных бактерий обозначают латинскими буквами, указывающими соединение, которое необходимо добавлять в среду для их нормального роста. Например, Met , Thi и Pur обозначают, соответственно, мутантные штаммы, нуждающиеся в метионине, тиамине и пурине соответствующие прототрофные фенотипы (дикий тип) обозначаются символами Met, Thi и Pur. [c.228]

Причинами, вследствие которых ген проявляется у одних особей и не проявляется у других, а также имеет варьирующую экспрессивность, могут быть влияние внешней среды и (или) генотипа. Роль среды в проявлении гена очевидна в случае ауксотрофных мутаций и других условных деталей. Сальмонелла, несущая мутацию гена, кодирующего ИГФ-синтетазу, неспособна расти на минимальной среде, однако растет при добавлении в среду индола. Дрозофилы, несущие некоторые температурочувствительные летальные мутации, обладают нормальной жизнеспособностью при 20°С, но при 29° они или теряют подвижность, или погибают. Внешняя среда также оказывает влияние на экспрессивность [c.336]

Шокированные сноры имеют более низкую (на порядок) выживаемость по сравнению с необработанными теплом спорами и более низкий уровень выхода ауксотрофных мутантов при одинаковой дозе НММ (0,07-ный раствор, 24 часа). Сходную зависимость по летальному эффекту наблюдали при обработке 0,7%-пым раствором НММ в течение 1 часа. Ауксотрофных мутаций при этой дозе не выявлено. [c.47]

При обработке спор Verti illium dahliae НММ получен высокий выход морфологических и ауксотрофных мутаций гриба. Большинство выделенных мутантов при заражении ими растений хлопчатника оказалось невирулкнт-ным, чем указанные мутанты специфически отличаются от УФ-индуцирован-ных мутантов. [c.352]

Totf--> Топ происходят в сотни раз реже, чем ауксотрофные мутации [c.152]

Температурочувствительные мутации широко используются и в генетике бактерий. Необходимые для нормального существования (существенные) гены, которые невозможно выявить посредством ауксотрофных мутаций, обычно могут быть идентифицированы с помощью температурочувствительных мутаций. Примерами жизненноважных функций могут служить функции, связанные с синтезом белков или нуклеиновых кислот из молекул-предшественников-аминокислот или нуклеотидов (подробное обсуждение мутаций, затрагивающих синтез ДНК, содержится в главе 13). [c.229]

Цля определения взаимного расположения нескольких ауксотрофных мутаций Е. соН проводили эксперимент по прерываемому скрещиванию между про-тотрофным штаммом Hfr Str и штаммом F , А , В , D , Str . В качестве селективных маркеров использовали устойчивость к стрептомицину и прототрофность по D. Определите расположение генов А и В относительно D, считая, что D передается при скрещивании последним. [c.256]

Оптимальные концентрации добавляемых в минимальные среды аминокислот, пуринов, пиримидинов и витаминов, при которых становится возможным рост клеток с ауксотрофными мутациями, часто приходится определять эмпирически. Среди факторов, имеющих важное значение при подборе концентраций добавляемых веществ, укажем следующие количество добавляемого соединения в биомассе клеток, эффективность проникновения этого соедицения в клетку, использование его для синтеза клеточных компонентов, способность бактерий расщеплять добавляемое вещество. В табл. 14.4 приведены концентрации аминокислот, пуринов, пиримидинов и витаминов в стерильных исходных концентрированных растворах и конечные концентрации этих веществ при добавлении к минимальным средам, позволяющие обеспечить максимальный рост мутантных штаммов Е. oli и других грамотрицательных бактерий. [c.121]

Челночные плазмиды типа Е. oli - С. glutami um оказались очень удобными для извлечения индивидуальных генов С. glutami um. С этой целью создают клонотеку гибридных плазмид, несущих фрагменты хромосомной ДНК коринебактерии, и данные плазмиды используют для комплементации ауксотрофных мутаций в Е. соН. Селектированные таким об- [c.282]

Сначала в качестве селективных маркеров плазмид для дрожжевой системы использовали хромосомные гены S. erevisiae, обеспечивающие комплементацию ауксотрофных мутаций. Это вынуждало работать с узким кругом хорошо охарактеризованньк мутантных штаммов дрожжей. Гораздо проще и многостороннее подход, при котором создают плазмиды, детерминирующие устойчивость к антибиотикам, аналогам метаболитов, токсическим соединениям (табл. 12.2). Такие маркеры доминантны и обеспечивают селекцию трансформантов независимо от генотипа клетки-хозяина. [c.298]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология