Розеткообразование

Метод розеткообразования лимфоцитов с эритроцитами барана является наиболее простым и самым распространенным [c.105]

Метод розеткообразования основан на том, что лимфоциты некоторых субпопуляций несут рецепторы, связывающиеся с эритроцитами. Т-клетки человека имеют рецепторы для эритроцитов барана (Э) - молекулы С02 (1). На Т-клетках мыши число таких рецепторов невелико, поэтому Т-лимфоциты мыши изолировать подобным способом невозможно. При смешивании Т-клетки вместе с эритроцитами образуют розетки , которые могут быть отделены от неспособных к розеткообразованию В-клеток в градиенте плотно- [c.540]

Произвести учет результатов метода розеткообразования лимфоцитов с эритроцитами барана для количественной оценки содержания в крови Т-лимфоцитов. [c.105]

Число Г-лимфоцитов в периферической крови определяют, используя реакцию розеткообразования Е-РОК (эритроциты барана образуют с Г-лимфоцитами спонтанные розетки) субпопуляции Г-лимфоцитов — с помощью реакции розеткообразования ЕА-РОК. На мембране Г-хелпера имеется рецептор к / -фрагменту [gM, а на мембране Г-супрессора — рецептор к /с-фрагменту IgG, поэтому Г-хелперы образуют розетки с эритроцитами, покрытыми антиэритроцитарными АТ класса IgM, а супрессоры образуют розетки с эритроцитами, покрытыми антиэритроцитарными АТ класса IgG. [c.91]

Метод ЕАС-розеток. Один из простых методов количественного учета В-лимфоцитов крови человека. В этом случае тест розеткообразования ставят, как и в случае Е-розеток, но с эритроцитами барана, предварительно инкубированными последовательно с антиэритроцитарными антителами, а затем с комплементом. Такие эритроциты присоединяются избирательно к клеткам, несущим рецепторы для комплемента, в том числе к В-лимфоцитам. У здоровых людей В-лимфоциты (ЕЛС-розетки) составляют 15—25% от общего числа лимфоцитов. [c.106]

Хроматографию проводят в указанном выше стерильном буфере со скоростью до 90 мл/час. Собирают активные фракции (восстановление способности лимфоцитов к розеткообразованию трипсинизированных эритроцитов барана в присутствии фактора переноса) — это и есть ЛТФ. [c.594]

Выделение субпопуляций лимфоцитов методом розеткообразования [c.540]

Рис. 51. Выявление рецепторов, к активированным компонентам комплемента техникой розеткообразования. А — получение тест-реагентов эритроцитов с фиксированными на их поверхности различными комплексами активированных компонентов комплемента и регуляторных белков Б — формирование комплекса лимфоцита, имеющего рецепторы для активированных компонентов комплемента с эритроцитами, связавшими комплемент (С )

F -Рецепторы. Молекулы поверхности разнообразных клеток, связывающиеся с F -фрагментом иммуноглобулинов. Специфичны к определенному классу антител, избирательны по изотипу. Рецидивирующий идиотип. Идиотип, выявляемый при иммунном ответе различных животных (или животных разных линий) на данный антиген. Розеткообразование. Метод, используемый для идентификации или выделения клеток определенного типа исследуемые клетки смешивают с частицами или клетками, которые они связывают (например, Т-лимфоциты человека с эритроцитами барана). Розетка представляет собой клеточный агрегат, состоящий из центральной клетки и окружающих ее связанных клеток. [c.562]

Подсчет колоний проводится после окраски с использованием бинокулярной лупы и обычно не вызывает затруднений. Исключение могут представлять культуры костного мозга мышей, в которых может наблюдаться пролиферация макрофагов и миелоидных клеток, контаминирующих колонии фибробластов. Трудности возникают из-за сходства, которое макрофаги и фибробласты приобретают в фиксированных культурах. Для точной их идентификации следует использовать гистохимическую реакцию на неспецифическую эсте-разу, ингибируемую фторидом натрия (положительная у макрофагов и отрицательная у фибробластов) или определение внутриклеточного коллагена I и П1 типов с помощью соответствующих антисывороток (I и Н1 типы коллагена синтезируют фибробласты), а также выявление Рс- и С-рецепторов (имеются на поверхности макрофагов) с помощью реакции розеткообразования с эритроцитами, тонированными иммуноглобулином [3, 4]. [c.262]

Рецепторы к комплементу и комплексу антиген — антитело Розеткообразование Чувствительность к ФГА Чувствительность сР УМ Чувствительность к кортикостероидам Чувствительность к АЛ С Реализация иммунологической памяти [c.55]

Число -лимфоцитов в периферической крови выявляют с помощью кластерного анализа (определение специфических рецепторов с помощью моноклональных АТ) или реакции розеткообразования ЕАС-РОК (эритроциты в присутствии АТ и комплемента образуют розетки с Б-лимфоцитами). [c.90]

В настоящее время разработаны тесты для определения сенсибилизации, основанные на реакциях Т- и 5-лимфоцитов, тканевых базофилов, выявлении общих специфических IgE в сыворотке крови и др. К ним относятся реакции торможения миграции лейкоцитов и бласттрансформации лимфоцитов, специфическое розеткообразование, базофильный тест Шелли, реакция дегрануляции тканевых базофилов, а также аллергосорбентные методы (определение специфических IgE в сыворотке крови). [c.85]

Реакция специфического розеткообразоваыия. Розетки — характерные образования, возникающие in vitro в результате прилипания эритроцитов к поверхности иммунокомпетентных клеток. Розеткообразование может происходить спонтанно, поскольку Т-лим-фоциты человека содержат рецепторы к эритроцитам барана. Спонтанное розеткообразование здоровых людей составляет 52 — 53 % и служит показателем функционального состояния Т-лимфоци-тов. Этот феномен воспроизводится также и в том случае, если используют эритроциты, на которых фиксированы соответствующие аллергены. [c.87]

Оценка гуморального иммунитета (В-системы) проводится путем определения количества В-лимфоцитов в крови реакцией иммунофлюоресценции с антисывороткой против иммуноглобулинов человека или путем выявления на В-лимфоцитах рецепторов для комплемента — с помощью теста розеткообразования лимфоцитов с эритроцитами, несущими на себе комплекс антиэритроцитарные антитела-1-комплемент (ЕАС-розет-ки). Функциональная активность В-лимфоцитов оценивается косвенно по уровням сывороточных иммуноглобулинов (Ig) различных классов A,G, М. [c.105]

В роли селективного фактора могут выступать антитела. При этом мы получаем возможность выделять клетки с определенным набором антигенов клеточной поверхности [31]. Применение антител лежит в основе ряда методов, среди них отбор клеток с помощью клеточного сортера, розеткообразование с эритроцитами, связанными антителами, избирательное прикрепление клеток к поверхности с иммобилизованными на ней антителами. Хотя эффективность селекции клеток с помощью антител недостаточно высока (и более правильным было бы назвать этот метод обогащением), тем не менее селекция с использованием антител применяется во всех методах переноса генов, описываемых здесь, за исключением MMGT. [c.12]

Рис. 50. Выявление F -рецепторов лимфоцитов (Л) с помощью радиомеченого агрегированного IgG (/) или техники розеткообразования с использованием эритроцитов (Э), обработанных IgG-анти-тела.ми (//)

Выявление рецепторов для модифицированного СЗ осуществляют с помощью техники розеткообразования, напоминающей технику выявления F -рецепторов (см. раздел 9.2). Используют эритроциты, сенсибилизированные субагглютинирующей дозой IgG-антител (рис. 51). К ним прибавляют очищенные первый, четвертый, второй и третий компоненты комплемента. Сенсибилизированные эритроциты инициируют активацию классического путп связывания комплемента (см. гл. 8). Образуется [c.207]

В активации Т-клеток наряду с ТкР участвует молекула С02 Т-клеточной поверхности — рецептор функционального антигена 3 лимфоцитов (ЬРА-З), который несут многие клетки и все АПК. Присутствием LFA-3 на эритроцитах барана обусловлена реакция розеткообразован ия (Е-розетки), которую широко использовали для получения очишенной фракции Т-клеток до того, как в практику исследований были введены моноклональные антитела. [c.198]

Выделение в градиенте плотности основано на том, что лимфоциты имеют меньшую плотность, чем эритроциты и гранулоциты (рис. 29.19). Этот способ позволяет выделять большую часть лимфоцитов крови. Розеткообразование и пэннинг ( просеивание через подложку) используют для выделения субпопуляций (рис. 29.20 л 29.21). Пэннинг представляет собой разновидность аффинной хроматографии применительно к лимфоцитам. На сходном принципе основан и способ разделения с помощью магнитных гранул, покрытых специфическими антителами (например, анти-С04). При смешивании с клетками гранулы связывают те из них, которые распознаются фиксированными антителами. Эти клетки можно затем смыть с гранул [c.540]

Целый ряд реакций позволяет выявить аллергизацию организма in vitro. Среди них реакции торможения миграции и бласпрансформахога лейкоцитов, розеткообразования и др. [c.87]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология