Жизнеспособность эксплантатов

Чашки Петри диаметром 9 см, содержащие 25 мл агаризованной среды для поддержания жизнеспособности эксплантатов во время совместного культивирования с агробактериями (например, MSO и RD) и для удаления бактерий после трансформации (например, MSO+ x [250 мкг/мл] и RD+ [c.111]

Жизнеспособность эксплантатов и макроскопические изменения можно контролировать, просматривая препараты при дневном свете или с помощью источника света от бинокулярной лупы. Здоровые и растущие ткани обычно кажутся прозрачными, поверхность их выглядит блестящей. Наличие затенений свидетельствует о потере жизнеспособности или о начинающихся в тканях некрозах. [c.228]

Среда MSO может не подойти для поддержания эксплантатов в процессе трансформации некоторых видов растений. Возможно, для сохранения жизнеспособности, стимулирования клеточного деления и достижения компетентности к трансформации потребуется добавить в нее ростовые [c.116]

При работе с некоторыми эксплантатами среда М50- -Сх (приложение 2[П]) не подавляет рост агробактерий или ингибирует образование каллуса. В этом случае можно использовать другие антибиотики, которые ингибируют бактериальный рост и не оказывают заметного влияния на жизнеспособность многих эксплантатов, например [c.117]

Подбирают условия инокуляции и инкубации, которые позволяют эксплантату достаточное время оставаться жизнеспособным при контакте с агробактериями, чтобы обеспечить возможность трансформации без нарушения образования каллуса или регенерации побегов. [c.119]

Эта смесь ферментов может быть использована только для выделения мезофильных протопластов табака. Подходящий ферментный коктейль при выделении протопластов из нового типа эксплантата, нового вида растения или даже разновидности каждый раз приходится составлять заново. В целом, изменение для растения условий роста предусматривает и изменение в смеси ферментов, необходимой для хорошего выхода жизнеспособных протопластов, способных к образованию клеточной стенки и делению. [c.147]

В 14—16-дневных культурах количество кроветворных элементов несколько уменьшалось, миелоидные клетки, находящиеся на различных стадиях дифференцировки, располагались очагами различной величины вокруг эксплантата ц на периферии поверхностного слоя зоны роста. Вплоть до 18-го дня после подсадки костного мозга в культурах находились жизнеспособные миелоидные клетки, [c.52]

В плазменных культурах лимфатических узлов А. А. Максимов описывал превращение ретикулярных клеток в лимфоциты. О процессе трансформации А. А, Максимов судил по содержанию в лимфоцитах пигмента, характерного для ретикулярных клеток. Однако вряд ли такой маркер в настоящее время можно считать надежным. На основании морфологических наблюдений за органными культурами последовательных сроков можно сделать вывод, что основным (и, может быть, единственным) источником регенерации лимфоидной ткани являются жизнеспособные лимфоциты, которые сохраняются по периферии эксплантата. В группах этих элементов на 4—5-й день культивирования обнаруживаются митозы, и в последующем на их месте образуются вторичные лимфоидные фолликулы. [c.108]

Подходящими эксплантатами считаются целые стерильные проростки, эксплантаты проростков (например, гипокотили, семядоли, листья и корни), эксплантаты выращенной в теплице рассады, более зрелые или размножаемые in vitro растения (например, корень, стебель, лист, черешок, фрагменты цветковых и запасающих органов). Состав используемых сред в какой-то мере зависит от вида растения и типа эксплантата. Например, для роста проростков или эксплантатов побегов может подойти среда, используемая для поддержания культуры побегов того же вида растения. С другой стороны, фрагменты запасающих тканей (клубней, главных корней) часто сохраняют жизнеспособность в течение нескольких недель при культивировании на агаризованной среде, содержащей только неорганические соли. У большинства видов растений корончатые галлы или косматые корни развиваются на больших эксплантатах, культивируемых на простых средах, не содержащих фитогормонов. Главное требование к ростовой среде, используемой при трансформации и развитии опухоли, заключается в том, чтобы она обеспечивала жизнеспособность эксплантата при ограниченном образовании каллуса. При использовании небольших эксплантатов в состав среды можно включить и микродобавки ростовых веществ, чтобы сохранить эксплантат и обеспечить ограниченное деление окружающих рану клеток во время инкубации с агробактериями. Проблему выживаемости эксплантата можно решить, [c.108]

На этой стадии агробактерии прикрепляются к клеткам, расположенным в участках поранения. Предложены различные методики, при воспроизведении которых эксплантаты оставляют в жидкой среде на продолжительное время, чтобы произошли и прикрепление, и трансформация. Время инкубации в этом случае может составлять до нескольких дней в зависимости от того, как инкубация влияет на жизнеспособность эксплантата. Однако многие ткани быстро ра.эрушаются прн инкубации в жидкой среде, особенно в присутствии высоких концентраций агробактерий. Таким образом, большинство типов эксплантатов достаточно обмакнуть в среду, содержащую агробактерии, и трансформация происходит в норме на твердой среде в течение двух д 1еи перед переносом иа среду, содержащую бактериостатические антибиотики. [c.116]

Эксплантаты сначала помещают на полоски линзовой бумаги (см. разд. 7.1) либо ацетата вискозы, смоченные раствором Хэнкса, и эти полоски помещаются на сгусток. Этот метод не снижает жизнеспособность и рост эксплантированных тканей, предотвращает погружение ткани в разжижающуюся плазму и облегчает процесс смены среды. Вместо индивидуального подъема каждого эксплантата можно поднимать сразу все эксплантаты, расположенные на плотике, промывать их раствором Хэнкса, подсущивать на стерильной фильтровальной бумаге и помещать на свежий сгусток. [c.222]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология