Неполный адъювант Фрейнда

Так называемый неполный адъювант Фрейнда представляет собой смесь трех частей легкого минерального масла, одной части безводного ланолина и четырех частей 0,15 М фосфатного буфера. В состав полного адъюванта Фрейнда входят также микобактерии (например, авирулентная или убитая туберкулезная палочка) в конечной концентрации 10 мг/мл. Адъювант следует использовать в виде свежеприготовленной эмульсии. Эмульгирование осуществляют перемешиванием на большой скорости или многократным пропусканием через тонкую иглу шприца. Операцию эту повторяют и при смешивании адъюванта с раствором антигена, который добавляют понемногу, иногда с подогревом до 37°. [c.106]

Неполный адъювант Фрейнда (НАФ) [c.38]

В продаже имеются готовые препараты полного и неполного адъюванта Фрейнда. Весьма хорошо себя зарекомендовала следующая схема иммунизации белковыми антигенами. 0,1—1,0 мг антигена растворяют в 0,25—0,5 мл физиологического раствора хлористого натрия и гомогенизируют с равным объемом полного адъюванта Фрейнда. Эмульсию вводят внутримышечно в четыре места. Спустя 3—4 нед у животного берут кровь и определяют активность антисыворотки в иммуноэлектрофорезе. При необходимости эту процедуру повторяют. Если через 2—3 нед после повторной имму- [c.118]

ПАФ + 10 Неполный адъювант Фрейнда То же [c.102]

При использовании антигенов, полученных с помощью хроматографических методов и поэтому, по крайней мере частично, растворимых, смешайте 0,2—2,0 мг интактного гибридного белка, растворенного в 1 мл физиологического раствора или PBS с 1,25 мл полного адъюванта Фрейнда и получите гомогенную эмульсию, как описано выше. Сделайте зафиксированному кролику подкожные инъекции в несколько мест. Повторите инъекции 0,2—1,0 мг антигена в неполном адъюванте Фрейнда на 14-й и 21-й день и с 28-го дня начинайте брать кровь. Для определения титра антител берите кровь еженедельно и повторите введение 0,2—1,0 мг антигена, когда титр антител начнет уменьшаться. После получения достаточного количества антисыворотки, пока титр антител остается достаточно высоким, возьмите под анестезией кровь из сердца кролика. [c.163]

Более редко используются такие способы иммунизации, как введение иммуногепа в подушечки лап или в конъюнктиву глаза, которые вызывают сильные болевые ощущения у животного. Иммунизацию начинают введением животному иммуногена в смеси с полным адъювантом Фрейнда, а для повторных инъекций применяют неполный адъювант Фрейнда. Перед отбором крови за 7— [c.152]

При использовании денатурированных ДСН антигенов элюируемых из геля, необходимо, чтобы гель содержал макси мально возможное количество белка. Это количество колеб лется от 0,1 до 1 мг/мл в зависимости от стабильности гибрид ного белка и того, насколько он был очищен до электрофореза Животные плохо переносят акриламид, и поэтому антиген еле дует вводить в минимальном объеме. Измельчите срез геля пропустив его несколько раз через шприц. Смешайте пять объ емов полного адъюванта Фрейнда (Gib o) с четырьмя объема ми геля с помощью двух шприцов, соединенных переходником из нержавеющей стали. (Такой переходник можно сделать, спаяв вблизи оснований две стальные иглы № 18 для инъекций.) Полностью эмульгируйте антиген так, чтобы суспензия имела стабильную консистенцию, и сделайте инъекцию зафиксированному или находящемуся под анестезией кролику (весом 2,2— 2,7 кг) внутримышечно в несколько участков тела. Через 14 и 21 день повторите инъекции раствором антигена в неполном адъюванте Фрейнда. На 28-й день возьмите у животного кровь из ушной вены ( -(20 мл, что не представляет опасности для жизни животного). Кровь можно брать еженедельно до тех пор, пока животное остается здоровым, а дополнительные введения антигена можно проводить примерно каждые шесть — восемь недель. [c.163]

Иммунизация мышей. 30—50 мкг инсулина растворяют в 0,1 мл 0,15 М раствора Na l, pH 7,4 смешивают с равным объемом адъюванта Фрейнда и вводят мышам внутрибрюшинно. Через 4—5 недель повторно вводят 30 мкг инсулина в неполном адъюванте Фрейнда внутрибрюшинно. За 3—4 дня до слияния вводят 20 мкл инсулина без адъюванта внутрибрюшинно и 10 мкг внутривенно. [c.167]

Для растворимых антигенов известны разнообразные схемы иммунизации. Например, первую инъекцию 100 мкг антигена, эмульгированного в полном или неполном адъюванте Фрейнда, осуществляют подкожно (в 0,1 мл), а последующие инъекции (оо 100 мкг в PBS объемом 0,5 мл) проводят в/б с интервалом в месяц. Отбирают пробу крови, чтобы убедиться в наличии адекватного титра антител в сыворотке, а затем осуществляют последние инъекции антигена (в/б утром и в/в днем), за 3—4 дня до гибридизации. [c.123]

Взрослым кроликам вводят внутримышечно по 1 мл эмульсии ПАФ, содержащей 500 мкг ap -KLH (по 0,5 мл в каждое-бедро). Иммунизацию повторяют через 2—3 недели. Еще через-10 дней можно взять кровь из уха (от 30 до 50 мл в зависимости от веса кролика). Прн последующих иммунизациях вводят по 200 мкг ap -KLH, эмульгированных в неполном адъюванте Фрейнда. Можно сделать несколько таких введений л каждый раз брать порции Крови нз уха. [c.171]

Спустя месяц иммунизацию повторяли, вводя 500 мкг ан-тигена в неполном адъюванте Фрейнда. [c.225]

У мышей, примированных пептидом в неполном адъюванте Фрейнда путем его подкожного введения, развивается иммунитет к ВЛХМ. Однако, если тот же пептид введен внутрибрюшинно, животные становятся толерантными и теряют способность элиминировать вирус рис. 13.3). [c.238]

Генноинженерными методами можно также создать плаз-мидные векторы для экспрессии вирусных белков, не слитых с бактериальными, например поверхностного гликопротеина вируса бешенства [99, 203]. Хотя синтезированный таким способом гликопротеин вируса бешенства имеет полную длину, он не гликозилирован и не вызывает защитного иммунитета у мышей [99]. Как уже отмечалось выше, неполный адъювант Фрейнда, используемый для обнаружения антигенности синтезированных в Е. oli вирусных белков, не годится для применения на людях. Это означает, что, прежде чем эти белки [c.155]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология