Иммунофлуоресцентные методы

Иммунофлуоресцентное окрашивание с помощью поликлональной антисыворотки представляет собой удобный и точный метод подсчета зараженных клеток и выявления места размножения вируса при анализе фиксированных срезов зараженных тканей. Используя моноклональные антитела против индивидуальных вирусных полипептидов, иммунофлуоресцентным методом можно изучать и внутриклеточную локализацию вирусных антигенов. [c.139]

Иммунофлуоресцентные методы широко используются для обнаружения аутоантител и антител к тканевым и клеточным антигенам (рис. 29.8). Хотя эти методы технически более сложны, чем описанные выше, они имеют явное преимущество в тех случаях, когда требуется определить число видов антител. Используя срезы тканей (содержащих большое число антигенов), на одном предметном стекле можно выявить антитела к нескольким разным антигенам, установив при этом их внутритканевое (клеточное) или внутриклеточное распределение. [c.530]

Прямой иммунофлуоресцентный метод. Раствор антител, меченных флуоресцентным красителем, наносят на поверхность среза препарат инкубируют, после чего отмывают от избытка антител. Затем связавшиеся антитела выявляют при помощи флуоресцентного микроскопа. Пучок УФ-лучей, направленный на срез через объектив, позволяет видеть темное поле со светящимися зеленым цветом участками, где локализованы связанные антитела. Распределение флуоресценции на срезе имеет характерный вид для каждого тканевого антигена. [c.533]

Непрямой иммунофлуоресцентный метод со связыванием комплемента. Этот вариант метода разработан для определения комплемент-связываю-щих антител (см. рис. 29.7). После обработки среза антителами на него наносят в качестве источника комплемента свежую сыворотку. Комплемент связывается в участках, где фиксированы антитела. В результате эффекта усиления при активации комплемента по классическому пути (см. гл. 5) одна молекула антител может вызвать связывание многих СЗЬ-молекул на срезе их выявляют, обрабатывая срез флуоресцентно меченными антителами анти-СЗЬ. [c.533]

С использованием специально полученных новых моноклональных антител и иммунофлуоресцентного метода вы идентифицировали некую молекулу на поверхности Т-лимфоцитов. Выберите методы, позволяющие получить ответы на следующие вопросы [c.546]

Исследования цитоскелета растений были сосредоточены в основном на микротрубочках, вероятно, потому, что их легче, чем другие цитоскелетные структуры, увидеть в электронный микроскоп. Появление подходящих иммунофлуоресцентных методов расширит круг струк- [c.70]

Первоначально оценивали рост этих организмов при посеве в стаканчики, которые ставили в эксикаторы с газовой смесью. Затем стали применять посев шприцем в пенициллиновые флаконы на элективные среды с пропаном, что дает лишь качественный ответ, вполне достаточный в большинстве случаев. Наконец, в последнее время разработаны иммунофлуоресцентные методы учета родокок-ков в природных средах. [c.145]

Последняя проблема, которую необходимо решить, — это проблема скрининга. Важно иметь надежную методику для простого и точного скрининга культуральных жидкостей отдельных клонов на содержание антител нужной специфичности. Избранный метод (например, РИА, ELISA и т. д.) должен быть чувствительным и должен давать по возможности количественную информацию. Анализ, основанный на связывании флуоресцент-номеченных антител (иммунофлуоресцентный метод, ИФМ), требует наличия 0,2—1 мкг МА в 25 мкл культуральной жидкости. При этом с его помощью можно определять большинство типов детерминант клеточных поверхностей. Этот метод дает также количественную информацию о среднем числе молекул, экспрессируемых на одной клетке, что является немаловажным преимуществом в случае низкоаффинных МА. Поскольку [c.178]

Рис. 4. Непрямой иммунофлуоресцентный метод гаптенизированных антител. Два препарата аллоиммунных антител конъюгированы с двумя гаптенами, не имеющими между собой антигенного перекреста (изображены черными кружками н прямоугольникамв). Их используют вместе с двумя препаратами соответствующих антнгаптеновых антител, меченных флуоресцеином (Ф) или родамином (Р). Это по.зволяет окрасить на поверхности клетки одновре-мелно два аллоантигена (изображены белыми прямоугольниками или треугольниками).

В настоящее время многими фирмами выпускаются эритро-цитарные, радиоактивные и ферментативные диагностикумы, в том числе для обнаружения вируса гепатита В (например, диагностикумы Abbot Laboratories, Ltd., UK). Мы не считаем целесообразным излагать методы работы с указанными диагно-стикумами вполне достаточно следовать прилагаемым инструкциям. Ниже мы остановимся на иммунофлуоресцентном методе идентификации респираторно-синцитиального вируса в носоглоточных выделениях. [c.308]

Непрямой иммунофлуоресцентный метод. Раствор немеченных антител наносят на срез, а затем выявляют их при помощи меченных флуорохромом антииммуноглобулиновых антител. [c.533]

Двигательные белки, сходные с кинезином и динеином, существуют не только в нейронах. По-видимому, они имеются во всех клетках, где есть микротрубочки, и ряд важных организующих функций микротрубочек осуществляется, судя по всему, именно благодаря этим белкам. Как показали недавние исследования in vitro, кинезин прикрепляется к мембране эндоплазматического ретикулума и может растягивать ее вдоль ориентированных микротрубочек, превращая эту органеллу в характерную сложную сеть. Работы, проведенные на интактных клетках, тоже указывают на то, что ретикулум растягивается по ходу микротрубочек в направлении от центросомы, как и следует ожидать, если это происходит при участии кинезина. Наконец, иммунофлуоресцентными методами показано, что тонкие края цистерн ретикулума в периферических участках клеток часто располагаются вдоль микротрубочек (рис. 11-72,А h J. [c.312]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология