Антитела низкоаффинные

Взаимодействие двух субпопуляций антител с моновалентным антигеном. Одним из простых приближений при описании реальных систем взаимодействия моновалентного антигена (гаптена) с антителами может быть модель, согласно которой набор популяций антител заменяется двумя —высокоаффинной и низкоаффинной, каждая из которых характеризуется собственной константой комплексообразования — Kt и Кг. Задача определения констант и концентраций каждой из фракций антител перед экспериментаторами возникает ч асто. Знание численных значений этих параметров весьма важно для разработки конкретных наборов для иммуноферментного анализа и выбора схемы проведения имму- [c.47]

В частности, например, описаны распределения, сильно смещенные в сторону антител с низкой аффинностью.. Вследствие этого представление всей популяции антител как популяции, взаимодействующей с одной средней аффинностью (Ко) или даже как бимодальной Ко высокоаффинная и Ко —низкоаффинная), не всегда точно отражает распределение антител по аффинности. [c.40]

Если значения концентраций и констант связывания двух функций антител значительно отличаются, то возрастание [Аг ]о может приводить к возрастанию фонового сигнала, что проявляется в сдвиге правой части калибровочного графика вверх по ординате. Это объясняется тем, что при достижении полного заполнения высокоаффинных центров связывания дальнейшее возрастание [Аг ]о ведет к увеличению связывания конъюгата только с низкоаффинной фракцией, дающей вклад в калибровочную кривую в виде практически не меняющегося в необходимом диапазоне концентраций [Аг]о сигнала. Расчетные кривые приведены на рис. 42. Для получения теоретической иллюстрации этого эффекта в модель были введены соответствующие усложнения, позволяющие считать популяцию антител состоящей из двух фракций с различным сродством к антигену. [c.243]

Из выражения (3.19) следует, что [Аг] о = 1/ С при условии 1/ >[Ат]о (т. е. либо антитела являются низкоаффинными либо их концентрация мала). При обратном соотношении (1/7С С[Ат]о) данный метод определения К неприемлем. [c.45]

Аффинность связывания антител с антигеном представляет не только теоретический интерес. От нее, как и от авидности, зависят физиологические и патологические эффекты антител. Высокоаффинные антитела гораздо активнее низкоаффинных в ряде биологических реакций рис. 9.14). В экспериментах на животных иммунные комплексы, содержащие низкоаффинные антитела, длительно персистируют в циркуляции и [c.155]

Рис. 32. Теоретическая иллюстрация изменения положения калибровочного графика при снижении константы связывания меченого антигена и наличии в системе низкоаффинных центров неспецифического связывания (или низкоаффинной фракции антител)

Анализ данной модели позволяет оценивать влияние добавки в систему низкоаффинной фракции антител на результаты определения антигена (рис. 37). Из решения системы уравнений (9.15—9.18) на ЭВМ следует, что вклад низкоаффинных антител в основном проявляется в сдвиге калибровочного графика вверх по оси ординат и увеличению фонового сигнала. [c.236]

Последняя проблема, которую необходимо решить, — это проблема скрининга. Важно иметь надежную методику для простого и точного скрининга культуральных жидкостей отдельных клонов на содержание антител нужной специфичности. Избранный метод (например, РИА, ELISA и т. д.) должен быть чувствительным и должен давать по возможности количественную информацию. Анализ, основанный на связывании флуоресцент-номеченных антител (иммунофлуоресцентный метод, ИФМ), требует наличия 0,2—1 мкг МА в 25 мкл культуральной жидкости. При этом с его помощью можно определять большинство типов детерминант клеточных поверхностей. Этот метод дает также количественную информацию о среднем числе молекул, экспрессируемых на одной клетке, что является немаловажным преимуществом в случае низкоаффинных МА. Поскольку [c.178]

Аналогичный эффект наблюдается и при наличии процесса неспецифического взаимодействия, который обусловлен связыванием меченого антигена избытком центров, обладающих меньшей константой связывания, чем антитела. Для подавления роста вклада неспецифического связывания (или влияния низкоаффинных антител) можно рекомендовать использовать в анализе концентрацию меченого антигена, при которой связывающие центры антител заполняются не более чем на 60—70% или, в линейном приближении, [Аг ]о 1/( 1 Т) (при выбранном оптимальном времени Т). [c.244]

Биологические реакции, в которых высокоаффинные антитела эффективнее низкоаффинных. [c.156]

Размеры зон гемолиза зависят и от количества, и от качества выделяющихся антител при одина Говом числе молекул высокоаффинные антитела образуют меньшие зоны, чем низкоаффинные. [c.53]

I Для первичного иммунного ответа на Т-зависимые антигены характерно образование низкоаффинных IgM-антител. При вторичном иммунном ответе продуцируется большее количество антител и происходит переключение изотипов с образованием IgG, IgA и IgE. Одновременно с этим возрастает аффинность антител. [c.194]

Аффинность антитела к антигену - это результирующая возникающих между ними сил притяжения и отталкивания. Высокоаффинные антитела точно комплементарны по конформации антигену, а низкоаффинные, напротив, неточно. [c.152]

Высокоаффинные антитела часто эффективнее низкоаффинных [c.155]

Гистологическая картина образования активных антителопродуцентов. Одной из характерных черт организации лимфоидной ткани является наличие так называемых центров размножения, которые представляют собой место пролиферации, трансформации и селекции В-клеточных клонов (рис. 9.21). В-Лимфоциты, активированные хелперными Т-клетками в тимусзависимой зоне лимфоидной ткани либо сразу дифференцируются в плазматические клетки, продуцирующие ранние, суммарно низкоаффинные антитела, либо перемещаются в первичные фолликулы и образуют там центры размножения. Здесь они, во-первых, подвергаются селекции на наличие высокоаффинных антигенраспознающих иммуноглобулиновых рецепторов и, во-вторых, завершают дифференцировку в плазмоциты, продуцирующие высокоаффинные антитела. Часть В-клеток с высокоаффинными рецепторами трансформируется в клетки памяти. [c.251]

Процесс созревания В-клеточной аффинности протекает в центрах размножения (рис. .25). Они образуются в селезенке или лимфатических узлах спустя несколько суток после антигенной стимуляции. В-лимфоциты, активированные Т-клетками посредством связывания D40 с его лигандом, мигрируют в первичные фолликулы, где имеется густая сеть фолликулярных дендритных клеток. В этом окружении происходит быстрое деление В-клеток, сопровождающееся соматическим мутированием lg-генов. В-клетки с высокоаффинными рецепторами проходят отбор по выживаемости, основанный на взаимодействии их мембраносвязанных поверхностных антител и комплекса В-клетка-корецептор с антигеном и комплементом на поверхности фолликулярных дендритных клеток. При прохождении через центр размножения В-лимфоциты экспрессируют ген клеточной выживаемости , bd-2. Клетки с высокоаффинными IgG за счет связывания продукта bd-2 избегают апоптоза клетки же с низкоаффинными рецепторами таким свойством не обладают и погибают в результате апоптоза. [c.214]

Особая область в лимфатических узлах или селезенке, где активированные антигеном В-клетки интенсивно делятся каждые 5-7 ч (для большинства других соматических клеток время между делениями составляет около 20 ч). В типичном центре размножения находится примерно 20 тыс. В-клеток, происходяших от одной-трех клеток-основателей. В центрах размножения активируется процесс соматического гипермутирования В-клеток. Клетки, несущие на поверхности мутантные антитела высокой аффинности, отбираются антигеном, выживают и образуют В-клетки памяти. Клетки, несущие нефункциональные или низкоаффинные антитела, не отбираются антигеном и погибают (в результате апоптоза). Центры размножения, следовательно, можно рассматривать как места интенсивного дарвиновского выживания наиболее приспособленных продуцирующих антитела клеток. [c.208]

Величина этого параметра определяет возможность применения тех или других антител. Иммуноанализ и гистохимические методы требуют антител с высоким сродством (/Ссв=Ю-э—чтобы комплексы антигена с антителами были очень прочными С другой стороны, имму-ноаффинная очистка лучше осуществляется с низкоаффинными антителами Ксв=10- —10- ), поскольку в этих условиях адсорбция и освобождение антитела проходят при относительно мягких условиях без повреждения антигена и антител и колонка может использоваться повторно. Анализ взаимодействия антител с антигеном проводят по методу Скэтчарда (см. с. 343) с использованием радиоиммунного анализа. [c.324]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология