Линейный полиакриламид

Линейный полиакриламид от 2 до 8 Белки [c.70]

Покрытия на основе линейных полиакриламидов [c.75]

Электроосмос и стабильность. ЭОП полностью подавляется при покрытии поверхности капилляра линейным полиакриламидом. Стабильность таких капилляров при низких pH (до 3) очень высокая, однако в щелочной среде при рН>8 они нестабильны. Эта нестабильность проявляется в постепенном появлении ЭОП, а также колебаниях времени миграции проб. [c.75]

Применимость. С учетом простоты производства, а также доступности приобретения покрытия на основе линейных полиакриламидов нашли широкое применение. В первую очередь речь идет не только о разделении белков, но и некоторых биомолекул - таких, как фрагменты ДНК. [c.75]

Вследствие того, что покрытия на основе линейных полиакриламидов позволяют полностью подавить ЭОП, можно перенести такой классический способ разделения, как ИЭФ, на КЭ. [c.76]

Свойства и применимость. Оптимальная рабочая область для такого типа покрытий для разделения белков приходится на область сильных кислот, в которой капилляры сохраняют стабильность в течение нескольких недель. На рис. 68 показано разделение 15 ( ) стандартных белков в области р от 4.5 до 11 ( ) и ММ от 12000 до 77000. Эффективность достигает 700000 теоретических тарелок в течение 25 минут. Покрытия на основе ПВП для кварцевых капилляров являются высокопроизводительными и при использовании в области, кислотных pH вполне конкурируют с покрытиями на основе линейных полиакриламидов. [c.77]

Рис. 91. Влияние буферных добавок на разделение энантиомеров. Условия разделения L 40/47 см, Е=232 В/см, (анод на стороне детектора), капилляр с покрытием (4% линейный полиакриламид),

Линейный полиакриламид - Силикагель (ад- Си"" ДЬ-АА [c.145]

Подвижная фаза всегда водная, обычно забуференная, содержит некоторое, очень малое (= 0,1—1,0 мМ), количество металла-комплексообразователя. Известную пользу иногда приносит применение смесей воды с такими органическими растворителями, как метанол или ацетонитрил, в качестве модификаторов. На линейном полиакриламиде, содержащем аминокислотные фрагменты и Си(П) и сорбированном на силикагеле, лигандный обмен также проходит медленно [114]. [c.146]

В области биологически важных проб наряду с белками определенную роль играют также нуклеотиды, олигонуклеотиды и фрагменты ДНК. Такого рода пробы в КЭ до настоящего времени разделяли методом МЭКХ, а также полиакриламидгелевым КЭ. Покрытия на основе линейных полиакриламидов в сочетании с макромолекулярными буферными добавками можно привлечь для разделения фрагментов радикалов ДНК в широкой области. [c.76]

Использование покрытых капилляров для этих целей представляется вполне выгодным, поскольку проблемы, связанные с использованием капилляров, заполненных гелем (образование пузырей, воспроизводимость и стабильность гелей) еще не решены. Наконец, капилляры, покрытые линейными полиакриламидами, можно использовать также для изготовления гельзаполненных капилляров. [c.76]

Наиболее изученными с точки зрения влияния на этот эффект являются полиэтиленоксид [47, 80, 175, 217, 221, 225, 226, 228, 229, 239, 254, 272, 273, 280, 365, 370, 410, 488, 506, 545, 567, 569, 639, 773, 774, 785, 830, 943], разветвленный [414] и линейный полиакриламид [215, 228, 280, 410, 506, 567, 748, 749, 807, 898, 1026], гуаровая смола [209, 263, 410, 748, 785, 898, 943], полиизобутилен [570, 621], карбоксиэтилцеллюлоза [280, 785], полисахариды [410], полистирол [370, 623, 861] и полиакриловая кислота [567, 774]. [c.420]

Следует иметь в виду, что при элюции белков из геля может выходить большое количество линейного полиакриламида, не вошедшего в состав матрицы геля. Он не обнаруживается при оценке чистоты белка аналитическим электрофорезом. Между тем аналитическое ультрацентрифугирование показывает, что количество элюированного полиакриламида может быть таким же, как и самого белка. Дополнительную очистку белка в этом случае можно провести его сорбцией на ионообменную смолу [Brooks, Sander, 1980]. [c.118]

Боде (Bode, 1977] проводил полимеризацию акриламида из его 7,5%-НОГО раствора в 0,1 М фосфатном буфере (без добавления метиленбисакриламида) с помощью обычных инициаторных добавок под вакуумом в течение ночи. Он получил очень вязкую жидкость, содержащую длинные и спутанные нити линейного полиакриламида. Эту жидкость он смешивал в различных пропорциях с расплавленным 1%-ным раствором агара. При охлаждении смесей получались достаточно прочные гели, в которых жесткая и крупнопористая пространственная сетка агара была заполнена полужидким линейным полиакриламидом. Эта система обеспечивала такое же хорошее электрофоретическое разделение белков, как и нормальный ПААГ с тем же содержанием акриламида. Правда, нижний конец трубки при этом приходилось закрывать диализной пленкой во избежание вытекания геля . [c.149]

В ранних работах по секвенирующему капиллярному электрофорезу гелевым матриксом служил обычный полиакриламидный гель. Однако его нестабильность, формирование пузьфь-ков воздуха, видимых при микроскопическом исследовании капилляров, заметно снижали производительность метода. Применение линейного полиакриламида позволило снять эти проблемы и способствовало развитию данного метода. [c.44]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология