Трипсин сшивание

Сшивание трипсина с альбумином человека и свойства конъюгатов как потенциальных тромболитических агентов изучены в работах [137,138]. Сохранение ферментативной активности зависело от условий реакции, причем активность снижалась с увеличением концентрации сшивающего агента, pH и продолжительности реакции, т. е. при многоточечных сшивках и образовании массивных конгломератов (М 2 млн.). Блокирование свободных альдегидных групп приостанавливало снижение активности. Оптимум pH конъюгатов оказался не смещенным, а взаимодействие с соевым ингибитором снижено в результате влияния одноименно с ним заряженной альбуминовой части конъюгата. Активность по казеину была лишь 17 % для невосстановленного конъюгата и 84 % для восстановленного борогидридом. Повышение физиологической активности белка при снижении концентрации сшивающего агента (глутарового альдегида) наблюдалось и в других случаях. [c.200]

С. г. играют важную роль в биохимич. процессах. С. г. таких низкомолекулярных соединений, как кофермент А, глютатион, липоевая кислота, способны образовывать тиоэфиры и участвовать в ферментативных реакциях нереноса ацильных остатков. С. г. белков принадлежат остаткам цистеина они принимают участие в создании вторичной и третичной структур белков за счет взаимодействия с другими функциональными группами полипептидной цепи жесткое сшивание отдельных цепей (нанр., в инсулине) или участков одной цепи (напр., в трипсине, химотрипси-не и др. ферментах) нутем образования дисульфидных мостиков образование водородных связей и координационных связей с участием металлов и т. п. С. г., З аствуя в создании разнообразных химич. связей [c.551]

Образовавшиеся разветвленные и, по-видимому, структурно-неоднородные полимеры (2.4) оказались растворимыми в воде и способными к биодеструкции химотрипсином, трипсином и папаином, а также лизосомальными тиольными протеазами, например катепсином В. Скорость деструкции зависела от длины и структуры олигопептидной последовательности. Предварительными опытами было показано, что после внутривенного введения слабо сшитых сополимеров (2.4) (Х-01у-01у-РЬе-Туг) крысам в моче содержался полимер с ММР, близким к тому, которое имел введенный сополимер до сшивания диамином [48]. В случае несшитых сополимеров с олигопептидными вставками , содержащими на конце п-нитроанилин, последний также был обнаружен в моче крыс. Поскольку скорость эндоцитоза полимеров по-разному зависит от М для разных клеток, это явление может служить дифференцирующим фактором для целенаправленного транспорта [49. Недостатком сополимеров с олигопептидными вставками является появление у них им-муногенных свойств, отсутствующих у поли(2-гидроксипро-пил) метакриламида. [c.62]

Сшивание террилитина или трипсина с сывороточным альбумином человека альдегидным методом приводит к снижению сродства обоих ферментов к ингибиторам протеиназ, присутствующим в крови [139]. Константа ингибирования для террилитина увеличивается в 3—4 раза, а для трипсина — на 2—3 порядка. Бремя рекальцификации крови не меняется для конъюгата террилитина, для конъюгата трипсина коагулирующая активность снижается. Оба конъюгата обладают пониженной острой токсичностью, по-видимому, за счет уменьшения сродства террилитина к его ингибитору — сс-макроглобулину, а для трипсина — за счет снижения коагулирующей активности. [c.200]

Связывание фермента с твердой подложкой можно осуществлять с помощью бифункциональных веществ, индуцирующих образование межмолекулярных связей (рис. 6.4) Сшивать фермент с самим собой и дорого, и неэффективно, поскольку при этом часть белкового материала неизбежно будет выступать просто как подложка, и в целом ферментативная активность будет относительно низкой. Недостатком такого подхода являются также диффузионные ограничения и отсутствие жесткости или механической прочности.бифункциональные реагенты широко применяют для стабилизации физически адсорбированных ферментов сшиванием. В частности, глутаровый альдегид реагирует с лизиновыми аминогруппами фермента и, в случае трипсина, в значительной степени предотвращает саморасщепление пептидной связи вблизи точки закрепления на поверхности. Для таких реакций необходимо подбирать оптимальные условия. Так, перевод лизоцима и папаина в нерастворимую форму быстрее всего идет при pH, близких к изоэлектрической точке. [c.85]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология