Пластеиновая реакция

Образование регулярных полипептидов имеет место также при пластеиновой реакции (521, 522], при которой под каталитическим воздействием различных протеаз (трипсин, хнмотрипсии, пепсин, катепсин и т. д.) из так называемых пластеинак-тивных пептидных мономеров получаются продукты конденсации — пластеины. В качестве субстратов годятся продукты частичного ферментативного гидролиза белков (пептоны, альбумозы и др.). Первый пластеиноактивный синтетический пептид имел последовательность Туг-Пе-01у-01и-РЬе. [c.211]

В случае синтетических субстратов получались пластеины с более низкими молекулярными массами, чем при работе с продуктами, полученными при ферментативном распаде белков. Хотя механизм пластеиновой реакции выяснен еще не полностью, формально речь здесь идет об обращении катализируемого протеазами расщепления пептидной связи (разд. 2.2.5.8). [c.211]

Некоторые пентапептиды в концентрированном водном растворе при каталитическом действии пепсина могут вступать в реакцию поликонденсации с потерей воды (пластеиновая реакция). Смесь олигомеров пентапептида тирозил-лейцил-пролил-глутамил-фенилаланина была разделена на длинной колонке с сефадексом 0-25 (4,2X200 сж, 2,8 л) (фиг. 28). [c.153]

Некоторые протеолитические ферменты обладают способностью инициировать образование высокомолекулярных белковоподобных соединений из концентрированных растворов продуктов ферментативного расщепления протеинов. Изучение этого ферментативного синтеза полипептидов (пластеиновой реакции) до недавнего времени проводили лишь на смесях пептидов, образующихся при ферментативном гидролизе белков. Аналогичные работы с синтетическими пептидами были опубликованы только в течение нескольких последних лет. Пластеин-активны-ми ферментами являются химотрипсин и пепсин. Оптимальные значения pH для образования пластеинов равны 7 в случае химотрипсина [2284] и 4 в случае пепсина [2378]. При этих же значениях pH протеолитическая активность ферментов минимальна. [c.393]

Отличие аминокислотного состава пластеина от состава гидролизата навело на мысль, что не все пептиды, присутствующие в реакционной смеси, принимают участие в образовании пластеина [1068, 2285, 2378]. По-видимому, важная роль в этом принадлежит концевым аминокислотам [2380]. Аминокислоты и пептиды с очень короткой цепью не вступают в пластеиновую реакцию. С другой стороны, если пептидная цепь является слишком длинной, то образование пластеинов сопровождается расщеплением пептидов [2378]. Оптимальная длина пептидной цепи составляет от 5 до 8 аминокислотных остатков. На образование пластеинов влияет также концентрация гидролизата [2378]. Соли в больших концентрациях ингибируют протеолитическую активность ферментов, облегчая тем самым протекание пластеиновой реакции [2286]. Выходы пластеинов составляют 15—20% [2285, 2378, 2380] самый высокий выход (около 50%) получен при изучении гидролизата пластеина [2378]. [c.393]

Относительно механизма пластеиновой реакции были высказаны различные предположения. Иногда наблюдали уменьшение содержания N-концевой аминокислоты, что привело к гипотезе [c.393]

Молекулярный вес пластеинов, полученных с помощью химотрипсина, изменяется в пределах от 250 000 до 500000, причем иногда молекулярный вес пластеина превышает молекулярный вес природного протеина, который подвергали гидролизу [2285], Продукты пластеиновой реакции, катализируемой пепсином, имеют значительно более низкие молекулярные веса в литературе приведены различные величины — от 500 до нескольких тысяч [1068]. [c.394]

Описанные выше исследования проведены на довольно сложных смесях пластеин-активных гидролизатов. Впервые образование пластеинов из фракции гидролизата пластеинов, выделенной электрофорезом, описано Виртаненом [2378], выход пластеина составил 44%. Виланд и сотр. [2530] и Детерманн и сотр. [591, 592] выделили гомогенные пластеин-активные пептиды из пептона Витте, заложив тем самым основы для детального изучения пластеиновой реакции. Сведения, необходимые для развертывания синтетических исследований в этой области, получены после установления строения этих пептидов. Ферментативными методами (гидролизом аминопептидазой или карбоксипептидазой, а также частичным гидролизом химотрипсином) было показано, что пластеин-активные пептиды имеют следующее строение [c.394]

Пластеиновую реакцию проводили следующим образом раствор 100 мг пептида в 0,1—0,2 мл воды доводили до pH 4 и инкубировали при 37° в течение 15—24 час в присутствии менее [c.396]

Все синтетические пептиды (1) — (9) были пластеин-актив-ными. На основании этого сделан вывод об отсутствии влияния аминокислот, расположенных в середине пептидной цепи, на ход пластеиновой реакции. Несущественно также, является ли пептид нейтральным, основным или кислым. Интересно, что даже основные пластеины нерастворимы в кислотах. Все пластеины образуют хорошо растворимые натриевые соли. Детерманн и сотр. [5896] изучали, кроме того, влияние длины цепи и природы N- и С-концевых остатков на пластеиновую реакцию. С этой целью были синтезированы следующие пептиды [c.396]

Пептид (10) активен, а пептиды (1 ) и (12) не вступают в пластеиновую реакцию следовательно, для того чтобы пептид был пластеин-активным, он должен иметь ароматическую С-конце-вую аминокислоту. Тетрапептид (14) имеет минимально необходимую длину цепи, так как трипептид (15) уже неактивен. С другой стороны, допускается удлинение пептидной цепи, например до гексапептида (13). [c.397]

Получение синтетических пластеин-активных пептидов позволило высказать более обоснованные предположения о механизме пластеиновой реакции [590, 593]. Так, например, стало очевидным, что катализируемая пепсином пластеиновая реакция представляет собой поликонденсацию, сопровождающуюся отщеплением воды, поскольку пластеины имеют точно такой же аминокислотный состав, что и исходные пептиды. По-видимому, это же относится и к пластеиновой реакции, катализируемой химотрипсином. Более того, если исходным веществом служила смесь чистых пептидов, то пластеин и в этом случае сохранял аминокислотный состав смеси. За исключением небольшого количества непрореагировавшего пептида, в реакционной смеси после выделения пластеина не найдено никаких других побочных продуктов. [c.397]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология