Разделительные камеры и насыщение атмосферы в них

IV. РАЗДЕЛИТЕЛЬНЫЕ КАМЕРЫ И НАСЫЩЕНИЕ АТМОСФЕРЫ В НИХ [c.23]

Одним из непременных условий для получения устойчивых значений Rf является насыщение атмосферы камеры парами подвижного растворителя [217]. Существующие конструкции разделительных камер обеспечивают это насыщение. В случае недостаточного насыщения камеры в результате неравномерного испарения растворителя с различных участков поверхности слоя наблюдается так называемый краевой эффект, при котором одни и те же вещества у краев пластинки имеют большие значения Rf, чем в центре. Для устранения краевых эффектов необходимо равномерное насыщение камеры парами растворителя перед хроматографическим процессом, которое может быть достигнуто помещением в камеру (прижимают к стенке) смоченного этим растворителем листа фильтровальной бумаги. Перед опытом камеру выдерживают 30 мин. Перед тем как вставить пластинку, фильтровальную бумагу еще раз смачивают растворителем, наполняя камеру. При работе с насыщенной камерой время анализа значительно сокращается. [c.22]

Для методов 1—3 в качестве конструкционного материала камер предпочитают стекло или иногда сталь марки У2А или, лучше, марки У4А. Камеры из пластмасс могут быть использованы лишь в некоторых случаях (метод 4) из-за неустойчивости по отношению к органическим растворителям. При применяемых в настоящее вревдя разделительных камерах особое внимание следует уделить насыщенйю атмосферы камеры [60]. Существующие здесь зависимости можно наблюдать, проведя следующие 4 опыта. [c.23]

Шталь, Болигер и Ленерт [53] нашли, что, используя только один адсорбент и один растворитель, нельзя разделить встречающиеся смеси каротиноидов. Применяя слои гидроокиси кальция, фосфата магния и силикагеля Г и соответствующие растворители, удалось разделить группы каротиноидов на отдельные соединения (почти тридцать различных производных, см. таблицу 27). Для проверки этой схемы анализа одновременно хроматографировались неизвестные растительные экстракты, содержащие каротин, которые можно было непосредственно или косвенно проанализировать количественно. Нанесение осуществляли в виде полос на слои толщиной 0,5 мм (длина разделительного слоя 10—12 см, время анализа около 15 мин). По-видимому, целесообразно по приведенной схеме провести классификацию еще большего числа каротиноидов и другие группы расположить в таком же порядке. Во всех опытах при применении С-камер были достигнуты лучшие результаты по сравнению с до сих пор применяемыми стеклянными лотками. Эта система разделительной камеры делает излишним насыщение атмосферы камеры и позволяет на пластинке шириной 40 см параллельно анализировать более 30 смесей, чтобы сравнить их. [c.217]

Следующий фактор, влияющий на качество разделения, это насыщение слоя парами растворителя, которое всегда сопутствует процессу в разделительной камере. В литературе имеются рекомендации но использованию насыщенных и ненасы-пюпных слоев [5, 6]. Рекомендации носят чисто качественный характер. Влияние этого фактора интересно исследовать также количественно, определив вес поглощенного растворителя. Для этого проведены опыты по разделению на слоях, предварительно насыщенных парами элюеита, включая смоченный слой, путем выдерживания их в атмосфере камеры в течение разного времени (рис. 5а). Каждый опыт проводили иа двух параллельных пластинах одни пластины использовали для разделения, другие — для взвешивания. Найдено, что с увеличением количества ноглощепиого бензола / / для всех трех красителей снижались. Наилучшее разделение отмече1ю для ненасыщенного слоя. Количество поглощенного слоем бензола изменяет ие только Я , но и время элюирования. Сопоставление / / и времени элюирования проведено на рис. 56. Получены линейные зависимости и времени элюирования для всех трех красителей. Чем больше времени предоставлено для разделения, тем дальше продвигается вещество. [c.90]

Вынутые из разделительной камеры пластины, после испарения растворителя, помещают на 1 мин для окисления ингибиторов, действующих in vivo, в атмосферу паров брома (для in vitro-ингибиторов эта обработка парами брома отпадает). Пластины оставляют на 5—10 мин на воздухе для удаления избыточного брома и обрызгиванием равномерно пропитывают их раствором фер-метта. Выдерживают 30 мин в сосуде в атмосфере насыщенного водяного пара, после чего тотчас обрызгивают раствором субстрата и рассматривают в свете УФ-лампы. Через 1—2 мин ингибиторы обнаруживаются в виде темных пятен на сильно флуоресцирующем сине-зеленом фоне. По мере ослабления флуоресценции в результате окисления индоксила в индиго фон окрашивается в синий цвет, на котором выделяются белые пятна, образованные ингибитором. Этим способом можно обнаружить до 0,005 мкг ингибитора. [c.208]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология