Насыщение атмосферы камеры

Расстояние между пятном и стартовой линией зависит от природы растворителя, продолжительности элюирования, степени насыщенности атмосферы камеры парами растворителя, влажности бумаги или атмосферы камеры, типа бумаги, температуры, но главным образом от природы вещества. Это расстояние является типичной характеристикой определенного вещества для заданных условий. Для идентификации веществ в БХ используют относительную величину — / /, определяемую как отношение расстояния а (от стартовой линии до пятна) к расстоянию Ь (от стартовой линии до фронта растворителя) [c.240]

Способ измерения коэффициента Я/. Идентификация веществ этим способом состоит в том, что при определенных условиях измеряют значение для веществ, наличие которых в исследуемой смеси возможно. Соблюдая те же условия, что и при определении индивидуальных веществ (размер и форма камеры, сорт бумаги и ее предварительная обработка, состав растворителя, насыщенность атмосферы камеры, температура и продолжительность эксперимента), проводят хроматографирование смеси. После проявления хроматограммы определяют Я веществ, имеющихся в смеси, и, сопоставляя с Rf индивидуальных соединений, делают заключение о составе смеси. [c.99]

Пластинку устанавливают в камере в наклонном положении во избежание смещения носителя с пластинки, камеру герметически закрывают для обеспечения насыщения атмосферы камеры подвижным растворителем. Через 2 ч хроматограмму вынимают, опрыскивают 2%-ным раствором иодида калия, подсушивают и держат ее над парами аммиака. На хроматограмме по окраске соответствующих иодидов определяют состав раствора Hg + —красная зона, Bi +— желто-коричневая, РЬ + — желтая и Си + — коричневая (табл. 9). [c.134]

Дискуссии о "насыщении" в тонкослойной хроматографии столь же стары, как и сам метод. Однако выводы, к которым приходят при таких обсуждениях, в большинстве случаев неуместны или, что еще хуже, вводят в заблуждение. Первоначально учитывали только насыщение атмосферы камеры, но позже было замечено, что предварительное насыщение слоя сорбента растворителем или другими молекулами через газовую фазу и сам процесс насыщения тоже играют важную роль. Участие в дискуссиях и исследование литературных источников показали, что понятию "насыщенные системы" не всегда придается одни п тот же смысл. Поэтому прежде всего сформулируем определения и термины, имеющие отношение к "насыщению" и "типу камеры" (различные типы камер показаны на рис. 173). [c.89]

Фильтровальная бумага, свернутая в форме полуцилиндра и вложенная вовнутрь хроматографической камеры на всю высоту, для равномерного насыщения атмосферы камеры парами растворителя. [c.69]

Смесь н-бутилового спирта, уксусной кислоты и воды (4 1 5). После тщательного перемешивания смесь расслаивается на два слоя. Верхний слой используют в качестве подвижного растворителя, нижний—для насыщения атмосферы камеры. Эту смесь широко используют не только для разделения аминокислот, но и для разделения других веществ самой разнообразной при-роды . [c.127]

Идентификация веществ этим способом состоит в том, что при определенных условиях измеряют значение для веществ, наличие которых в исследуемой смеси возможно. Соблюдая те же условия, что и при определении индивидуальных веществ (размер и форма камеры, сорт бумаги и ее предварительная обработка, состав растворителя, насыщенность атмосферы камеры, температура и продолжительность эксперимента), проводят хроматографирование смеси. После проявления хроматограммы определяют [c.132]

Смесь н-бутилового спирта, уксусной кислоты и воды в соотношении 4 1 5 встряхивают в течение 1—2 мин. После расслаивания верхний слой используют как подвижный растворитель, нижний слой—для насыщения атмосферы камеры. [c.145]

Величины Rf не всегда остаются постоянными и меняются при изменении з словий хроматографирования (сорт бумаги, состав растворяющей системы, влажность и насыщение атмосферы камеры и др.), поэтому вместе с анализируемой пробой необходимо наносить на стартовую линию пробу по меньшей мере одного стандартного вещества. Тогда можно сопоставлять величины Rf с этим стандартом, достигая таким образом значительно большего постоянства этих величин. Лучше всего, однако, не ограничиваться определением величин Rf разделяемых веществ, а сохранять копии хроматограмм, из которых можно извлечь и другую важную для анализа информацию, а именно данные об интенсивности, форме и размерах пятен, об их положении относительно пятен стандартных веществ и т. п. [c.97]

Подготовка растворителей заключается в приготовлении смеси с взаимной насыщенностью подвижной и неподвижной фазы. Обычно для этого смесь, взятую в определенном соотношении, встряхивают в делительной воронке. После отстаивания органическую фазу наливают в лодочку (при нисходящей хроматографии) или в чашку (при восходящей). Водную фазу помещают в хроматографический сосуд, чтобы обеспечить насыщение атмосферы камеры парами обеих фаз. [c.320]

Одним из непременных условий для получения устойчивых значений Rf является насыщение атмосферы камеры парами подвижного растворителя [217]. Существующие конструкции разделительных камер обеспечивают это насыщение. В случае недостаточного насыщения камеры в результате неравномерного испарения растворителя с различных участков поверхности слоя наблюдается так называемый краевой эффект, при котором одни и те же вещества у краев пластинки имеют большие значения Rf, чем в центре. Для устранения краевых эффектов необходимо равномерное насыщение камеры парами растворителя перед хроматографическим процессом, которое может быть достигнуто помещением в камеру (прижимают к стенке) смоченного этим растворителем листа фильтровальной бумаги. Перед опытом камеру выдерживают 30 мин. Перед тем как вставить пластинку, фильтровальную бумагу еще раз смачивают растворителем, наполняя камеру. При работе с насыщенной камерой время анализа значительно сокращается. [c.22]

Восходящее элюирование проводят несколькими способами. Можно налить на дно камеры для разделения слой растворителя толщиной 5—10 мм. Если необходимо хроматографировать в атмосфере, насыщенной растворителем, стенки камеры выстилают фильтровальной бумагой, края которой погружают в растворитель. Это способствует насыщению атмосферы камеры. Затем вводят в камеру пластинку с нанесенной на нее пробой и погружают нижний край пластинки в растворитель. [c.129]

Условия насыщения атмосферы камеры парами растворителя. [c.310]

Основным элементом этого прибора являются два бусинковых термистора, находящиеся в камере, атмосфера которой насыщена парами применяемого растворителя. На дне камеры находится чашка с растворителем и фитиль из пористого материала, обеспечивающие насыщение атмосферы камеры парами растворителя. Оба термистора включены в схему моста Уитстона. В начале опыта мост сбалансирован, причем каждый термистор смочеи каплей растворителя. Затем одии из термисторов смачивают раствором определяемого вещества в том же [c.91]

Для приготовления бутилового спирта, насыщенного 1,5 и. ЫН40Н, в делительной воронке встряхивают 100 мл н-бутилового спирта и 100 мл 1,5 и, МН40Н (Ю мл 25%-ного МН40Н и 90 мл воды) и разделяют слои. Нижний водный слой используют для насыщения атмосферы камеры, верхний слой — для хроматограф И-рования. [c.66]

Для методов 1—3 в качестве конструкционного материала камер предпочитают стекло или иногда сталь марки У2А или, лучше, марки У4А. Камеры из пластмасс могут быть использованы лишь в некоторых случаях (метод 4) из-за неустойчивости по отношению к органическим растворителям. При применяемых в настоящее вревдя разделительных камерах особое внимание следует уделить насыщенйю атмосферы камеры [60]. Существующие здесь зависимости можно наблюдать, проведя следующие 4 опыта. [c.23]

Шталь, Болигер и Ленерт [53] нашли, что, используя только один адсорбент и один растворитель, нельзя разделить встречающиеся смеси каротиноидов. Применяя слои гидроокиси кальция, фосфата магния и силикагеля Г и соответствующие растворители, удалось разделить группы каротиноидов на отдельные соединения (почти тридцать различных производных, см. таблицу 27). Для проверки этой схемы анализа одновременно хроматографировались неизвестные растительные экстракты, содержащие каротин, которые можно было непосредственно или косвенно проанализировать количественно. Нанесение осуществляли в виде полос на слои толщиной 0,5 мм (длина разделительного слоя 10—12 см, время анализа около 15 мин). По-видимому, целесообразно по приведенной схеме провести классификацию еще большего числа каротиноидов и другие группы расположить в таком же порядке. Во всех опытах при применении С-камер были достигнуты лучшие результаты по сравнению с до сих пор применяемыми стеклянными лотками. Эта система разделительной камеры делает излишним насыщение атмосферы камеры и позволяет на пластинке шириной 40 см параллельно анализировать более 30 смесей, чтобы сравнить их. [c.217]

Приготовление растеврителей. Растворители, употребляющиеся для хроматографии, должны удовлетворять следующим требованиям 1) быть химически чистыми, 2) бесцветными или очень слабо окрашенны.ми, 3) водонасыщенными. Для насыщения водой растворитель смеишвается с ней в делительной воронке в равных объемных или весовых частях и сильно встряхиваегся. Через несколько часов, когда оба слоя будут взаимно насыщены, слой водонасыщенного растворителя сливается через сухо фильтр в сухую посуду. Фенол засыпается в делительную воронку в кристаллическом состоянии, заливается равным количеством воды и встряхивается. Через (3—8 час. происходит расслаивание. Вода, насыщенная растворителем, может быть использована для насыщения атмосферы камеры. [c.392]

Ввиду того что на таких длинных листах процесс разделения продолжается иногда много часов (в зависимости от растворителя и марки бумаги) и поэтому метод БХ не может конкурировать со скоростной ТСХ (в тех случаях, когда оба метода можно было бы использовать с одинаковым успехом), Буш и Кроушоу [19] предложили методику скоростной БХ. Эта методика предусматривает применение более узких камер (рис. 3.7), горизонтального хроматографирования (возможного благодаря наличию специальной металлической рамки), тщательного насыщения атмосферы камеры парами растворяющей системы (применяются липофильные, маловязкие, летучие и быстро впитываемые растворители), а главное — предварительной пропитки бумаги водной неподвижной фазой. Поскольку разделение этим методом ведется на более коротких полосках бумаги, то требуется меньшее количество хроматографируемого вещества, которое наносят на меньшую площадь у стартовой линии (т. е. в виде пятен меньшего размера). Методика работы описана ниже в разд. 3.2.3. [c.64]

Выбор системы растворителей для разделения стероидов зависит от полярности соединения, т. е. от числа кислородсодержащих функциональных групп, присоединенных к скелету стероида или терпеноида. Чаще всего применяются системы типа предложенных Бушем и Заффарони. В системах Буша неполярные и летучие растворители, например гексан, гептан, петролейный эфир, толуол, тетрахлорметан, сочетаются с водно-спиртовыми неподвижными фазами. Компоненты систем смешивают, встряхивают, дают смеси расслоиться на фазы, после чего используют нижнюю фазу для насыщения атмосферы камеры и приведения бумаги в равновесие с нею, а верхней фазой проводят элюирование. Буш пользовался следующими системами (перечисляются в порядке возрастания полярности) 1) петролейный эфир — метанол — вода (10 8 2) 2) толуол — петролейный эфир — метанол — вода (5 5 7 3) 3) толуол — петролейный эфир — метанол — вода (667 333 600 400) 4) петролейный эфир — бензол — метанол — вода (667 333 800 200) 5) толуол— метанол — вода (10 5 5) 5) бензол — метанол — вода (10 5 5) 7) толуол — этилацетат — метанол — вода (9 1 5 5). Если элюирование ведется перечисленными растворителями, важно привести бумагу в равновесие с неподвижной фазой, т. е. со смесью метанола и воды. Для этого хроматограмму перед элюированием выдерживают над парами неподвижной фазы до следующего дня. Далее, очень важно, чтобы атмосфера камеры была насыщена всеми компонентами системы. Очень полезно также небольшое повышение температуры (до 37 °С). В разд. 3.1.2 и в статье [19] описывается способ ускорения до- [c.118]

В ненасыщенной атмосфере, выше полученных в насыщенной атмосфере [1, 41]. Хонеггер [7] исследовал влияние насыщения атмосферы камеры, температуры разделения и активности адсорбента (силикагель О) на величины / / для слоев с постепенно увеличивающейся толщиной и обнаружил, что наибольшее влияние на разделение оказывает активность адсорбента. [c.308]

Методика определения. На листе бумаги, соответствующем размеру камеры, на расстоянии 12 см от края (в случае применения больших камер) или 5 см (в случае применения малых) отмечают карандашом черту для нанесения капель раствора. Исследуемую смесь и растворы свидетелей в количестве 0,01 мл наносят вдоль черты на расстоянии 2—3 см друг от друга. Капли наносят в два приема микропипеткой по 0,005 мл в одно и то же место после высушивания предыдущей капли. Конец подсушенной бумаги, на который нанесены капли растворов, опускают в кювету с подвижным растворителем так, чтобы пятна исследуемых растворов не были погружены в растворитель. Хроматографируют нисходящим методом. В качестве подвижного растворителя применяют верхний слой смеси бутанола, уксусной кислоты и воды. Нижний слой используют для насыщения атмосферы камеры, помещая его на дно. Когда фронт растворителя пройдет /з длины бумаги, хроматограмму вынимают, высушивают и вновь пропускают через нее подвижный растворитель. Так хроматограмму обрабатывают трижды. При раз- [c.330]

Для всей этой группы нельзя рекомендовать какую-либо определенную систему растворителей, поскольку иа /кдый фермент требует до некоторой степени различных условий хроматографирования. Чаще всего грименяют 30—60%-ный раствор этанола или ацетона, 0,33 Мраствор хлО ристого натрия или буферные растиортл с pH 5,5—7,0. При проявлении спиртовыми системами необходимо, однако, помнить о большом влиянии насыщения атмосферы камеры на подвижность ферментов (рис. 195). [c.503]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология