Рекомбинация фагов

Механизм рекомбинации фага заключается в разрыве биспиральных молекул ДНК и последующем соединении фрагментов. [c.374]

Генетические способы отбора требуют значительно меньших затрат труда, чем методы скрининга, что позволило разработать новые подходы, позволяющие проводить генетическую селекцию клонов, содержащих последовательности, гомологичные любой желаемой последовательности-зонду. Это дало возможность расширить применение этого метода, распространив его на задачи, обычно решаемые с помощью более трудоемких (и часто менее специфичных) методов скрининга. В общих чертах в основе всех этих подходов лежит следующее обстоятельство хотя в случае большинства специфических эукариотических последовательностей нельзя обеспечить генетическую селекцию в клетках Е. соИ, можно сконструировать пары векторов, позволяющие селектировать продукты гомологичной рекомбинации, обусловленной гомологией последовательностей между клонами. Такая селекция основана на том факте, что процессы, подобные репликации ДНК, транскрипции, мобилизации плазмид или упаковке ДНК в фаговые частицы, могут происходить только по is-схеме в отношении соответствующего регуляторного элемента (области начала репликации, промотора, сигнала мобилизации или упаковки). Чтобы исключить рекомбинацию между векторными последовательностями, нужно подбирать векторные пары, не обладающие взаимной гомологией (или в случае рекомбинации фагов без взаимной гомологии в пределах той области, которая определяется маркерами, используемыми для селекции). Соблюдение этого главного принципа лежит в основе и скрининга фаговых клонов с использованием рекомбинации между [c.77]

При рекомбинации фагов S13 и X роль промежуточных соединений выполняют кольцевые димеры [229]. Такие, вдвое более длинные кольца, так же как и катенированные (сцепленные друг с другом) кольца, обычной длины, могут образовываться при рекомбинации, протекающей в соответствии с рассмотренными в предыдущих разделах механизмами, включающими раз,рывы цепей. [c.286]

Висконти И Дельбрюк создали статистическую теорию процесса рекомбинации фагов. Физические предпосылки теории заключались в следующем 1) резервуар молекул ДНК фага внутри инфицированной клетки перемешивается возможны любые попарные акты рекомбинации между молекулами ДНК в резервуаре 2) за время созревания происходит в среднем некоторое число актов рекомбинации на каждую молекулу ДНК акты рекомбинации заключаются в разрыве и воссоединении молекул ДНК попарно (подобно явлению кроссннговера). Впрочем, такое частное предположение необязательно для теории Дельбрюка и Висконти. Она останется справедливой и при других механизмах разрыва и воссоединения, а также при выборочном копировании. Что существенно, — это равная вероятность разрыва, или переброски, при копировании в любой точке хромосомы. [c.369]

ОДНОЙ большой молекулы с молекулярным весом 1,5 10 , и потому остается признать, что в процессе рекомбинации фагов происходит фрагментация ДНК. Дельбрюк полагал, что фрагментация происходит так же, как в клетках высших организмов, т. е. с помощью кроссннговера. У высших организмов этот процесс наблюдается пе на молекулярном уровне, а на уровне хромосом, видимых в микроскоп. Обе нити накручиваются друг на друга в некоторой точке (синацсис). В точке скручивания происходит разрыв и одновременное соединение кусков АВ и А В. Соединение кусков происходит в один акт, поэтому получаются в равных количествах два типа рекомбинантов — это так называемая корреляция реципрокных рекомбинантов. [c.370]

Рекомбинация фагов с мутациями + и — может привести к фенотипически диким фагам. Но рекомбинация двух -1-мутантов и двух —мутантов друг с другом никогда не возвращает фаг к дикому типу. Это вполне понятно из схемы кодовых мутаций (см. табл. 22). Каждая подобная мутация, хотя и точечная, лишает активности целый участок хромосомы, и рекомбинация двух подобных мутаций не приводит к дикому типу. Но если они разного знака, то восстановление первоначального прочтения кодовых триплетов может нроызойтп всюду, кроме интервала между обеими мутациями. [c.414]

Хотя теория Висконти — Дельбрюка хорошо объясняет суммарные частоты рекомбинантов в скрещивании фагов, она не вскрывает детального механизма процесса, непосредственно приводящего к перекресту во время элементарного акта скрещивания. Именно этот процесс, а не популяционно-генетический аспект рекомбинации фагов и представляет [c.293]

На основании родства сайта res с кором att-сайта фага лямбда (гл. 35) можно предположить наличие сходства между этой системой и сайтспецифической рекомбинацией фага лямбда. Между двумя сайтами существует гомология в 10 из 15 пар оснований, непосредственно окружающих точку перекреста. Ниже представлены эти последовательности [c.468]

Рис. 4.4. Способ восстановления исходной структуры гена в трансдуцирующих фагах, полученных методом Шимады а — генетическая карта профага Л, находящегося в гене С триптофанового оперона бив — карты трансдуцирующих фагов Хр1грАВС и Лр/гр СОЕ, г — карта трансдуцирующего фага Хр//рАВСОЕ, полученного в результате рекомбинации фагов Хр1грАВС и ЛрГ/р СВЕ по гибридным сайтам аП
Геном фага Я можно разделить на три основные части (рис. 2.15). Левая часть включает все гены (отЛ м1 до J), белковые продукты которых необходимы для формирования капсидов и упаковки в них молекул фаговой ДНК. Центральная часть, расположенная между генами J nN, несущественна для литического развития фага в клетке-хозяине дикого типа. Эта область генома содержит гены, участвующие в общей рекомбинации фага (reda и red ), сайтспецифиче-ской интеграции ДНК фага в бактериальную хромосому (int) и исключении профага из хромосомы (xis). Сайтспецифические рекомбинационные события происходят по особым участкам на ДНК фага (att) и бактериальной хромосомы. Правая часть генома фага Я содержит все остальные контролирующие элементы, к которым, в частности, относятся гены, необходимые для репликации фаговой ДНК (О и Р) и для лизиса клеток (S и R). [c.97]

Смотреть страницы где упоминается термин Рекомбинация фагов: [c.369] [c.468] [c.156] [c.95] [c.63] [c.379]

Основы биологической химии (1970) -- [ c.484 ]

ПОИСК

Смотрите так же термины и статьи:

Рекомбинация

Справочник химика 21

Химия и химическая технология