Сыворотка теленка

Рис. 12.4. Обращение дезоксицитидином ингибирующего действия тимидина. Клетки СНО высевали в чашки Петри диаметром 5 см (0,13-10 клеток в 5 мл МСИ, содержащей двойную концентрацию витаминов, 10% сыворотки теленка и пролин в концентрации 57,5 мг/л). Через 4 суток клетки собирали и просчитывали их количество в счетчике Коултера. ф-ф контроль О-О

Возможные трудности. Метод культивирования фибробластов сопряжен с рядом трудностей. Эти клетки плохо растут или вовсе не растут на химически определенных средах. Приходится добавлять сыворотку, содержащую полный набор необходимых питательных веществ. Как правило, для этого используют эмбриональную сыворотку теленка. К сожалению, очень трудно раз и навсегда стандартизировать условия культивирования необходимо постоянно контролировать и уточнять такие параметры, как pH, содержание глюкозы и др. [c.14]

Инъецировать 2,5 мл ростовой среды (МСИ с 10% сыворотки теленка и 10 ед/мл гепарина) с некоторым количеством воздуха в брюшную полость. Не прокалывать кишки. Брюшко мыши вздувается, затягивая место инъекции. [c.68]

Трипсинизировать (разд. 5.2) клетки хомячка и ресуспендировать их в среде Игла с 10% сыворотки теленка. Промыть дважды центрифугированием и ресуспендировать в свежей МСИ без сыворотки (приложение 1) до концентрации 2-10 клеток в 1 мл. [c.192]

Прилить в пробирку МСИ с 10% сыворотки теленка до об- [c.192]

Тест на ростовые трубки С. albi ans. Материал из колонии грибов деревянной палочкой-аппликатором переносят в 0,5 мл стерильной сыворотки теленка (сыворотку можно хранить до 6 мес в замороженном состоянии). После приготовления суспензии клеток в сыворотке пробирки помещают в термостат при 37 1 °С на 2,5 —3,0 ч. Затем из смеси готовят препарат раздавленной капли и микроскопируют с объективом 40х. В качестве положительного [c.321]

Название фетуин было предложено Педерсеном [1] для а-глобулина, обнаруженного в сыворотке эмбриона теленка. Содержание этого белка составляет около 45% общего количества белка сыворотки. Ранее [2, 3] в опытах по фракционированию белков бычьей сыворотки осаждением различными солями было показано, что по составу сыворотка новорожденного теленка сильно отличается от сыворотки взрослого быка. С помощью электрофореза было обнаружено, что сыворотка новорожденного теленка содержит значительное количество а-глобулина (37%) и альбумина (57%), небольшое количество 3-глобулина и совсем не содержит 7-глобулина [4]. После окончания подсосного периода в сыворотке теленка наблюдается быстрое возрастание количества 7-глобулина. На 36-й час после рождения содержание 7-глобулина достигает 42% и сопровождается компенсаторным снижением содержания других белков. (Более подробно см. Кеквик [5].) [c.58]

Этот исходный раствор проверяется на зараженность бактериями и хранится в замороженном виде при —20 С в емкостях по 20 и 80 мл. Для проверки зараженности используется жидкая среда Саборада (при 31 С в течение 1 недели приложение 4) или бульон с экЬтрактом мозга и сердца (при 37 °С в течение 1 недели приложение 4). Одна из контрольных культур в каждой серии должна дополнительно содержать сыворотку теленка. [c.53]

Добавить каплю полной ростовой среды (например, минимальной среды Дюльбеко) с 10 7о эмбриональной сыворотки теленка и разрезать блок на 5—10 кусочков. [c.65]

Дать осесть большим комкам и слить мутную надосадочную фракцию в центрифужный ст-акан с 20 мл сыворотки теленка. К ткани добавить свежий раствор трипсина. [c.71]

Ресуспендировать клетки в 20 мл теплой культуральной среды (например, в среде 199 с 2% триптозофосфата и 2% сыворотки теленка). Дать осесть крупным комкам и перенести суспензию клеток в универсальный контейнер. [c.71]

Зта среда в различных своих формах (БСИ, МСИ см. приложение 1 табл. 12), как правило, пригодна для культивирова-иия большинства клеточных линий. Для этого в среду следует добавлять 10% сыворотки теленка или сыворотки эмбрионов крупного рогатого скота, а в некоторых случаях триптозофосфат. [c.78]

Ростовая среда, т. е. среда, пригодная для продолжительного культивирования установленных клеточных линий, готовится путем разведения 10-кратного концентрата. Если 10-кратный концентрат (сток) уже содержит соли (продажные препараты или полученные при разведении сухой среды —см. ниже), его следует развести водой. Если же концентрат изготовлен по прописям, приведенным в табл. 13 и 14 приложения 1, то его следует разводить СБСР, как указано в табл. 15. В этой таблице приведены методы получения различных минимальных сред, дополненных сывороткой теленка или эмбриона крупного рогатого скота и в одном случае заменимыми аминокислотами. Основой для всех этих сред является МСИ, и различные модификации направлены на улучшение роста указанных в таблице определенных линий или штаммов клеток. [c.79]

Добавить 20 мл сыворотки теленка или эмбриона крупного рогатого скота и 20 мл триптозо-фосфатного бульона (приложение 1) к 80 мл среды с удвоенной концентрацией питательных веществ (например, к среде МСИ Глазго приложение I) и прогреть смесь до 44 С. [c.92]

Установить культуру мышпмых клеток L929 в среде Игла (модификация Глазго) с 10% сыворотки теленка и менять среду каждые два дня (рис, 5.2). [c.152]

Рис. 11.2. Синтез ДНК в клетках, пересеянных из культуры в стационарной фазе. Мышиные клетки Ь929 пересевали в чашки диаметром 5 см (4-10 клеток п 5 мл МСИ, содержаш,ей 10% сыворотки теленка). В указанное время клетки инкубировали в течение 1 ч с Н-тимидином и определяли его включение в ДНК.

Установить культуру мышиных клеток L929 в бутылях Ру в среде Игла (модификация Глазго) с 10% сыворотки теленка. [c.161]

Посеять по 3 105 клеток HeLa в чашки диаметром 5 см в среде Игла (модификация Глазго) с 10% сыворотки теленка и 3 мМ тимидином. [c.161]

Рис. 12.3. Подавление роста клеток тимидином. Около 10 клеток в 5 мл МСИ, в которую добавлены витамины и сыворотка теленка, высевали в чашки диаметром 5 си и инкубировали в присутствии указанных концентраций тимидина. Через 4 суток монослой клеток трипсинизировали и подсчитывали число клеток в счетчике. L929 О HeLa ВНК А BS 1

Чашки диаметром 5 см, содержащие по 6-105 клеток L929 в 5 мл МСИ с 10% сыворотки теленка и забуференной Нерез, инкубировать в течение ночи. [c.168]

Установить культуру клеток хомячка СНО в стеклянных сцинтилляционных флаконах (2-10 клеток в I мл МСИ, содержащей 10% сыворотки теленка, гипоксантин (30 мкМ) и глицин (100 мкМ) и забуференной буфером Hepes). [c.169]

В 12 вращающихся бутылей Винчестер посеять по 2-10 клеток ВНКС13 в МСИТС (минимальная среда Игла с 10% триптозофосфатного бульона и 10% сыворотки теленка) и выращивать при 37 °С в течение 3 дней. [c.199]

Инкубировать при 37 °С в течение 1 ч для адсорбции вируса клетками. Добавить 50 мл среды Игла с 5% триптозофосфата и 5% сыворотки теленка и инкубировать при 37"С [c.199]

Слить надосадочную фракцию и центрифугировать ее при 20000g (ЮООООд в случае вируса энцефаломиокардита) в течение 90 мин. Полученную надосадочную фракцию слить в раствор хлороса, а осадок суспендировать в МСИ с 10% триптозофосфата и 5% сыворотки теленка (приложение 1) (2 мл на бутыль). Аликвоты суспензии разлить по маленьким бутылям и хранить при —70 °С (ВИРУС, АССОЦИИРОВАННЫЙ С НАДОСАДОЧНОЙ ФРАКЦИЕЙ). [c.200]

Через 1 ч добавить по 5 мл среды Игла с 10% триптозофосфатного бульона и 10% сыворотки теленка (для вируса псевдобешенства) или 5% сыворотки человека (для вируса герпеса) и вернуть чашки в термостат. [c.206]

Сыворотка теленка для вируса 5 мл энцефаломиокардита или сыворотка эмбриона крупного рогатого скота для вируса SV40 [c.207]

МСИЮ минимальная среда Игла с 10% сыворотки теленка [c.242]

СБСР сывороткой теленка (10%). сбалансированный буферный солевой раствор [c.242]

B. 3%-ный БСА — Ю Уо-ный раствор инактивированной нагреванием сыворотки теленка в 0,14 М Na l, забуференном 10 мМ Na-фосфатом pH 7,2. [c.312]

Полная среда Дульбекко в модификации Игла (ДМЕМ-среда) 450 мл ДМЕМ 5 мл пирувата натрия (100 мМ) 5 мл пенициллина и стрептомицина (10 000 ед. в 1 мл) 5 мл -глутамина (200 мМ) 0,25 мл 2-меркаптоэтаиола (0,1 М) 50 мл фетальной сыворотки теленка. [c.167]

Смотреть страницы где упоминается термин Сыворотка теленка: [c.217] [c.218] [c.276] [c.276] [c.220] [c.58] [c.76] [c.81] [c.154] [c.154] [c.171] [c.171] [c.187] [c.205] [c.212] [c.221] [c.228] [c.228] [c.229] [c.229] [c.229]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология