Вирус электронная очистка

Один метод локализации со специфической физиологической активностью был позаимствован нз ПЭМ. Этот метод меток поверхности клетки, который, будучи применен к образцам для РЭМ, приводит к образованию на поверхности клетки морфологически различаемых или аналитически идентифицируемых структур. Такие методики в сочетании с растровой электронной микроскопией высокого разрешения позволяют изучать природу, распределение и динамические свойства антигенных и рецепторных состояний на поверхности клеткн. Методы нанесения меток на поверхность клетки в общем случае достаточно сложны и включают процедуры иммунохимической и биохимической очистки. Подробные ссылки на них можно найти в работах [359—361], но сущность методик состоит в следующем. Для крепления антител в определенных антигенных состояниях на поверхности клетки используются стандартные иммунологические процедуры. Хитрость состоит в том, чтобы модифицировать антитела таким образом, чтобы они также несли морфологически различимую метку, такую, как латексные шарики или сферы из двуокиси кремния, распознаваемый вирус, как, например, вирус табачной мозаики, или один из Т-четных фагов, как показано на рис. 11.18, илн белковая молекула известных размеров, как ферритин или гемоцианин. В работе [362] (рис. 11.19) использовались гранулы золота, которые имеют большой коэффициент вторичной электронной эмиссии. Одна часть антитела имеет средство для специфичного антигенного закрепления на поверхности клетки, в то время как другая часть несет морфологически различимые структуры. В настоящее время иммунологические методы достигли такого уровня, когда они не могут быть использованы для изучения как качественных, так и количественных характеристик поверхности клетки [363, 364]. [c.244]

Необходимая степень очистки вируса определяется тем, какие биофизические или биохимические методы будут применены для его исследования в дальнейшем. Очевидно, что препараты, используемые для анализа вирусных нуклеиновых кислот или капсидных белков, должны быть очищены от клеточных примесей более тщательно, чем препараты, предназначенные для электронной микроскопии или седиментационного анализа. [c.19]

При помощи электронной микроскопии можно уловить содержание примесей менее 1 % [849]. Но в некоторых случаях загрязнения, имеющие форму и размер, близкие к вирусным частицам, можно принять за вирус. Доказательство отсутствия контаминирующих частиц в препарате также в некоторой степени будет зависеть от чувствительности метода препарирования. Поэтому необходимо просмотреть достаточно большую серию препаратов, приготовленных различными методами, чтобы получить достоверные данные. Следует отметить важное преимущество данного метода, Он позволяет непосредственно наблюдать за возможными морфологическими изменениями вирусных частиц на различных этапах очистки. [c.154]

Особенно широко электронная микроскопия применяется в вирусологии. Именно с помощью электронного микроскопа стало возможным визуальное наблюдение большинства возбудителей различных болезней. Используя различные методические приемы электронной микроскопии, можно определить тип симметрии и размер вирусных частиц, морфологию и анатомию, а также строение внутрен-него компонента частицы, природу нуклеиновой кислоты. Электронно-микроскопические исследования необходимы нри изучении вопроса взаимодействия вируса с клеткой, который включает в себя механизмы адсорбции и проникновения вирусных частиц в клетку, кинетику формирования и внутриклеточного размножения вирусов. Кроме того, электронная микроскопия является одним из основных контролей при физико-химических исследованиях вирусов и особенно при их концентрировании и очистке для определения чистоты и гомогенности вирусных препаратов, а также для подсчета вирусных частиц. [c.212]

Электронно-микроскопическое исследование концентрированных препаратов вирусов показало, что подобная процедура не приводит к нарушению структуры вирус-ных частиц Дальнейшая очистка концентрированных препаратов может быть достигнута с помощью ультрацент-рифугироваиия, гельфильтрации, ионообменной хроматографии или экстракцией органическими растворителями, [c.96]

С1 рого специфично для впрусов. Однако ё ряде случаей биологическая инертность препарата еще не является доказательством отсутствия в нем вирусных инфекционных частиц, так как в эксперименте не всегда удается создать условия, необходимые для заражения клетки хозяина. В подобных случаях идентификацию вируса осуществляют при помощи электронной микроскопии. При очистке вирусов очень важно точно определить корреляцию между ин-фекционностью и содержанием физических частиц. [c.149]