Михаэлиса константа и нижние пределы констант

Наиболее полную информацию о кинетике ферментативных реакций дает изучение их протекания в нестационарном режиме (см. гл. V). Исследование стационарной кинетики ферментативных процессов имеет ограниченное значение для понимания многостадийного механизма действия ферментов. Это связано прежде всего с тем,что в общем случае невозможно однозначно приписать экспериментально определяемые значения констант скоростей индивидуальным химическим стадиям (см. 1 гл. V и VI). Тем не менее кинетические параметры типа = = У/(Е](,и Кт.каж, которые, следуют из основного уравнения стационарной кинетики — из уравнения Михаэлиса (6.8), как показал Альберти с сотр. [1], позволяют оценить нижний предел константы скорости любой индивидуальной стадии ферментативной реакции [типа (6.9) или даже более сложного обратимого процесса (5.16)]. [c.268]

В случае механизмов, включающих образование нескольких промежуточных форм фермента, лля нахождения нижних пределов величин элементарных констант скорости могут быть использованы константы Михаэлиса и максимальные скорости. Рассмотрим механизм с участием п промежуточных форм фермента [c.52]

Когда имеется только один фермент-субстратный комплекс и все стадии связывания достаточно быстрые, параметр at в уравнении Михаэлиса — Ментен представляет собой просто константу скорости первого порядка для химического превращения комплекса ES в комплексе ЕР. В более сложных ситуациях at является функцией всех констант скорости первого порядка и не может быть отнесена ни к какому конкретному процессу, за исключением крайних случаев. Например, для механизма Бриггса — Холдейна, когда комплекс ЕР диссоциирует достаточно быстро, at = 2 [уравнение (3.10)]. Однако если диссоциация комплекса ЕР протекает медленно, то константа скорости этого процесса вносит вклад в параметр at и в предельном случае, когда скорость диссоциации ЕР значительно меньше скоростей химических стадий, параметр at будет равен константе скорости диссоциации. Из рассмотрения схемы (3.19) видно, что в этом случае at является функцией констант 2 и 3. Однако если одна из этих констант много меньше другой, at становится равной меньшей константе. Например, если 3 <. 2, то, согласно (3.22), at = 3. Из этого следует, что at не может превышать ни одной из констант скорости первого порядка для реакционного пути в прямом направлении и представляет собой, таким образом, нижний предел для констант скорости химических реакций. [c.115]

Следовательно, верхняя граница определяемых концентраций субстрата ограничена константой Михаэлиса (). Нижняя граница определяемых концентраций субстрата определяется величиной Уд, которая может быть зафиксирована с помощью используемого для наблюдения инструментального метода. Причем величина Уц тем выше для одного и того же значения [8]д, чем выше к и [Е]. Таким образом, использование высокоактивного фермента (большое значение ) и повышение его концентрации в реакционной смеси может существенно снизить предел обнаружения субстрата. [c.112]

Фермент катализирует р-ции, в к-рых участвуют, как правило, один или два субстрата. В односубстратной р-ции концентрация субстрата [З],, пропорциональна скорости процесса Уц только при условии [8]оСЛГ1 . где К -константа Михаэлиса. Следовательно, верхняя фаница определяемых содержаний лимитируется, как правило, величиной Предел обнаружения и ниж. фаница анализируемых содержаний субстрата определяются обычно той величиной Vo, к-рая м. б. зафиксирована выбранным инструментальным методом. Чем меньще величина Уц и чем выще каталитич. константа скорости и концентрация [Е]о фермента, тем ниже предел обнаружения и нижняя фаница определяемых содержаний субстрата. Для двусубстратных р-ций при определении субстрата 8, субстрат 82 берется в насыщенных концентрациях и двусубстратная р-ция сводится к односубстратной. [c.78]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология