Субстрат, определение кинетическим методом

В связи с тем, что прямые методы измерения площади контакта (по диаметру площадки деформации на стальном шаре при статическом вдавливании в плиту с заданными механическими свойствами или по ширине следа износа на плите) в данном случае неприменимы [141, были использованы теоретические уравнения деформации [19, 20]. Для косвенных расчетов изменения площади контакта с нагрузкой пользовались известными механическими свойствами субстратов (см. табл. 1) в сочетании с зависимостью коэффициента кинетического трения от нагрузки [уравнение (13)]. Последнее соотношение служило для определения вида деформации субстрата (упругая, упруго-пластическая и полностью пластическая), знание которого позволяет проводить соответствующие цифровые расчеты или графические построения для определения площади контакта. [c.267]

Можно определять активность АХЭ или ХЭ. Для определения активности АХЭ в большинстве случаев подвергают гемолизу эритроциты ХЭ определяют в сыворотке крови. При использовании цельной крови можно путем выбора специфического субстрата (ацетил-р-метилхолина для АХЭ и бутирилхолина для ХЭ) или применяя определенные концентрации субстрата достигнуть дифференцирования ферментов. Последний из указанных способов основан на уже описанном ингибировании АХЭ более высокими концентрациями субстрата. Так, при концентрации ацетилхолина 10 М определяется преимущественно АХЭ, при концентрации же 10 М — ХЭ, однако в каждом случае в определенной степени (примерно на /б) проявляет активность и другой фермент. Определение активности осуществляют либо по установлению скорости ферментативного расщепления субстрата (кинетический метод) или путем определения конечных продуктов" и не вступившего в реакцию субстрата. [c.165]

Применение иммобилизованных ферментов, позволяющих проводить массовые химические анализы в отдельных пробах или в потоке (с многократным использованием одного и того же препарата фермента), в значительной степени снимает проблему высокой стоимости ферментных методов анализа и зачастую повышает точность аналитического метода. Существуют два общих подхода к аналитическому определению концентрации реагентов (субстратов) в исследуемой системе. В одном из них ферментативную реакцию доводят до полного израсходования определяемого вещества (или до установления в системе равновесия между исходными реагентами и продуктами реакции), регистрируя при этом изменение какого-либо подходящего физического или химического свойства системы, и по количеству образовавшегося продукта рассчитывают количество субстрата в исходном образце. Во втором подходе используют кинетические методы анализа для определения скорости появления продукта или исчезновения субстрата в ферментативной реакции и вычисление исходной концентрации субстрата по соответствующей калибровочной кривой. Этот метод применим также для определения концентрации эффекторов (ингибиторов или активаторов), присутствующих в реакционной системе. Оба данных подхода были реализованы на практике с применением иммобилизованных ферментов. [c.16]

Применение хроноамперометрии для определения кинетических параметров и других особенностей механизма ограничено природой химической реакции, связанной с электродным процессом. Из уравнения Коттрелла (см уравнение 3 25) видно, что единственный параметр, на который могут влиять последующие реакции, это число электронов п, тогда как предшествующие химические реакции мог т влиять как на число электронов, так и на эффективную концентрацию электрохимически активного субстрата на поверхности электрода. Таким обра.зом, реакции, протекающие по механизмам ЕС и С(дим), нельзя ггсследовать этим методом. Однако было показано, что если значение потенциала таково, что диффузионный контроль переноса электрона невозможен, то константу скорости процесса ЕС можно измерить [76]. Были рассчитаны рабочие кривые для кажущегося числа обмениваемых электронов КЕж[равного(да)дейст/(/ )днф] Б зависимости от безразмерного параметра kt), где k — константа скорости химической стадии (рнс З.б). Если в химической стадия образуется продукт, который может вступать в электрохимическую реакцию при наложенном потенциале (реакция ЕСЕ), каж будет зависеть от Н даже при диффузионном контроле переноса электрона [77] Легко понять, что Лкаж будет стремиться к единице, когда k Стремится к нулю, тогда как прн очень больших значениях k [c.111]

Кинетические методы можно испольэовать для определения субстрата в ферментативной реакции. [c.351]

Кинетические параметры У т — максимальная скорость и Кт(кят)— кажущаяся константа Михаэлиса ферментативной реакции— функции констант скоростей индивидуальных стадий (см. соотношения 5.10, 7.2, 7.3). Для раздельного определения этих параметров в общем случае нельзя использовать интегральные методы обычной неферментативной кинетики вследствие смешанного порядка ферментативных процессов. Например, метод Гуггенгейма (см. гл. 2) пригоден для обработки кинетики ферментативных реакций только в случае. т(каж)> [8]о или [Е]о>[8]о, т. е. только при наличии кинетики первого порядка по субстрату или продукту. [c.166]

Выше несколько раз отмечалось, что кинетическая информация может быть обесценена, если неизвестно, какой субстрат присоединяется к ферменту первым. Чтобы выяснить это, можно использовать два способа изучение ингибирования продуктом реакции и изучение кинетики реакции со смесью субстратов. Суть первого метода иллюстрирует схемы, приведенные на фиг. 17 и 18 они показывают, что как в случае механизма с замещением фермента, так и в случае упорядоченного механизма с образованием тройного комплекса только первый субстрат и последний продукт реакции конкурируют друг с другом. Далее, только в случае механизма с замещением фермента, когда субстраты реагируют с ферментом в районе одного активного центра, первый продукт должен конкурировать с каким-либо субстратом, в данном случае (фиг. 17) со вторым субстратом. По этим соображениям определение начальной скорости процесса в присутствии каждого из продуктов реакций должно быть весьма полезным Ч При планировании таких экспериментов и их интерпретации должны быть получены ответы на следующие три вопроса [c.142]

Далее, поскольку глубокий механизм каталитических реакций — как гетерогенных, так и гомогенных — является электронным, то к их описанию можно приложить весь сегодняшний арсенал квантовой химии. Сюда относятся расчеты электронной структуры молекул, их реакционной способности, потенциальных поверхностей реакции и т. д. Специфика гетерогенного катализа, однако, состоит в том, что при контактных процессах в электронном механизме реакции непосредственное участие принимают твердые тела. Корректный учет взаимодействия субстрата с поверхностью катализатора значительно усложняет задачу, требует привлечения аппарата теории энергетической зонной структуры, теории поверхностных состояний и т. н. Несмотря на указанную трудность, число работ по квантовой химии гетерогенного катализа постоянно растет. И хотя в настоящее время такие работы чаще всего посвящены исследованию сравнительно небольших сорбционных комплексов или простейших модельных реакций, несомненно, что уже в недалеком будущем квантово-химические расчеты найдут широкое применение в прогнозировании гетерогенных катализаторов для процессов, представляющих практический интерес. На решение этой же задачи нацелены и широко развиваемые теперь методы корреляции кинетических и термодинамических параметров. К гетерогенно-каталитическим реакциям с учетом их некоторых особенностей уже применяют с определенным успехом уравнения линейных соотношений типа Бренстеда, Гаммета — Тафта, Воеводского — Семенова и аналогичные. Широко [c.5]

В настоящее время стоит уже новая задача целенаправленного поиска чувствительных и селективных кинетических методов, разработки принципов подбора индикаторных реакций для определения микроколичеств элементов. Для разработки новых чувствительных и селективных кинетических методов мы исследовали ряд переходных элементов, которые часто встречаются в качестве примесей Со, N1, Ре, Сг, Мп и Си. В качестве индикаторных реакций были выбраны реакции окисления аминов и ди-оксисоединений перекисью водорода и перйодатом калия. Особое внимание уделялось изучению кинетики и механизма индикаторных реакций, модификации субстратов и подбору активаторов, [c.320]

Существуют различные методы определения числовых значений кинетических параметров ферментативных реакций (в основном А м, / тах) по результатам измерения скорости реакции при различных концентрациях субстрата [S]. По гиперболической кривой, приведенной на рис. 2.5, а, можно рассчитать однако требуемое для этого значение г ах трудно определить экспериментально. Поэтому используют выражение, обрат- [c.106]

Таким образом, полученные данные о кинетике и механизме индикаторных реакций, модификация субстратов и подбор активаторов позволили разработать ряд новых более чувствительных кинетических методов определения микроколичеств Си, Со, N1, Ге, Мп, Сг. [c.325]

Во второй части книги мы рассмотрели методы, с помощью которых можно выяснить формально-кинетический механизм ферментативной реакции, а в гл.Х и XI — методы, позволяющие установить число и тип кинетически значимых промежуточных соединений. Такого рода исследования позволяют оценить некоторые константы скорости и константы равновесия при определенных условиях реакции. Дальнейшая задача состоит в том, чтобы использовать эти данные для выявления тех особых химических свойств фермента, которые проявляются на каждой индивидуальной стадии процесса. Один из самых главных вопросов, который может быть исследован экспериментально, касается качественной оценки вызываемых ферментом изменений распределения электронов в молекуле субстрата. [c.191]

При любом структурном анализе методом ступенчатой деградации центральной проблемой является синхронность каждой стадии. В гл. 5 было показано, что в ходе ступенчатой энзиматической деградации в оптимальных кинетических условиях определение даже небольшого числа мономерных звеньев высокомолекулярной РНК требует очень тщательного контроля экспериментальных операций. Реальные кинетические параметры, по-видимому, лимитируют создание и поддержание четкой синхронности отщепления каждого основания в огромных популяциях реагирующих ферментов и субстратов. [c.114]

Метод (а) применяется для субстратов, которые имеют по меньшей мере одну реакционноспособную функциональную группу для проведения количественной реакции с расщепляющим агентом. Вследствие существования энергетически различных диастереомерных переходных состояний трудностями проведения химической реакции могут быть рацемизация и кинетическое расщепление. Другой недостаток этого метода - возможность случайного фракционирования в процессе получения производного, обработки и хроматографирования, что может приводить к изменению первоначального соотношения энантиомеров в образце. Наконец, систематические ошибки могут возникать и при неполной энантиомерной чистоте расщепляющего агента, что может привести к неправильному определению энантиомерной чистоты высокообогащенных смесей. [c.79]

Для карбоксипептидазы А (КПА) из поджелудочной железы быка известны и трехмерная структура [1—3], и полная аминокислотная последовательность [4]. Роль существенно важного металла установлена менее определенно, но она доступна изучению с помощью разнообразных спектроскопических [5, 6] и кинетических [7, 8] методов. Следовательно, этот фермент можно включить во все увеличивающийся список белков, для которых возможно провести корреляции структуры и функции. Любой предлагаемый механизм катализа под действием КПА должен теперь учитывать как накопленные химические данные, так и взаимодействия, наблюдавшиеся при структурном исследовании кристаллов комплекса карбоксипептидазы с модельным субстратом глицил-ь-тирозином [3, 9]. [c.504]

Изоферментам ЛДГ присущи разные кинетические характеристики, величины pH, при которых они проявляют максимальную активность, сродство к субстратам и кофакторам. Для определения относительного содержания изоферментов используют ряд физико-химических методов электрофорез, ионообменную хроматографию, различия в кинетических параметрах отдельных изоферментов, дифференцированную чувствительность к субстратам и ингибиторам, имму но химические методы. [c.173]

Кинетические методы предусматривают инициирование химической реакции и последуюш,ее наблюдение за ее развитием во времени. Метод часто используется при определении дегидрогеназ человека [12]. Одним из наиболее важных соединений этого класса является а-гидроксибутиратдегидрогеназа (GBD), измерение концентрации которой в сыворотке крови проводится при диагностике инфаркта миокарда. Авторами работ [13, 14] предложен метод определения концентрации GBD при по.мощп специального спектрофотометра, называемого анализатором скорости реакции. Принцип метода заключается в следующем GBD катализирует реакцию (субстрат +МАО продукт + -fNADH-f-H+ (где NAD — р-никотинамидадениндинуклеотид) следовательно, скорость этой реакции, которая может контролироваться по интенсивности поглощения при 340 нм, является мерой ферментативной активности и соответственно концентрации. В прибор помещают одиовремепио до 16 образцов, где они последовательно автоматически анализируются. Результаты могут быть либо представлены в виде графика (и тогда их обработку проводит сам экспериментатор), либо переданы в компьютер (через соответствующий электрический интерфейс) для автоматической обработки. [c.28]

В. Кинетические методы. Поскольку степень потребления ацетата в пробе воды связана с копцентрацией субстрата, существует возможность определения функциональной зависимости аналогичной функции энзиматических реакций, описываемых уравнением Михаэлиса — Ментепа [31]. Соответствующий график позволяет определить кинетические константы, отражающие время превращения субстрата и его концентрации (Кб) при половине максимальной степепи потребления. Сравнение величины показателя Кз с соответствующей константой Михаэлиса невозможно, так как она включает также неизвестные количества субстрата, уже имеющегося в воде [36]. [c.249]

Кинетические методы основаны на завнсимости скорости ферментативных реакций от концентрации субстратов и фермента, а также присутствующих в среде активаторов или ингибиторов. Если анализируемым веществом является субетрат ферментативной реакции, то для определения его концентрации не обязательно доводить реакцию до конца и достаточно определить любым методом начальную скорость реакции, к-рая при прочих равных условиях (концентрация фермента, второго субстрата, величина pH, темп-ра и т. д.) зависит от концентраций этого вещества. Характер этой зависимости определяется законами ферментативной кинетики (см. Ферменты, Михаэлиса константа), он может быть найден эмпирически п выражен в форме калибровочного графика, используемого для нахождения концентрации определяемого вещества по найденной экспериментально скоростп ферментативной реакции. Любой из приведенных выше прямых Ф. м. а. с участием одной ферментативной реакции может быть использован как кинетич. метод. Если же применяется комбинация из нескольких реакций, то скорость индикаторной реакции может служить мерой концентрации субстрата первой вспомогательной реакции в том случае, если предварительно эта реакция доводится до конца. [c.206]

За время, прошедшее после выхода в свет первого издания книги, были разработаны и внедрены в промышленность новые синтетические клеи повышенной теплостойкости, вододисперсионные, термоплавкие и др. Интенсивно исследовались вопросы адгезионного взаимодействия, особенности формирования гетерогенных полимерных систем, их напряженное состояние, прочность и стабильность. Получили дальнейшее развитие различные- подходы к механическим свойствам и разрушению полимерных материалов, основанные на кинетической природе прочности. Следует отметить и определенные успехи в теоретическом изучении и практическом использовании различных методов повышения эксплуатационных характеристик клеевых и других адгезионных соединений, особенно основанные на модификации поверхности субстрата низко- и высокомолекулярными веществами. Те из перечисленных вопросов, которые в наибольшей степени связаны с проблемой прочности и долговечности клеевых соединений, подробно рассмотрены во втором издании книги. Однако основной упор делается на рассмотрение длительного влияния различных факторов, действующих на клеевые соединения конструкционных материалов при эксплуатации. Обычно это недостаточно освещается в монографиях, посвященных адгезионным соединениям. [c.6]

В 1917 г. Ленгмюром была дана определенная форма концепции хемосорбции. Выдвинутая Тейлором и в настоящее время достаточно подтвержденная гипотеза о том, что для перехода от физически к химически адсорбированному состоянию необходима энергия активации, привела непосредственно к исследованию вопроса, какие другие типы медленных процессов могут происходить в этих системах, к исследоваршю замены одного адсорбированного газа другим и разработке некоторых методов введения газа в субстрат, которое может легко контролироваться. Представления о том, что поверхность металлического субстрата можно рассматривать как щах.матную доску свободных валентностей, что испарение и конденсация на фиксированных участках являются независимыми процессами и что соседние молекулы не влияют на эти процессы, привели к первым попыткам кинетической обработки каталитических процессов, и наибольщее признание получила точка зрения, что при хемосорбц-ии в результате реакций радикалов образуются новые поверхностные соединения, т. е. поверхностные гидриды или металлорганические соединения. Результаты усовершенствования экспериментальной техники измерений теплот адсорбции заставили предположить, что эти постулаты вообще не могут быть правильными, и было обращено внимание на проверку каждого из них. В связи с проблемой поверхностной подвижности хемосорбированных частиц в свою очередь возникли следующие вопросы существует ли точка плавления или интервал плавления для хемосорбированного монослоя, равняется ли расстояние передвижения одному атомному радиусу или более, существует ли на кристаллической поверхности преимущественное направление для передвижения адсорбированных частиц, каков по величине период неподвижности между передвижениями. Мы также уверены, что по крайней мере во многих случаях теплота хемосорбции не постоянна, а падает с увеличением степени покрытия. Это явление привлекло внимание к таким представлениям, как гетерогенность поверхности, взаимодействие хемосорбированных радикалов или молекул поверхностных соединений друг с другом, и была постулирована возможность существования свободных валентностей, изменяющихся по силе при прогрессирующем образовании поверхностного соединения. [c.20]

Большинство ферментов не подчиняются таким простым схемам реакций, как (2.1) или (2.3), тем более если в реакции участвует несколько субстратов и продуктов. В общем случае для получения уравнения скорости для сложных механизмов используют метод Кинга — Альтмана и его модификации (см. гл. 1), но анализ дробно-рациональной функции при этом связан с трудностями, и определение кинетических констант Кт и Утвх при нелинейных графиках 1/и от 1/3 необосновано. Необходимость изучения многосубстратных реакций, однако, остается, и поэтому ряд авторов проанализировали многочисленные частные случаи, которые в силу различных допущений можно описать, используя методы линейной кинетики. В данном разделе приведен подход У. Клеланда, представляющий собой попытку привести уравнения скорости к форме, которая содержит параметры с определенным физическим смыслом и поддающиеся экспериментальному определению. [c.25]

Ацилферменты в механизме катаЛйза сериновыми протеазами (139). Определение кинетических параметров (147). Структура и реакционная способность ацилферментных производных а-химотрипсина (150). Молекулярная модель катализа а-химотрипсином (158). Предстационарная кинетика многостадийной ферментативной реакции (159). Экспериментальные методы исследования нестационарной кинетики (162). Нестационарная кинетика ферментативных реакций при переменной концентрации субстрата. Кинетические закономерности реакции с участием одного промежуточного соединения (165). Каталаза и пероксидаза (170). [c.710]

Уникальная активность и селективность действия ферментов стимулировали интенсивные усилия, направленные на выяснение механизма, их действия. Эта проблема складывается из двух главных аспектов кинетического и структурного. Структурный аспект сводится к решению двух вопросов 1) как ферменты узнают строго определенные субстраты 2) как они обеспечивают высокую скорость ферментативного процесса. Для этого необходимо было установить, как расположен субстрат на молекуле фермента, какие группы участвуют в его узнавании, и на этом основании предположить, как некоторые из этих групп обеспечивают каталитический механизм протекания процесса. Наиболее существенная информация была получена методом ] ентге Юструктурного анализа, который в общих чертах описывается в 7.13. Белу для работы фермента требуется кофактор, то необходимо иметь данные о расположении иа молекуле фермента этого кофактора. В настоящее время изучено большое число ферментов. В этой главе детально рассмотрено несколько ферментативных реакций, для которых такие исследования уже проведены. [c.199]

Изучение поверхностной энергии полимеров оказывается задачей еще более сложной, чем изучение поверхностной энергии металлов и других неорганических материалов. Своеобразие и специфика свойств полимеров исключают применение многих рассмотренных выше методов для измерения их поверхностной энергии. Это относится прежде всего к механическим методам, методам, основанным на изучении кинетических явлений в кристаллических объектах, и к расчетным. Но количественная оценка поверхностной энергии полимерных субстратов представляет еще больший практический интерес, чем изучение этой характеристики применительно к неорганическим субстратам. Дело в том, что при сочетании полимерных адгезивов с полимерными субстратами соотношения поверхностных энергий оказываются подчас весьма близкими, и при формировании адгезионного контакта наряду с кинетическими факторами особую роль начинают играть термодинамические факторы. Практические вопросы адгезионной прочности могут быть решены только с учетом соотношений поверхностных энергий адгезива и субстрата. Поэтому ведутся интенсивные поиски методов количественной характеристики поверх-/ ностной энергии полимеров. Неоднократно предпринимались попытки определения у путем экстраполяции к комнатной температуре температурной зависимости поверхностной энергии расплава (рис. II.2). Правомерность экстраполяции даже для аморфных полимб ров может быть подвергнута сомнению [95—97]. Дело в том, что переход полимера из расплава в стеклообразное состояние связан с изменением энтропии, а проводя экстраполяцию температурной зависимости поверхностного натяжения расплава, исходят из предположения, что полимер в твердом состоянии [c.60]

В связи с тем, что скорость ферментативной реакции находится 8 определенной зависимости от концентрации фермента, то и для этой последней величины необходим такой же, как и для концентрации субстратов, способ выражения (т. е. гмоли на литр раствора). Однако в настоящее время это возможно далеко не для всех ферментов, поскольку немногие из них получены в индивидуальном состоянии и не во всех случаях надежно определен молекулярный вес ферментов. Помимо того, как оказалось, в одной молекуле фермента может содержаться несколько каталитических центров, и, следовательно, концентрация фермента может быть не равна концентрации каталитических центров. Все это осложняет положение, хотя в некоторых случаях молярную концентрацию каталитических центров удается определить при помощи прямых или косвенных методов (см. гл. IX) и использовать эту величину для вычисления кинетических констант. [c.9]

Достоинство метода Хестрина при определении активности холинэстераз состоит в том, что он позволяет исследовать кинетику ферментативной реакции при различных условиях метод достаточно чувствителен, т. е. позволяет работать в широком интервале концентраций субстрата (при необходимости исследований больших концентраций субстрата растворы перед определением могут быть разбавлены) метод позволяет производить массовые определения, однако, являясь удобным для определения активности холинэстераз различного происхождения в стандартных условиях (определенные концентрации фермента и субстрата, стандартное время реакции при условии соблюдения нулевого порядка) [35—42], он не пригоден для кинетических исследований. [c.144]

В литературе описаны различные варианты метода Мичела, в том числе модификации для целей микроопределения [44—48]. Однако все варианты этого метода, будучи полезными для стандартного определения активности холинэстераз, в особенности при необходимости контроля большого числа образцов, не удовлетворяют нуждам кинетических исследований. Во-первых, по сути метода в ходе энзиматической реакции pH среды изменяется, что оказывает влияние на кинетику процесса. Во-вторых, метод при определении двух значений pH — начального и конечного — не дает представления о кинетике реакции, а позволяет определить лишь суммарное количество распавшегося субстрата. В-третьих, точность метода Мичела далеко недостаточна для кинетических измерений, особенно при крайних значениях концентраций субстрата. Наконец воспроизводимость результатов также недостаточна вследствие нестабильности рН-метров. [c.145]

Тщательное исследование рН-функций оказалось весьма ценным при изучении механизма действия гидролаз. Возможность изолировать индивидуальные кинетические стадии с помощью методов остановленного потока, стационарной кинетики и релаксационной техники позволила получить вполне четкие результаты. Наиболее определенные данные при использовании некоторых субстратов были получены для трипсина и химотрипсина [2,3]. Именно с помощью такого подхода впервые было уста-йовлено участие остатков гистидина в механизме действия химотрипсина на стадиях ацилирования и деацилирования. Некоторые данные стационарной кинетики привели к полезным выводам о механизме действия негидролитических ферментов. Можно думать, что этот метод анализа механизмов ферментативных реакций будет быстро развиваться. Группа Альберти [4] провела очень тщательное измерение величин р/С и энтальпии ионизации связывающих группировок фумаразы. Данные о [c.217]

Интересные результаты, полученные при определении числа фосфатсвязывающих центров, привлекли в последнее время значительное внимание. Несмотря на димерную природу фермента, кинетические данные указывают на существование одного активного центра [62—64]. Экспериментальное подтверждение этого было получено методом остановленной струи [66, 68, 72], при помощи которого было обнаружено, что величина предста1Ционар-ного выброса продукта равна примерно 1 молю на моль фермента. Однако при высокой онцентрации субстрата (2 10- М) этот метод дал величину 2,7 [73]. Включение фосфата в больщинстве работ, за исключением вышеупомянутой работы Лаздунски и др. [71], составляло 0,6—1,3 моля/моль [64, 74, 75]. Нейман [35] обнаружил связывание 1 моля ингибитора. О-л-нитрофенилтио-фосфата, на 1 моль белка. [c.640]

Теперь рассмотрим очень запутанный вопрос что же определяет нуклеофильную силу реагента Трудность, возникающая при попытке дать точное определение силы нуклеофила, состоит в том, что рассматриваемое свойство определяется не только нуклеофильностью, но и другими причинами, отчасти рассмотренными выше. Порядок нуклеофильности может изменяться в зависимости от выбранной реакционной системы, например при переходе от одпого субстрата к другому или от одного растворителя к другому при одинаковом субстрате. Если субстрат является катионом, то его реакции с анионами будут идти легче, чем реакции с нейтральными нуклеофилами (хотя этот эффект относительно не велик [68, 72]). Важнейшее свойство растворителя — его способность сольватировать катионы и анионы [69]. Различие возникает также вследствие того, оценивается нуклеофильная сила по положению равновесия или по скорости реакции очевидно, в необходимых случаях нужно учитывать метод оценки нуклеофильности (термодинамическая и кинетическая нуклеофильность). [c.374]

Б диоксане торийметрически в присутствии ализаринового красного С а в метаноле обоими методами. При спектро-фотоаетрическом определении концентрации продукта следует учесть, что pH анализируемого раствора и растворителя в кювете сравнения (после подкисления кинетического раствора ) должны быть одинаковыми. Текущие наблюдаемые константы скоростей к (л-моль Сек ) определяли по уравнению второго порядка, с учетом расходования 2-х молей реагента на моль субстрата. [c.1175]

Рассмотренные статистические методы не всегда дают удовлетворительные результаты в отношении предсказания скорости гидролиза. Это может объясняться несколькими причинами. Во-первых, исходные данные по расщеплеьшю пептидов и белков в ходе структурных исследований не являются количественными и наблюдае1ше результаты могут сильно зависеть от условий эксперимента. Во-вторых, если первичная специфичность (например- по остатку Р ) вносит основной вклад в скорость гидролиза, то вариации удаленных аминокислотных ос -татков будут слабо проявляться в опытах по определению структуры, но могут заметно влиять на начальные скорости, полученные в кинетическом эксперименте. Наконец, в тех случаях, когда структура субстрата сказывается как на величине так и на исходные данные в зависимости от соотношекшя [c.176]

Метод наименышх квадратов. Исследование кинетических закономерностей микробиологических процессов, установление характера зависимостей удельных скоростей роста и потребления субстрата от изменения внешних условий, определение экономических коэффициентов и коэффициентов поддержания жизни требуют определения тангенсов угла наклона прямых и отрезков, отсекаемых некоторыми прямыми на соответствующих осях. С точки зрения теории регрессии это означает, что нужно определять коэффициенты а и Ь в уравнении прямой линии (уравнение регрессии) [c.148]