Моноклональные антитела продуцент ВЭБ

Большинство антигенов вызывает в организме образование целого набора антител, но каждый отдельно взятый лимфоцит продуцирует лишь одно из них. Миеломы — это злокачественные новообразования иммунной системы они развиваются в результате неконтролируемой пролиферации одной линии лимфоцитов. При этом в больших количествах синтезируется один тип белков-антител. Иными словами, миеломы являются природными продуцентами моноклональных антител. По методу Миль-штейна проводят слияние нормальных (неопухолевых) лимфоцитов и клеток миеломы. Вначале полученные гибриды синтезируют смесь антител, включающую два типа антител родительских клеток, а также гибридные их формы, образующиеся путем ассоциации тяжелых и легких цепей антител двух родительских форм. Впоследств ии в результате элиминации хромосом образуются клетки, способные к синтезу антител лишь одного типа. Это могут быть либо антитела, закодированные в геноме лимфоцита, либо антитела, характерные для клеток миеломы. Скрининг и обнаружение клона, синтезирующего искомое антитело, ведут при помощи биохимических и иммунохими-ческих методов. Схема этого метода дана на рис. 7.5. [c.313]

В результате гибридизации удается получать гибриды клеток с хозяйственно ценными свойствами. Пока практически единственный пример таких гибридов — это гибридомы, продуцирующие моноклональные антитела [6]. Однако можно ожидать создание линий гибридных клеток, обладающих способностью продуцировать другие ценные биологические вещества. Получение таких линий может быть достигнуто путем слияния дифференцированных клеток-продуцентов ценных веществ с опухолевыми клетками, имеющими такое же происхождение, что и клетки-продуценты. [c.176]

Из многих сотен препаратов, полученных методом генетической инженерии, в практику внедрена только часть интерфероны, интерлейкины, фактор VIII, инсулин, гормон роста, тканевый активатор плазминогена, вакцина против гепатита В, моноклональные антитела для предупреждения отторжения при пересадках почки, диагностические препараты для выявления ВИЧ и др. Это обстоятельство можно объяснить несколькими причинами. Во-первых, длительное время к этим препаратам и рекомбинантным штаммам микроорганизмов относились настороженно, опасаясь, что может произойти неуправляемое распространение экологически опасных рекомбинантных микроорганизмов. Однако в наши дни эти опасения практически сняты. Во-вторых, использование рекомбинантных штаммов продуцентов предусматривает разработку сложных технологических процессов по получению и выделению целевых продуктов. На разработку технологии получения препаратов методом генетической инженерии, доклинические и клинические испытания их обычно затрачивается значительно больше средств, чем на получение штамма. В-третьих, при получении препаратов методом генетической инженерии всегда возникает вопрос об идентичности активной субстанции, вырабатываемой рекомбинантным штаммом-продуцентом, природному веществу, т. е. требуется проведение исследовательских работ, направленных на доказательство идентичности, а также иногда решение дополнительных задач по приданию продукту природного характера. [c.101]

Одновременную инкубацию обоих конкурентов (меченого и немеченного миозина) с первичными антителами использовали Кларк и соавторы для отбора моноклональных гибридбм — продуцентов антител против миозина. Роль иммунной сыворотки в этих опытах каждый раз играли среды культивирования различных гибридом, полученных в результате слияния клеток селезенки крыс и мышей, иммунизированных миозином, и клеток миеломной линии P3-X63-Ag8. Инкубацию проводили в боратном буфере (pH 8,4), содержащем 40 мМ пирофосфата натрия, по 1% Тритона Х-100 и дезоксихолата, а также 2% нормальной сыворотки крысы или мыши. Эту сыворотку вводили опять-таки ради создания эквивалентного соотношения концентраций при последующем добавлении вторичных антител в составе анти сыворотки козы против иммуноглобулинов крысы или мыши Использовав для конкуренции миозин гомологичного и гетеро логичного происхождения, авторы выясняли степень специфич ности антител, синтезируемых гибридомами [ lark et al., 1980] [c.282]

Гибридомы способны производить строго определенные антитела с заданной специфичностью. Именно эта особенность является наиболее ценным свойством, отличающим их от природных продуцентов моноклональных антител — клеток миелом. Миеломы представляют собой злокачественные костно-мозговые опухоли. Любая такая опухоль состоит из клона плазматических клеток, произощедших от одного перерожденного предшественника лимфоцита. Поэтому в каждой опухоли синтезируются в большом количестве определенные антитела, но специфичность их случайна и неизвестна. Что же касается нормальных лимфоцитов, то среди них можно выделить клетки, синтезирующие заданные иммуноглобулины. Однако поддерживать их в культуре не удается. [c.147]

Исходные гибридные клетки могут иметь неклональное происхождение, особенно если гибридные колонии растут в большинстве ячеек. Они могут представлять собой смесь клонов-продуцентов и непроду-центов, а также смесь разных клонов-продуцентов. Для получения моноклональных антител необходимо, чтобы производящие их клетки были потомками единичных клеток. Достигается это последовательными этапами клонирования, которое осуществляется 2—3, а иногда и более раз. [c.200]

А создание гибридом путем слияния иммунных В-лимфоцитов — продуцентов антител и раковых клеток с целью получения моноклональных антител [Келлер Д., Мильштейн Ц., 1975] А открытие иммуномодуляторов — иммуноцитокинов (интерлейкины, интерфероны, миелопептиды и др.) — эндогенных природных регуляторов иммунной системы и их использование для профилактики и лечения различных болезней [c.17]

ТОК, образующих антитела, состоит в том, что число лунок, которое требуется анализировать на каждом этапе, может быть чрезмерно большим. Ясно, что требуется найти компромисс. В табл. 4.1 приведена методика получения МКА в культурах неразделенных МКПК, в которой найдено равновесие между стремлением добиться моноклональности клеток, образующих антитела, и желанием ограничить число анализируемых микрокультур. Эта методика дает наилучшие результаты, если до заражения ВЭБ проводят и обогащение культуры клетками-продуцентами. Если же это невозможно, рекомендуется начать с удаления из взвеси МКПК Т-клеток (см. выше). [c.161]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология