Сыворотка анти

Радиоиммуноэлектрофорез. Если антиген или антитело пометить радиоактивным изотопом, то с помощью иммуноэлектрофореза можно анализировать чрезвычайно малые количества материала. Известно, что антигенные свойства IgQ не меняются, если молекула IgQ как антитело входит в иммунный комплекс. Если мы располагаем соответствующей иммунной сывороткой анти-IgQ, меченной радиоактивным изотопом, то с ее помощью мы можем выявлять IgQ в иммунных комплексах (например, в преципитатах). Радиоиммуноэлектрофорез состоит из следующих стадий [c.148]

ЧТО же произойдет, если мы смешаем сыворотку анти-М прямо с метаниловой кислотой [c.25]

В современных популяциях Западной Европы аллель d встречается с частотой д = 0,35. Следовательно, его частота должна уменьшаться при отсутствии других селективных механизмов, противодействующих этой тенденции. С какой скоростью будет происходить это уменьшение частоты На рис. 6.13 показано Ар для нескольких поколений, полученное при двух предположениях о начальных частотах р для О и д для d, и коэффициентах отбора и 2, изменяющихся в пределах, действительно наблюдаемых в популяциях человека. Перед введением профилактической терапии сывороткой анти-В у женщин из группы риска число пораженных детей зависело от среднего числа беременностей [1740]. Правдоподобной оценкой является 5% детей, пораженных эритробластозом, от всех детей Dd матерей dd. В прежнее время, когда женщины имели больше беременностей, эта цифра, вероятно, была несколько выше. [c.304]

Как было отмечено в разд. III, при типировании сывороток анти-Н-2 любым методом необходимо ставить контроли. В любом случае включают контроль среды и комплемента (чтобы исключить возможность лизиса, обусловленного средой, комплементом или сочетанием обоих этих факторов). И наконец, в качестве контроля специфичности реакции и активности комплемента вводят активную сыворотку анти-Н-2 известной специфичности и титра. Кроме этих внутренних контролей, необходим контроль клеток-мишеней, используемых в опыте, с помощью известной сыворотки анти-Н-2, взятой для сравнения с испытуемой специфичность испытуемой сыворотки контролируют также клетками-мишенями другой Н-2-специфичности. Обычно используют клетки двух типов [c.227]

Для доказательства того, что антиген не стимулирует пролиферации В-клеток, необходимо включить следующие контроли а) предварительную обработку клеток лимфатических узлов сывороткой анти-Thy-1.2 с комплементом (в этом случае следует ожидать, что включение тимидина не превысит фонового уровня) б) определение в культуре антиген-специфических антителообразующих клеток методом локального гемолиза (следует ожидать незначительного фонового уровня) в) окрашивание стимулированных клеток конъюгированной с флуоресцеином сывороткой к мышиному Ig (пролиферирующие клетки должны быть Ig-). [c.324]

Случайное объединение гамет дает стационарное распределение десяти генотипов. Если использовать четыре антисыворотки, то удается различить девять фенотипов, поскольку два генотипа—М5/Ыз и Мз/ЫЗ —неразличимы. В отсутствие сыворотки анти-з удается выявить только шесть фенотипов три 5-положительных и три 5-отрицательных (внутренний треугольник на рис. 5.4). Частоты и соответствующие наблюдаемые численности этих фенотипов представлены в табл. 5.6, где 0= =/>1+/)2+/)з —общая численность 5-положительных, а Р = / 1+/ 2+ +/ з — общая численность 5-отрицательных (хз) индивидуумов [c.95]

Рис. У.З. Взаимодействие эритроцитов индивидов с группами крови О, А, В и АВ с антителами сыворотки (анти-А и анти-В)

На стеклянную пластинку обычным способом наносят 1 %-ный гель агарозы, содержащий 2,5%-ную иммунную сыворотку анти-IgG. В затвердевшем геле агарозы вырезают нужное число круглых лунок для исследуемой сыворотки и IgG и заливают в них по несколько капель агарозного раствора. Препараты IgG известной концентрации в соответствующем разведении вносят в несколько лунок в остальные лунки заливают образцы исследуемых сывороток и проводят электрофорез, как описано выше. В зависимости от соотношения концентрации антигена и антител продолжительность электрофореза может варьировать от 2 до 10 ч. Электрофорезг следует закончить, когда прекратится увеличение преципитационных пиков, т. е. когда избыток антигена будет нивелирован электро- [c.156]

Другой пример практического использования лектинов продемонстрировали Левин и сотр. [22]. Используя анти-К-лектин Vi ia graminea, они показали, что лошадиные эритроциты содержат N-антиген — факт, который нельзя было выявить при помощи адсорбированной кроличьей сыворотки, так как в адсорбированной сыворотке остаются видоспецифические агглютинины. Доказательство наличия N-анти-гена в эритроцитах лошади побудило Левина и его сотрудников предпринять поиски истинного анти-М-агглютинина в сыворотке лошади. Обнаружение его означало бы, что лошадь может быть хорошим продуцентом иммунной сыворотки анти-М. Опыт подтвердил это предположение, и таким образом был открыт новый богатый источник получения иммунной сыворотки анти-М. [c.88]

Еще рельефнее выступают эти взаимоотношения при сравнительном опыте, поставленном с сыворотками трех кроликов, иммунизированных La tarius, и четырех, иммунизированных Russula. Взятые в этом опыте чрезвычайно сильно действующие сыворотки анти-La tarius были получены от животных, очень долго подвергавшихся иммунизации. [c.567]

Модификация другим аллелем антиципация (опережение). Фенотипическое выражение гена может быть модифицировано не только генами других локусов, но и нормальным аллелем. Такой пример дает генетика резус-фактора (разд. 3.5.4). Некоторые образцы крови при тестировании с сывороткой анти-КЬВ не дают ни строго положительной, ни строго отрицательной реакции, точнее, дают слабо положительную реакцию. Их называют В . В большинстве случаев этот эффект обусловлен специфическим аллелем, но имеются исключения. В нескольких семьях реакция В" наблюдалась только у тех членов семьи, в генотипе которых гомологичный аллель был представлен гаплотипом С(1е (рис. 3.21). С помошью дополнительного статистического анализа была показана аллельная модификация при доминантно наследующейся миотонической дистрофии (16090). При этом медленно прогрессирующем заболевании миотония сочетается с относительно мягкой мышечной дистрофией и катарактой. Это заболевание обнаруживает необычную степень варьирования возраста начала. Обследование обширной родослов- [c.171]

Частота гомозигот составляет q . Примером может служить грухша крови Диего (Diego) (разд. 7.3.1). У американских индейцев и в монголоидных популяциях имеются два фенотипических класса обнаруживающие положительную реакцию агглютинации с сывороткой анти-Di и необнаруживающие таковой. Семейные исследования показали, что отрицательный тип реакции является рецессивным признаком [c.181]

Выделение иммуноглобулинов, связанных с поверхностью клетки, а также их внутриклеточных предшественников (или предшественников секреторных Ig) всегда сопряжено со значительными трудностями. Радиомаркирование, позволяющее выявить следовые количества Ig, облегчает решение этой задачи. После маркирования клетки солюбилизируют в детергенте и обрабатывают лизаты сывороткой анти-Ig, полученной у другого вида иммунные комплексы обычно осаждают затем второй антисывороткой к Ig первой антисыворотки. Меченые клеточные lg, находящиеся в преципитате, исследуют методом электрофореза в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия (ДСН) в присутствии восстанавливающих агентов или без них (Laemmli 1970). Меченые полипептидные цепи, разделенные в геле, опре- [c.77]

Очищенный препарат иммуноглобулина диализуют против 0,1 М ацетатного буфера с pH 4,3, затем к нему добавляют кристаллический пепсин 1 в соотношении глобулин пепсин 50 1 и, если необходимо, доводят pH до 4,3 1 М уксусной кислотой. Смесь оставляют на водяной бане при 37°С на 8—14 ч, затем охлаждают во льду. Осадок, который может образоваться во время реакции, удаляют центрифугированием и доводят pH до 8,0 с помощью 1 М NaOH при этом значении pH пепсин инактивируется. Чтобы удалить мелкие пептиды, ферментированный иммуноглобулин диализуют против большого объема ЗФР или добавляют сульфат аммония до конечной концентрации 2,4 М, центрифугируют 30 мин при 5000g, осадок растворяют в ЗФР и раствор диализуют для удаления ионов сульфата. Чистоту готового препарата проверяют с помощью иммунодиффузин в агаровом геле (если имеются сыворотки анти-РаЬ и анти-F ) или более чувствительным методом электрофореза в полиакриламидном геле с ДСН (см, гл. 4), сопоставляя интактный, восстановленный и алкилированный образцы. Если ферментолиз прошел не полностью [c.167]

Сыворотка данного аллотипа должна тормозить агглютинацию нагруженных эритроцитов, конкурируя с ними за антиаллотипические антитела. Например, если смешать 25 мкл сыворотки анти-Ig-lb с 1 мкл Ig-lb нормальной мышиной сыворотки, то по 1ученная смесь уже не способна агглютинировать Ig-lb- [c.216]

ФБЭ. В то же время нормальная сыворотка мыши другого аллотипа (например, Ig-la) не тормозит агглютинации. Это торможение агглютинации зависит от определенного аллотипа иммуноглобулина, что можно доказать, использовав конгенных по аллотипу мышей. Мыши WB (Ig-lb) и 3H.SW(Ig-la), а также B.20(Ig-lb) и BALB/ (Ig-la) — это конгениые пары, члены которых различаются только по участку хромосомы, несущему соответствующие аллели. В реакции агглютинации сыворотки WB и СВ.20 будут тормозить активность сыворотки анти-Ig-lb, но не гнти-Ig-la. [c.217]

Если в сыворотках анти-Н-2 обнаруживаются нежелательные антитела (антитела к поверхностным антигенам, отличным от того антигена Н-2, против которого эти сыворотки специально получали), то их можно удалить истощением. Такой прием очень часто используется для повышения специфичности сывороток анти-Н-2. Кроме того, специфическое истощение [т. е. истощение клетками линии доноров антигена (или антигенов) Н-2] служит решающим контролем специфичности. Детальный анализ такого истощения читатель найдет у Клейна (Klein, 1975, pp. 81—93) методология истощения подробно рассмотрена в другой работе (Sa hs, one, 1975). [c.228]

В селезенке неиммунизированых мышей содержатся как Т-, так и В-РОК. Т-РОК исчезают после тимэктомии у взрослых животных и после введения антилимфоцитарной сыворотки они лизируются сывороткой, анти-ТЬу-1.2 в присутствии комплемен- [c.265]

Получение антисывороток к поверхностным клеточным антигенам описано в гл. 13. Активность сывороток определяют в реакции розеткообразоваиия с клетками, которые заведомо несут на своей поверхности искомый антиген при этом находят оптимальное разведение антисыворотки, варьируя его в пределах от 1 10 до 1 100. При небольших разведениях доля розеткообразующих клеток бывает невелика, но по мере разведения она возрастает и наконец достигает плато — 85—95% розеткообразующих клеток (в случае антисывороток к антигенам гистосовместимости). При очень больших разведениях доля розеткообразующих клеток вновь снижается. Стандартные опыты ставят с теми разведениями антисыворотки, которые соответствуют области плато. Например, гипериммунные сыворотки анти-Н-2 обычно применяют в разведениях от 1 1000 до 1 250. [c.276]

Лимфоциты из периферической крови инкубируют с соответствующей сывороткой анти-Н-2 и БА-БЭ. Этот метод дает быстрый ответ, так как здесь достаточно качественной оценки препаратов в положительном случае наблюдается 80—90% розеткообразующих клеток, а в отрицательном — не более 5%. ТакаЯ разница хорошо видна при быстром просмотре влажного npena-i рата. [c.278]

Основная часть неприлипших клеток (97—99%) — это Т-клетки (они идентифицированы в реакции цитолиза с сывороткой анти-Thy-l,2 с комплементом морской свинки). Выход Т-клеток, нанесенных на колонку, составлял у нас 50—90%, а примесь В-лимфоцитов (клеток Ig+ по данным иммунофлуоресценции) — от 0,5 до 2,57о. [c.303]

Рис. 1. Взвесь отвечающих клеток мышей СВА, освобожденная от В-лимфоцитов, была активирована в СКЛ стимулирующими клетками мышей SJL. Т-бласты обрабатывали сывороткой анти-Н-2 (1/20) и подвергали двойному окрашиванию, как описано в тексте, — сначала кроличьей сывороткой анти-Т (выявляемой с помощью бараньей антисыворотки к кроличьему Ig, меченной ТРИТЦ), а затем бараньей антисывороткой к мышиному Ig, меченной ФИТЦ. Одни и те же клетки наблюдали при освещении, возбуждающем флуоресценцию вначале родамина, а затем флуоресцеина.

В-клеток можно на основании следующих критериев 1) предварительная обработка клеток лимфатических узлов сывороткой анти-Thy 1.2 блокирует пролиферативный ответ 2) число антиген-специфических антителообразующих клеток в реакции локального гемолиза не должно нарастать на пике пролифератив-ного ответа 3) число В-клеток, выявляемых в культуре по окрашиванию их поверхности, не должно возрастать после стимуляции антигеном. [c.326]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология