Антиген, анализ распределения

Этот метод можно приспособить также для определения характера распределения антигенов в ходе биохимического фракционирования. Такой вариант ELISA получил название анализ распределения антигенов . И наконец, система a-ELISA может быть использована в непрямом конкурентном иммунологическом анализе для количественного определения малых количеств антигена. [c.210]

И ТОЙ же плате. Характерно, что собственно в методе ELISA, используемом для определения антиген-специфических антител в условиях, когда антиген добавляется в избытке и непосредственно не тестируется, различия между платами и лунками, обнаруживаемые при проведении анализа распределения антигена, не выявляются. Причина этого заключается в том, что методе ELISA вариации во взаимодействии белков с пластиком, иначе говоря количества адсорбированных антиглобулинов, представляют собой лишь второстепенный фактор. [c.241]

Ген, ответственный за цветовую слепоту (дальтонизм), был локализован в Х-хромосоме в 1911 году. Особенности наследования генов, сцепленных с Х-хромосомой, позволили отнести к этой группе сцепления более чем 100 локусов. Хромосомная локализация аутосомных генов была впервые проведена в 1968 году. Определено расположение локуса, кодирующего антигены групп крови Даффи, которые, подобно антигенам группы ABO и другим антигенам крови, находятся на поверхности эритроцитов. Сравнение наследования изучаемого гена с распределением аберрантной хромосомы 1 показало, что он локализован в этой хромосоме. С тех пор на основании анализа родословных определены группы сцепления для 70 генов человека. Картирование многих из этих генов стало возможным после того, как было показано их сцепление с другими генами, локализацию которых удалось установить методами генетики соматических клеток. Примером этого служит картирование гена резус-фактора, впервые открытого в 1939 году. В 1971 г. изучение родословных показало, что ген Rh сегрегирует сцепленно с геном РЕРС, кодирующим пептидазу С. Годом позже при изучении соматических клеток ген РЕРС был локализован в хромосоме 1. Таким образом, стала известной группа сцепления и для гена Rh, кодирующего резус-фактор. В настоящее время картировано около 500 аутосомных генов, причем 100 из них картировано за последние 12 месяцев. Подавляющее большинство этих генов локализовано методами генетики соматических клеток. [c.294]

Высокий уровень фонового окрашивания при цитофлуори-метрическом анализе затрудняет выявление антигенов, присут-ствуюш их в низких концентрациях, и (или) малочисленных субпопуляций клеток. При этом чаще всего встречаются две ситуации 1) уровень фонового окрашивания равномерно высок, т. е. соответствующий пик фона имеет унимодальный характер, и 2) высокий уровень фона характеризуется неоднородным распределением. Для оценки уровня фонового свечения необходимо сравнить его с флуоресценцией неокрашенных жизнеспособных клеток. При определенном цвете флуоресценции минимальным достижимым уровнем фона является интенсивность аутофлуоресценции клеток. Чаще всего высокий фон объясняется [c.354]

Во всех рассматриваемых тест-системах в качестве твердофазного носителя, или подложки, использовали небольшие диски с изотиоцианатными группами на поверхности, с помощью которых ковалентно пришивают белки или иные антигены. Антигены, химически связанные с поверхностью таких дисков, можно лиофилизовать и хранить при 4°С в присутствии осушителя. В тех случаях, когда специально проверяли стабильность подобных препаратов при длительном хранении, было установлено, что при хранении в таких условиях существенного изменения свойств не происходит на протяжении 4 лет и более. Ковалентный способ иммобилизации обладает рядом пренму-ществ для него характерно равномерное распределение антигена по поверхности и почти полное предотвращение его вымывания с поверхности носителя в свободную фазу при проведении анализа. Если у применяемого способа таких преимуществ нет, то возникают серьезные проблемы при использовании антигенов нековалентно адсорбированных на поверхности носителя ( hes-sum, Denmark, 1978). [c.195]

В реакциях взаимодействия фермента с субстратом константа равновесия (К) неизменна при различных концентрациях субстрата. При связывании же антител с гомологичным антигеном дело обстоит иначе — популяция поликлональных антител гетерогенна по этой константе, т. е. по величине аффинности. Ранее предполагалось, что в любой антисыворотке количественное распределение антител по аффинности имеет характер нормального (Гауссова) распределения. Как геперь установлено, это предположение было ошибочным. Графический анализ данных по аффинности для реакции между антисывороткой и антигеном показывает, что распределение антител по аффинности не соответствует нормальному (рис. 9.16). Однако среднюю аффинность популяции антител в данной антисыворотке (Кд) можно определить с хорошим приближением как величину, обратную такой концентрации свободного антигена, которая необходима для насыщения половины всех антигенсвязывающих центров антител = 1/[Аг , д5 ]. [c.157]

Антигены поверхности клетки. Иммунофлюоресцентный анализ клеточной поверхности — расширяющаяся область применения ПЦМ. Обычно используется метод непрямой иммунофлюоресценции как более чувствительный, исследования проводят на цитометрах, имеющих лазерное возбуждение. Окрашивают, как правило, живые клетки, которые затем могут быть фиксированы этанолом или пара- 1ормальдегидом. Анализ получающихся гистограмм распределения клеток по интенсивности флюоресценции требует тщательности и опыта работы, так как субпопуляции положительных и отрицательных по исследуемому антигену клеток имеют широкие, чаще всего заметно перекрывающиеся гистограммы, форма которых в общем случае заранее не известна. Должен быть определен также уровень неспецифического окрашивания с помощью антисыворотки на отсутствующие в исследовании антигены [15, 16]. [c.141]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология