Антисыворотка специфичность

Применяя гормон, связанный с полилизином, можно получить антисыворотку, специфичную к декапептиду ангиотензину. Если инкубировать такую сыворотку с ангиотензином, содержащим радиоактивную метку, а затем хроматографировать на сефадексе G-25, то можно установить, что он элюируется вместе с сывороточными белками и при этом объем выхода равен свободному объему (Kav = 0). Однако если постепенно увеличивать количество неактивного ангиотензина, то все большая часть радиоактивной метки будет обнаруживаться в низкомолекулярной области Kav = ) Такое поведение явно свидетельствует о присутствии в применяемой сыворотке специфического антитела. [c.149]

Не совсем ясно, зачем нужны два стоп-кодона и два фактора терминации, однако высказывалось предположение, что-это своего рода предохранительное приспособление, обеспечивающее надежность прекращения трансляции. Известно, что в-некоторых случаях оба кодона располагаются последовательно,, но сигналом об освобождении синтезированного полипептида может служить любой из них. Были получены антисыворотки,, специфичные в отнощении факторов RF-1 и RF-2. Если в среде присутствует одна из антисывороток, то синтез белка заканчивается нормально и белок освобождается, в присутствии же-обеих антисывороток синтезированный белок не отделяется or рибосомы. [c.59]

Один из возможных подходов достигается иммунологическими методами, которые дают возможность с помощью стандартной антисыворотки, специфичной к определенному высоко-очищенному и гомогенному белку, выявлять наличие этого белка в неочищенных образцах. При этом мы сталкиваемся с двумя трудностями. Во-первых, хотя выявить отличия от стан- [c.110]

Установлено, что полисахариды являются детерминантами, определяющими иммунологическую специфичность многих видов микроорганизмов. Специфическое взаимодействие зависит от ассоциации реакционноспособных групп полисахаридного антигена и белкового антитела, и потому метод, основанный на этом типе взаимодействий, обычно специфичен к строению полисахарида Если получить антисыворотку, специфичную к полисахаридам из вестного строения, ее можно использовать для установления сте пени структурного сходства неизвестных полисахаридов и полиса харидов, к которым специфична данная антисыворотка. Таким пу тем была обнаружена гетерогенность галактана из легких быка Преципитат, образуемый с антисывороткой, специфичной к Pneu mo o us типа XIV, содержал D-галактозу и D-глюкуроновую кис лоту в количествах, отличных от исходного препарата [62]. [c.227]

Число линий преципитации на электрофореграмме зависит от используемой иммунной сыворотки. Например, хорошо себя зарекомендовавшая кроличья антисыворотка к белкам сыворотки человека фирмы Behringwerke (ФРГ) и аналогичная лошадиная антисыворотка института Human (Венгерская Народная Республика) позволяют идентифицировать примерно 20 белковых фракций сыворотки. Принципиальная возможность приготовления антисыворотки практически к любому белку значительно увеличивает применимость иммуноэлектрофореза. Кроме того, приготовив антисыворотки, специфичные к какому-либо одному-единственному белку (или небольшому числу белков), можно в смеси белков исследовать составляющие ее отдельные компоненты. Иммунные сыворотки, предназначенные для иммунохимического анализа отдельных белков плазмы человека, уже имеются в продаже. [c.21]

В распоряжении исследователя имеется охарактеризованная кДНК, но ему требуются антитела, поскольку 1) нужный белок содержится в клетке в небольшом количестве или его трудно очистить, 2) либо необходимо получить антисыворотку, специфичную к определенному участку или субъединице данного белка. Последний подход обладает значительно большей избирательностью, чем скрининг группы моноклональных антител, и гораздо проще, чем выделение пептидных фрагментов путем ферментативного или химического расщепления. [c.142]

Овцы, как н кролики, дают хорошие титры антител к Ig человека всех классов. От овец получены преципитирующие антисыворотки, специфичные к подклассам IgG человека, что, по-видимому, свидетельствует о способности этих животных распознавать тонкие структурные различия иммуноглобулинов других млекопитающих. Обычно от овцы и кролика получают одинаково хорошую антисыворотку к изотипам иммуноглобулинов крыс и мышей, а кроме того, как от филогенетически отдаленных видов, и к иммуноглобулинам друг друга. Например, в методах с использованием первых антител кроличьего происхождения вторыми антителами могут быть иммуноглобулины овцы к иммуноглобулину кролика, и наоборот. Очищенные с помощью аффинной хроматографии кроличьи и овечьи антитела стабильны при хранении. В дополнение ко всему вышесказанному Fab- и Р( аЬ)2-фрагменты могут быть получены из овечьих и кроличьих антител по хорошо описанной и легко воспроизводимой методике [И], [c.42]

ГО комплекса [первичные антитела — вторые антитела]. Пример подбора оптимальной концентрации антител для покрытия фильтров и последующего определения ферритина показан на рис. 20-4. Растворы с тремя различными концентрациями первичных кроличьих антител к ферритину смешивали с различными разведениями препарата козьей антисыворотки, специфичной к иммуноглобулинам кролика, в указанных соотношениях. Образование иммунокомплекса протекало в течение 24 ч. После отделения нерастворимых компонентов смеси фильтрованием через мембранный фильтрат, содержащий растворимый комплекс, наносили на фильтры и высушивали. Готовые фильтры хранили в сухом виде при 2—S . В этих условиях они были устойчивы по крайей мере в течение года. Аналогичный процесс оптимизации осуществляли с антителами к дигоксину и тироксину. [c.304]

Вероятно, вирус-сателлит сам кодирует свой собственный струх тур-ный белок, так как серологически он ие родствен ВНТ. В растениях, зараженных ВНТ, не удалось обнаружить антигены, которые были бы серологически родственны ВС [1413], однако результаты опытов нельзя считать окончательными, так как свободные белковые субъединицы могут и не реагировать с антисывороткой, специфичной в отношении интактного вируса. Более веским доводом в пользу предположения, что ВС кодирует специфический структурный белок, служит отсутствие серологической связи меяеду ВС ж ВНТ, как отмечалось выше, хотя ВНТ и способствует репликации вируса-сателлита. Кларк и др. [376] поставили эксперименты, в которых использовали РНК ВС в качестве матрицы для белкового синтеза в бесклеточной системе из Е. oli. Анализ пептидов триптического гидролизата продуктов синтеза in vitro показал, что при этом образуется материал, сходный со структурным белком ВС. [c.198]

Антисыворотки, специфичные в оиютепии вирусов растений, можн о получить путем иммунизации самых разнообразных животных — птиц, лго])ских свинок, лошадей, кроликов и мышей. Чаще всего используют кроликов, так как опи активно реагируют па антигены вирусов растепий образованием вх юокнх титров антител. Лошадей иммунизируют в тех случаях, когда ][еобходимы особенно большие количества сыворотки, а мышей — в тех опытах, которые ставят во многих повторностях. [c.361]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология