Анализы нуклеотидов

Анализ нуклеотидов на ионообменниках методом ХТС превосходит все применяемые до настоящего времени аналитические методы разделения. В особенности следует отметить значительную экономию времени при применении этого нового метода. Высокая емкость обменного слоя позволяет осуи ествить также микропрепаративное разделение. [c.450]

Рис. 7.6. Анализ нуклеотидов на жидкостном хроматографе с двумя параллельными детекторами.

Для определения нуклеотидной последовательности в олигонуклеотидах их гидролизовали нуклеазами, как это будет описано далее, и затем идентифицировали нродукты гидролиза. Для анализа нуклеотидов, полученных нри гидролизе РНК рибонуклеазой Ti, наиболее пригодна панкреатическая РНК-аза, и, наоборот, если РН1 гидролизовали панкреатической РНК-азой, для анализа полученных нуклеотидов использовали рибонуклеазу Ть В обоих случаях конечные продукты гидролиза одинаковы они содержат мононуклеотиды Г, Ц и У и олигонуклеотиды с разным числом остатков А, имеющие на З -конце Г, Ц, или У. Большинство этих продуктов можно разделить с помощью электрофореза нри pH 3,5 (фиг. 3). [c.64]

Разделение и анализ нуклеотидов [c.214]

Применение ионообменной хроматографии для анализа смесей нуклеотидов явилось логическим развитием этой техники разделения неорганических ионов. Хронологически катионообменная хроматография была изучена раньше анионообменной, однако последний метод дает наилучшие результаты по разделению фосфорных эфиров [3]. Адсорбция смеси фосфатов на анионообменной смоле с последующей элюцией их возрастающей концентрацией Кислоты или соли является стандартным приемом для выделения и анализа нуклеотидов. Позднее были применены ионообменные целлюлозы и декстраны, преимущества которых заключаются в [c.132]

Моно- и дифосфаты являются кислыми соединениями, и их кислотная природа предопределяет использование ионообменной хроматографии для их выделения и разделения. Адсорбция смеси фосфатов на аниообменной смоле с последующей элюцией их возрастающей концентрацией кислоты или соли является стандартным приёмом для выделения и анализа нуклеотидов, Особенно удобны ддя этих целей модифицированные целлюлозы и декстраны, обеспечивающие наибольшую селективность. Нуклеотиды обладают сильным поглощением в ультрафиолетовой части спектра за счёт гетероциклических соединений, благодаря чему могут быть легко обнаружены в элюате и количественно оценены. [c.114]

Рандерат первым описал анализ методом ХТС нуклеиновых оснований, нуклеозидов и мононуклеотидов [68—71], а также анализ нуклеотид-полифосфатов и нуклеотид-коферментов [71—73]. По эффективности разделения ХТС на целлюлозе и силикагеле Г превосходит хроматографию на бумаге [69, 70]. При получении хроматограммы на слое целлюлозы и хроматограммы на бумаге при совершенно одинаковых условиях пятна на тонком целлюлозном порошке получаются меньше и более резко очерченными, чем на волокнистой бумаге [71]. Кроме того, для разделения производных нуклеиновых кислот методом ХТС затрачивается меньше времени, чем для разделения методом хроматографии на бумаге [70—72]. [c.442]

Для разделения сложных смесей, содержащих вещества разных классов (основания, нуклеозиды, нуклеотиды и их поли-фосфаты, олигонуклеотиды, включая олигонуклеотиды, различающиеся порядком основании, и т. п.), с которыми имеют дело, например, при выделении кислоторастворнмой части клеток или тканей или при анализе ферментативных гидролизатов нуклеиновых кислот, применяют исключительно ионообменную хроматографию. В случае необходимости дальнейшее фракционирование проводят по многостадийной схеме, с использованием указанных выше методик. При этом наблюдаются те же закономерности, что и при анализе нуклеотидов (см. предыдущий раздел), поэтому в дальнейшем будет приведено лишь несколько примеров. [c.58]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология