Ступенчатая деградация пептидов

Важнейший химический метод ступенчатой деградации пептидов с N-конца — фенилтиогидантоиновый метод (деградация по Эдману) [100]. [c.369]

При ступенчатой деградации пептидов для расшифровки последовательности достаточно определить аминокислотный состав пептида, остающегося после каждого очередного отщепления. Предположим, пептид имеет состав А, В, С, О, Е. Если мы после каждой ступени ФТЦ-деградации проведем определение состава укороченного пептида, то получим следующие результаты [c.285]

Указанные защитные группы вводят в аминокислоты или в эфиры аминокислот общепринятыми методами с помощью соответствующих хлорангидридов. Эти блокирующие группировки были использованы в синтезе ряда пептидов с помощью азид-ного метода и через смешанные ангидриды. Защитные группировки удаляли после гидролиза сложноэфирных связей. При использовании оптически активных аминокислот рацемизации не наблюдалось. Рассмотренную реакцию расщепления можно также применить для ступенчатой деградации пептидов [1051]. [c.49]

Ступенчатая деградация пептидов [c.169]

АНАЛИЗ КОНЦЕВЫХ ГРУПП И СТУПЕНЧАТАЯ ДЕГРАДАЦИЯ БЕЛКОВ И ПЕПТИДОВ [c.265]

Ступенчатая деградация белков и пептидов 267 [c.267]

Для определения Ы-концевой аминокислоты пользуются лейцинами-нопептидазой, выделяемой из слизистой оболочки кишечника. Лейцин-аминопептидаза расщепляет экзопептидную связь, образованную аминокислотным остатком, содержащим свободную аминогруппу. При этом происходит ступенчатая деградация пептида. [c.512]

Аминопропилтриалкоксисилан — пористое стекло ступенчатая деградация пептиды 10, 268 2-Аминотиазол синтез [c.212]

Теоретически этот процесс можно проводить многократно до полного определения последовательности аминокислот. Однако многократное отщепление концевых аминокислотных остатков приводит к усиливающемуся повреждению оставшейся пептидной цепи, и обычно можно отделять максимум шесть или семь остатков. Для определения последовательности аминокислот необходим метод идентификации фенилтиогидантоинов, получаемых в результате ступенчатой деградации пептидов. Идентификация и определение фенилтиогидантоинов иногда трудно осуществимы, и следует использовать метод отщепления , примененный, например, при определении структуры рибонуклеазы. После удаления Ы-концевой аминокислоты в виде фенилтиогидантоина оставшийся пептид гидролизуют и анализируют. Последовательность аминокислот в этом пептиде определяют по аминокислотным остаткам, сохраняющимся в нем после каждого отщепления N-кoнцeвoй аминокислоты. [c.31]

Превращение N-концевого аминокислотного остатка в тиогидантоин приводит к укорочению анализируемой полипептидной цепи на одно звено. Выделив этот пептид, исследователь получает возможность повторить всю процедуру, установить природу второго аминокислотного остатка и выделить полипептид, укороченный на два звена. Многократное повторение такой ступенчатой деградаций дает возможность последовательно идентифицировать все составляющие исходный полипептид остатки аминокислот, т.е. установить его первичную структуру. Практически в ручном варианте метод Эдмана позволяет сделать один-два десятка шагов. Работа сводится к многократному повторению одних и тех же чередую-пщхся процедур добавления изотиоцианата, отщепления тиогидантоина, отделения его от укороченного пептида для последующей идентификации, выделение оставшегося полипептида в виде, пригодном длЯ следующего шага обработки. Чтобы избавить исследователей от такой монотонной работы, требующей вместе с тем строгого соблюдения условий эксперимента на каждом шаге, созданы специальные автоматизированные установки для проведения всех перечисленных операций — автоматические секвенатори полипептидов. С их помсоцью удается провести до 40 — 60 шагов ступенчатой деградации. [c.271]

Оставшийся пептид можно еще раз обработать фенилизотиоцианатом, отщепить и идентифицировать вторую аминокислоту, затем третью и т. д. Поэтому метод иногда называют ступенчатая деградация по Эдману . [c.74]

Альтернативным путем для установления последовательности коротких пептидов является деградация по Эдману на твердой фазе. По аналогии со способом Меррифилда деградируемый пептид связывается ковалентно с полимерным носителем и ступенчато расщепляется с К-конца. Принципиальная применимость этого метода доказана во многих лабораториях. В качестве носителя чаще всего используют устойчивый к трифторуксусной кислоте аминоалкилполистирол. Присоединение секвенируемого пептида более предпочтительно через амидную связь. [c.371]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология