Выделение митохондрий из ткани печени

Работа 36. Выделение митохондрий из ткани печени [c.137]

Свежую ткань печени быка сохраняют в замороженном состоянии при —20 С, в течение 3—4 нед она может быть использована для выделения митохондрий. [c.27]

Выбор ткани для фракционирования определяется конкрет-ньши условиями эксперимента и объектом исследования. Ткани и клетки различных органов различаются по составу, хрупкости и плотности,- что в свою очередь определяет выбор того или иного метода выделения. Печень, например, является идеальным объектом для изучения функционирования митохондрий, поскольку именно 2 [c.35]

В клетках печени митохондрии содержатся в особенно больших количествах. Ткань тимуса (зобной железы) чаще других тканей используется для выделения ядер, так как ядра тимоцитов составляют до 50% клеточной массы. [c.36]

В митохондриях некоторых тканей (печени, почки и др.) была обнаружена еще одна НАДН-оксидазная система, которая локализована в наружной мембране и, по-видимому, легко доступна для цитоплазматического НАДН. Этот так называемый внешний, нефосфорилирую-щий путь окисления НАДН включает в себя специфический флавопротеид — НАДН цитохром os-оксидоредуктазу и цитохром O5. Цитохром 5 является слегка аутоксидабельным гемопротеидом, а физиологическим акцептором электронов с цитохрома O5, по-видимому, служит цитохром с. В экспериментальных условиях активность этого пути окисления НАДН может быть измерена только после добавления цитохро-ма с, значительная часть которого вымывается из межмембранного пространства в процессе выделения митохондрий. В отличие от НАДН-оксидазной активности дыхательной цепи митохондрий внешний путь окисления НАДН нечувствителен к ротенону. [c.437]

Особую группу составляют липопротеины, входящие в состав клеточных мембран и структурных элементов цитоплазмы (митохондрий и микросом). Самый факт наличия липидов в этих элементах клеток известен уже давно, однако до сих пор мы почти ничего не знаем о характере их связей. В отличие от липидов жировой ткани, липиды, входящие в состав клеточных мембран и структурных элементов цитоплазмы, не окрашиваются ни суда-ном, ни шарлаховым алым, ни нильским синим. Поэтому их часто называют замаскированными липидами . Отсутствие у названных липидов способности соединяться с липофильными красками является веским доказательством в пользу того, что они связаны с белками. Митохондрии клеток печени содержат 15—20% липидов [17]. Субмикроскопические частицы (микросомы), выделенные из печени или поджелудочной железы путем центрифугирования при высоких скоростях, содержат до 40—50% липидов, связанных с нуклеопротеидами [18] (см. также стр. 260). [c.230]

Курри и др. [159—161] применяли эту же смесь также для выделения фосфолипидов непосредственно из тканей, минуя промежуточную стадию экстракции. Для этого срезы тканей наносили на покровные стеклышки микроскопа, которые в свою очередь закрепляли на хроматографических пластинках с помощью гуммиарабика или сыворотки Апати. Пластинки с закрепленным образцом покрывали силикагелем G и сушили в эксикаторе. Подобным же образом наносили в виде суспензии на стеклянную бумагу митохондрии крысиной печени, предварительно тщательно промытые в растворе сахарозы. Нанесенное пятно затем вырезали и закрепляли с помощью капли элюирующего растворителя на предварительно приготовленной пластинке с силикагелем. Разделение фосфолипидов при этом было такое же, как и разделение их экстракта. [c.88]

В ряде работ отмечалось, что 2,4-Д и 2,4,5-Т энергично вмешиваются в фосфорный обмен растений, вследствие чего содержание неорганического фосфора повышается параллельно снижению содержания органических фосфорных соединений [2—4]. Неоднократно наблюдалось ослабление зависящего от АТФ ио-ступления ионов в растения, обработанные 2,4-Д [5, 6]. В 1952 г. Броди [7] на митохондриях из печени крысы показал, что 2,4-Д способна разобщать окисление пирувата и сопряженное с ним фосфорилирование. Впоследствии, когда были освоены методы выделения митохондрий из растительных тканей, разобщающая активность галопдфеноксикислот была продемонстрировапа п на этих объектах [8—11]. Более того, в опытах Веддинга и Блэка [12] под влиянием 2,4-Д у хлореллы наблюдалось заметное ослабление включения в АТФ. Недавно выяснено, что [c.170]

Выделенные мягкими способами митохондриальные фракции из ряда тканей, в частности из печени, в определенных условиях сохраняют способность к окислительному фосфорилированию. Способность к синтезу АТФ можно легко ликвидировать, так как она зависит от целостности липопротеидного матрикса митохондрий, при этом поврежденная митохондрия может сохранять способность к окислению. Разобщение можно вызвать механическими повреждениями, другими физическими способами и химическими агентами. [c.375]

В мембранах эндоплазматического ретикулума практически всех клеток локализована система монооксигеназного окисления, обладающая смешанными функциями и низкой специфичностью. Эта система была впервые обнаружена в 1950 г. в клетках печени, где она наиболее интенсивно развита, а ее основной компонент, цитохром Р-450 (цит. Р-450), названный так за характерный спектр поглощения восстановленного комплекса с СО в области 450 нм, был выделен и изучен в середине 70-х годов. В клетках некоторых тканей (например, кора надпочечников) монооксиге-назная система локализована в мембранах митохондрий. [c.133]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология