Прямые исследования структуры гена

Прямые исследования структуры гена [c.43]

Основная проблема молекулярной биологии на сегодняшний день состоит в том, чтобы разобраться в тонких механизмах клеточных процессов. Мы обсудили несколько чувствительных методов очистки, анализа белков и слежения за ними в клетках. Этот последний раздел посвящен методам изучения структуры и функции клеточных ДНК. Классический подход подразумевает использование генетических методов, позволяющих судить о функции генов, анализируя фенотипы мутантных организмов и их потомства. Этот подход по-прежнему эффективен, но в последнее время он дополнен набором методов, которые в сумме известны как технология рекомбинантных ДНК . Эти методы существенно расширили возможности генетических исследований, поскольку с их помощью удается проводить как прямой контроль, так и детальный химический анализ генетического материала. Используя методологию рекомбинантных ДНК, удается даже минорные клеточные белки получать в больших количествах и, следовательно, проводить тонкие биохимические исследования структуры и функции белка. [c.228]

Располагая определением связи начала соответствия для нуклеотид-аналогов с индукционным комплексом, можно более четко указать на особенности ограниченных измерений аналогов по сравнению с основными мутагенами. Во-первых, основные мутагены прямо измеряют главное и актуальное для исследования генное состояние, а нуклеотид-аналоги дополнительно освещают генное созидание. Во-вторых, жесткие мутагены измеряют заданные всем разнообразием генетических структур сечения взаимодействия, [c.57]

Сообщалось также о многих сложных локусах либо с общим количественным, либо с качественным видовым эффектом, например, у джута [85], риса [86] и у oleus [87]. Существование таких локусов делает возможным расширенные генетические исследования, которые могут осветить вопросы структуры генов или их функциональной организации. Но что столь же важно, эти локусы определяют фенотипическое выражение, которое частично может быть описано в биохимических терминах. Генетический контроль синтеза флавоноида может быть первичным, т. е. осуществляться посредством ферментов, которые непосредственно катализируют специфическую стадию в синтезе флавоноидов. Однако генетический контроль синтеза флавоноидов может быть и косвенным, т. е. через механизмы, аналогичные тем, которые, как можно предсказать априори, способны модифицировать проявления прямых факторов. Поэтому широкие биохимические исследования синтеза антоциана приведут, вероятно, к рассмотрению более фундаментальных проблем, чем просто определение точного биосинтетического пути специфичного антоциана, хотя и этот вопрос, очевидно, представляет значительный интерес. [c.163]

Необычайно важную роль в исследовании ядрышка сыграло прямое наблюдение неупорядоченной центральной зоны ядрышек при помощи электронного микроскопа [59, 86]. На ДНК-цепях пре-РНК-генов удалось увидеть образующиеся нити РНК, покрытые белком, (рис. 15-7). С одного гена одновременно транскрибируется приблизительно 80—100 РНК-цепей разной длины. Общая длина гена, согласно электронно-микроскопическим данным, составляет 2,3 мкм, что лишь ненамного меньше рассчитанной длины полностью вытянутой молекулы ДНК (в В-форме). Однако, судя по длине образующихся транскриптов, цепи пре-рРНК многократно сложены с образованием компактной структуры. [c.227]

Когда клетки растения трансформированы векторами для прямого переноса генов посредством ДНК, сайты встраивания плазмиды, ВОЗМОЖНО, случайны. Таким образом, перенесенная ДНК может представлять собой целую плазмиду или ее части, которые соединены вместе в виде конкатемеров илн встраиваются независимо друг от друга в разные сайты генома. В таком случае следует вначале убедиться в наличии интактных рестрикционных фрагментов, которые содержат изучаемый ген целиком. Дальнейшее исследование может вызвать затруднения. Есть данные, что в некоторых опытах использование линеаризованных векторов для переноса генов посредством ДНК приводит к повышению частоты трансформации. По-видимому, при этом легче образуются конкатемерные структуры, рекомбинация проходит по сайтам, не нарушающим экспрессию большинства копий изучаемого гена (рис. 6.3,Г). В этом случае предсказанные составные фрагменты могут быть выявлены методом блоттинг-гибридизации по Саузерну. [c.317]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология