Температура см также функцию генов

Этими авторами выделены также мутанты с блокированными на разных стадиях процессами образования почек и клеточного деления. Нутем переноса в разные сроки культур мутантов из условий инкубации при 23° в условия 36° и нараллельного микрофотографирования клеток определены термочувствительные точки в цикле клеточного деления различных мутантов. Поскольку развитие культур различных мутантов заканчивается при картинах различной морфологии клеток, введены специальные параметры — точка выполнения и точка окончания , которые характеризуются морфологией клеток к моменту переноса клеток в условия повышенной температуры и к моменту окончания функции. Показано при этом, что у 15 из 100 термочувствительных, или ts-му-тантов, блокирование клеточного деления приходилось на одну и ту же стадию клеточного цикла, но контролировалось тремя разными генами. Точка выполнения у всех трех генов приходится на раннюю стадию митотического цикла, примерно на момент закладки почки, а точки окончания были различными. У одного из мутантов точка выполнения и точка окончания совпадали, и клетки гибли вскоре после формирования мелкой почки. Другая мутация блокировала митоа, а третья — отделегше дочерней клетки от материнской. В этом последнем случае, следовательно, наблюдается нормальная закладка почек, синтез ДНК и деление ядер, а точка окончания отсутствует (Hartwell et al., [c.18]

За 15 лет, прошедших с тех пор, как впервые удалось выделить мутантные фаги ruh, было идентифицировано много других мутантов Т-четных фагов. С помощью этого набора мутантов оказалось возможным настолько повысить разрешающую способность генетического анализа, что в конце концов удалось заполнить разрыв между химией ДНК и структурой гена (гл. XIII). Тем не менее стало ясно, что все эти мутации затрагивают только относительно малую часть всего генома фага. Причина этого совершенно очевидна большинство генов фага, несомненно, кодируют белки, осуществляющие жизненно важные функции, так что мутации по этим генам неизбежно должны быть летальными. Несмотря на очевидность этого обстоятельства, долгое время никому не приходило в голову применить к Т-четным фагам остроумный метод, разработанный Горовицем и Лейпольдом для нолучения мутантов по жизненно важным генам Е. oli. Этот метод состоит в отборе чувствительных к температуре мутантов (см. гл. V). Наконец, в 1960 г. Эдгар и Эпштейн выделили /s-мутанты фага Т4, которые совершенно не образуют стерильных пятен при 42 °С, но образуют их при 25 °С. В то же время штамм дикого типа T4/s образует стерильные пятна при обеих температурах одинаково хорошо. Изучение физиологии размножения /х-мутантов при повышенной, запрещающей температуре показало, что у разных мутантов блокированы разные стадии развития фага. Так, у /s-мутантов одного класса при запрещающей температуре репликация фаговой ДНК не может начаться вследствие того, что при 42 °С у них не могут функционировать те или иные ранние ферменты, участвующие в метаболизме нуклеотидов — предшественников ДНК у /s-мутантов другого класса при запрещающей температуре синтез ДНК начинается, блокируются же более поздние стадии. Возникают, например, мутации в гене, кодирующем фаговый лизоцим. Бактерии, зараженные такими мутантами, не лизируют при 42 °С, хотя и содержат инфекционные частицы потомства фага. Были также найдены мутации во многих генах, кодирующих структурные компоненты фага в бактериях, зараженных любым из таких мутантов, при 42 °С не происходит сборки целых частиц зрелого фага. В этом случае лизаты содержат различные типы недостроенных компонентов фага. Если мутация затрагивает ген, кодирующий белок головки фага, лизат, полученный при высокой температуре, содержит целые фаговые отростки, но не содержит головок. Когда мутация затрагивает ген, кодирующий фибриллы отростка, у почти завершенных фаговых частиц имеется головка и присоединенный к ней отросток, но отсутствуют фибриллы, необходимые для присоединения к клетке-хозяину. [c.283]

Чтобы изучить процесс репликации альфавирусной РНК, проведены многочисленные исследования с использованием температурочувствительных мутантов по синтезу вирусных РНК. На основе данных генетического комплементационного анализа и исследования различных видов РНК, выделенных из клеток, зараженных этими мутантами, постулировано наличие четырех различных функций [84, 85]. Комплементационные группы А и G связываются с синтезом плюс-цепей 49S- и 26S-PHK. Однако мутанты группы А также дефектны по нормальному отключению синтеза минус-цепей 49S-PHK [70], и, кроме того, в них накапливается неструктурный полипротеин с мол. массой 200К [10]. Мутанты комплементационных групп В и F прекращают образование минус-цепей 49S-PHK при переносе в условия с непермиссивной температурой. У мутантов группы F синтез плюс-цепей 49S- и 26S-PHK также останавливается предполагают, что белок, дефектный у этих мутантов, имеет полимеразную активность (участвующую в элонгации). Функция, дефектная у мутантов группы В, связана с синтезом минус-, но не плюс-целей РНК, и соответствующий генный продукт лабилен [69]. [c.352]

Предполагают, что белки теплового шока помогают переводить в раствор и вновь сворачивать денатурированные или неправильно свернутые белки. Есть у них и другие функции (см. разд. 8.4.4. и 8.6.7). Например, белки из семейства 90 кДа, как было показано, связываются с неактивными формами белков - рецепторов стероидных гормонов и с тирозин-специфическими протеинкиназами, вероятно, таким образом участвуя в регуляции функций этих рецепторов. Лучше всего изучены белки семейства 70 кДа (hsp 70). Эти белки связываются с некоторыми другими белками, а также аномальными белковыми комплексами и афегатами, от которых потом освобождаются, присоединяя АТР. Было доказано, что они помогают переводить в раствор и заново сворачивать афегированные или неправильно свернутые белки путем нескольких циклов присоединения и гидролиза АТР. Аномальные белки имеются в любой клетке, но при некоторых воздействиях, например при тепловом шоке, их количество в клетке резко возрастает, и соответственно возникает необходимость в большем количестве белков теплового шока. Оно обеспечивается активацией транскрипции определенных генов. В клетках дрожжей S. erevisiae, напримф, имеется восемь hsp 70-генов некоторые из них транскрибируются при любых условиях, а остальные - только под действием высоких температур или других экстремальных факторов. [c.23]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология