Процедура замораживания

Митохондрии сердца и печени крысы получают в соответствии с описанием на с. 405, 406 и хранят на льду. Отбирают часть полученной суспензии (около половины) в отдельную полиэтиленовую пробирку, быстро замораживают препарат жидким азотом или сухим льдом и вновь размораживают, нагревая до 0° С. Процедуру замораживания-оттаивания, при которой происходит разрушение митохондрий, повторяют еще дважды. Размороженный препарат митохондрий суспендируют пипеткой и хранят на льду. [c.437]

Последующая адсорбция паров HjO или NHg проводилась из специальных боковых отростков, в которые помещались эти соединения после предварительной дегазации путем многократно повторяющейся процедуры замораживание—оттаивание в вакууме. Они поступали к адсорбентам после разбивания тонкой стеклянной перегородки. [c.215]

Выявление этих факторов привело к упрощению процедуры замораживания и оттаивания эмбрионов крупного рогатого скота. В частности, оттаивают эмбрионы, как и сперму, в теплой воде при 35 С в течение 20 с непосредственно перед пересадкой без применения специального оборудования с заданной скоростью повышения температуры. [c.207]

Родительские миеломные клетки и сами гибридомные клетки могут храниться в жидком азоте в течение длительного времени (в течение 10 лет определенно). Процедура замораживания проста, но ее следует опробовать на родительских клетках до слияния. При замораживании используют специальную смесь. Поскольку смеси, пригодные для клеток других типов, в случае гибридом не работают, остановимся на следующем методе. [c.194]

Для лучшей десорбции микроорганизмов с почвенных частиц рекомендуется использовать метод замораживания-оттаивания почвы. Суть метода состоит в следующем. Отобранный для вьщеления стрептомицетов образец почвы помещают в испаритель бытового холодильника при температуре -8 °С. Через час образец извлекают из холодильника и вьщерживают при комнатной температуре до полного оттаивания. Процедуру замораживания-оттаивания повторяют дважды. Затем навеску почвы помещают в стерильную водопроводную воду, взбалтывают суспензию в течение 15 мин на круговой качалке при 230 об/мин, после чего различные разведения суспензии высевают на питательную агаровую пластинку в чашках Петри. [c.132]

Процедура замораживания—высушивания проб тканей включает в себя следующие этапы [c.19]

Процедура замораживания 1) за 24 ч сменить среду добавить [c.203]

Предварительными опытами было показано, что для освобождения из клеток вируса, связанного с ними, может быть применено однократное замораживание и оттаивание или воздействие в течение 30 минут ультразвуком (20 кгц). В основных опытах был использован первый метод, так как процедура замораживания и оттаивания не влияла на число активных вирусных частиц. [c.121]

Эффективность действия детергента в отношении максимально полного выявления активности аспартатаминотрансферазы митохондрий сопоставляют с деструктивным действием на мембраны процедуры замораживания-оттаивания. С этой целью суспензию нативных митохондрий замораживают при температуре —20°С с последующим размораживанием при комнатной температуре. [c.353]

Особое внимание уделялось достижению полноты дегазации образца. Процесс дегазации проводился многократными процедурами замораживание — размораживание — перегонка следующим образом. Подвижное колено 3 с веществом присоединялось к прибору на щлифе 4, вещество замораживалось в объеме 5, прибор вакуумировался (позиции И и П1), затем объем / помещался в хладоагент и вещество перегонялось в этот объем (позиция I). Потом откачивали объем 1, манометрическую трубку и объем 3 (с помощью позиций II и III), чтобы [c.72]

М фосфатный буфер, pH 6.8—7.4, а также 0.001—0.002 М ЭДТА. Концентрацию клеток в суспензии можно варьировать в пределах 5 10 —5 Ю клеток в 1 мл буферного раствора. Разрушение клеток достигается 3-кратным замораживанием—оттаиванием, пропусканием через шприц или введением в пробу за полчаса до нанесения на гель неионного детергента, Тритона Х-100, в концентрации до 1.0% [5]. Процедура замораживания—оттаивания может привести к частичной дезактивации ферментов, однако ЛДГ и Г6ФДГ выдерживают такую обработку, и их пробы могут храниться не менее года при —70 °С [6]. Экстракция детергентом значительно повышает [c.98]

Клетки (5 10 —10 10 ) после промывания в фосфатно-солевом буфере суспензируются в 0.3—0.5 мл 0.01 М Трис-НС1, pH 7.5. После трехкратной процедуры замораживания в жидком азоте с последующим оттаиванием и центрифугирования в пробу добавляется сахароза (хч) до концентрации 10 %. Состав геля 5 %-ный (для ЛДГ) или 7 %-ный (для Г6ФДГ) акриламид ( Serva ), [c.102]

Рис. 6-29. Схема, показывающая, что может произойти с молекулами гликофорина и белка полосы 3 в мембранах эритроцитов человека во время процедуры замораживания - скалывания При расщеплении липидного бислояиз замороженного монослоя выдергивается либо внутренняя, либо внешняя половина транс мембранного белка. Преимущественно белки остаются на той половине, с которой ассоциирована более крупная часть белковой молекулы. Поэтому молекулы белка полосы 3 обьнно остаются на внутренней (Р) поверхности скола. Поскольку при этом над поверхностью скола экспонирована достаточно большая часть белка, они видны на микрофотографиях в виде внутримембранных частиц. Молекулы гликофорина обычно остаются на внешней (Е) поверхности скола, но их экспонированных цитоплазматических хвостов не хватает для

Справочник химика 21

Химия и химическая технология