Применение фазово-контрастной микроскопии

Сравнительная оценка модификации с применением фазово-контрастной микроскопии и метода А. С. Разумова при определении общего числа микроорганизмов в одних и тех же пробах воды Горьковского водохранилища показала довольно близкие результаты. Однако общее число бактерий, определяемое методом фазовоконтрастной микроскопии, выше (в среднем на 15%), чем полученное прямым счетом с окрашиванием. [c.85]

Применение фазово-контрастной микроскопии [c.45]

Применение. В фазово-контрастной микроскопии для наклеивания срезов по методу Белла [1]. [c.297]

Одно из преимуществ фазово-контрастной микроскопии перед темнопольной, которая применяется в настоящее время реже, заключается в полном использовании апертуры объектива, что влечет за собой необходимость применения самых высококачественных фазово-контрастных объективов. Это в свою очередь предполагает использование конденсора с достаточно большой апертурой и, так же как и раньше, применение компенсационных окуляров с увеличением 15х или даже 20X, способных реализовать то высокое разрешение, которое дают объективы. Вполне доступны фазово-контрастные иммерсионные объективы средней силы (40Х—бОХ), которые дают хорошо очерченные полноценные изображения при работе с мицелием грибов и другими большими клетками. Наилучшие результаты получают, применяя объективы с увеличением 90Х и ЮОХ и числовой апертурой больше 1,0, используя иммерсию. Однако удовлетворительные результаты фазово-контрастная микроскопия дает и без применения иммерсии, например при подсчете бактерий, простейших и спор, проверке подвижности или при определении размера и формы. В том случае, когда хотят увидеть детальную внутриклеточную организацию живых организмов, следует обратить внимание на преломляющие свойства среды, в которой рассматриваются клетки наилучших результатов достигают при добавлении в среду желатины до 15—30%. При этом показатели преломления среды и внутриклеточного содержимого становятся одинаковыми или почти одинаковыми, а фазовая задержка пропорциональна показателю преломления, умноженному на световой путь. В этих условиях уменьшаются также ореолы. [c.23]

Объект можно сделать более контрастным, либо почти до предела закрывая диафрагму конденсора, либо окрашивая клетки, либо применяя фазово-контрастное устройство. Первое нежелательно, так как снижает апертуру конденсора и тем самым заметно уменьшает разрешающую способность микроскопа. Окрашивание препарата дает хорошие результаты, но в большинстве случаев оно осуществляется после фиксации микроорганизмов, что не всегда желательно. Основная ценность метода фазового контраста состоит в том, что он дает возможность наблюдать живые объекты, не прибегая к их фиксации и окрашиванию. Применение фазово-контрастного устройства не позволяет увеличить разрешающую способность микроскопа, но дает возможность увидеть прозрачные объекты более четко и даже выявить некоторые структуры и включения в клетках крупных бактерий. [c.91]

Вакуоли с клеточным соком становятся более заметными благодаря прижизненной окраске слабым раствором нейтрального красного. Пульсирующие вакуоли можно наблюдать на живом материале в световом микроскопе благодаря их периодическому наполнению и опорожнению. Применение фазово-контрастного устрой [c.23]

Прекрасная современная книга, в которой освещена теория и практика с упором на последнюю. В ней даются советы по специальным и усовершенствованным методикам и их применению, включая фазово-контрастную, интерференционную, темнопольную, поляризационную и люминесцентную микроскопию, [c.44]

Широкое применение нашли фазово-контрастные устройства, выполненные по схеме позитивного контраста. Наиболее распространенной моделью является КФ-4 (рис. 51). Фазово-контрастное устройство представляет собой приставку к микроскопу, состоящую из вспомогательного окуляра, специальных фазовых объективов и конденсора с набором кольцевых диафрагм, каждая из которых соответствует фазовой пластинке определенного объектива. Кольцевые диафрагмы установлены в револьверном диске под конденсором и поворотом диска могут легко меняться, причем в окне крышки диска появляется цифра, соответствующая увеличению применяемого объектива. Кроме того, в револьверном диске имеется свободное отверстие — нулевая диафрагма — для наблюдений обычным способом. Конденсор снабжен двумя винтами для центрировки кольцевой диафрагмы относительно фазового кольца объектива. Все фазовые объективы имеют на оправе обозначение ф . Им и можно пользоваться и при обычной микроскопии, но из-за наличия фазового кольца они дают изображение пониженного качества. [c.93]

Модификация метода прямого подсчета с применением фазово-контрастной микроскопии. А. Г. Кокина (1956), А. С. Разумов, Л. Е, Корш (I962), Ri hards, КгаЬек (1954) использовали фазово-контрастную микроскопию для подсчета общего числа бактерий, предварительно сконцентрированных на мембранном фильтре. После высушивания мембранного фильтра (без окрашивания) готовят препарат и просчитывают бактерии под микроскопом с помощью фазово-контрастного устройства. При подсчете бактерий используют зеленый светофильтр, благодаря которому получается поле зрения спокойного зеленого цвета. Бактерии на зеленом поле выглядят довольно контрастно, как черные точки или палочки различных размеров. [c.85]

Беннет и сотр. [15] составили обзор, посвященный технологическому применению фазово-контрастного микроскопа к ряду материалов. Так, например, прозрачные пластики можно исследовать на неоднородность и на содержание примесей. В листовых материалах этим методом удается идентифицировать волокна и другие наполнители. Покрытия можно изучать в виде поперечных срезов или тонких пленок. Для исследования поверх-1Юстей применяют метод отпечатков некоторые поверхности, обладающие достаточно высокой отражательной способностью, можно изучать с помощью фазово-контрастного вертикального освещения. Метод фазового контраста позволяет определять характеристики бумажных волокон, отсутствие в них лигнина и других примесей. Реймут [200] указал ряд применений этого метода в текстильной промышленности. К их числу относятся наблюдения за бактериальным и ферментативным разложением шерсти, исследования деталей поперечных срезов шерсти, бактерий и плесени в волокнах, частиц, включенных в волокна, и изломов волокон, возникающих при стирке и глажении ткани. Ройер и Мареш [209] сообщили о результатах исследования поперечных срезов искусственного волокна и тонких пленок на тканях, целлюлозных волокнах и коже. Можно также изучать животные волокна со слабой пигментацией. С пигментированных волокон можно снять отпечатки [90, 264]. Фазово-контрастная оптика позволяет хорошо 5азличать структуру набухших волокон [49]. [c.247]

Максимальное увеличение микроскопов, как иравило, не превышает в видимом обычном свете 1200Х, а в поляризованном — 700 X. Большие увеличения м. б. достигнуты при применении тонкодисперсных объектов и имлгерсиопных объективов. Др. возможность (см. выше ф-лу) заключается в уменьшении поэтому ультрафиолетовые микроскопы (требующие, однако, специальной системы регистрации) имеют существенно повышенное полезное увеличение. Третий — косвенный способ заключается в новытпенип контрастности изображения (фазовый контраст, темнопольная микроскопия и др.). [c.241]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология