Методы определения общего числа микроорганизмов

Принципиальное отличие методов определения общего числа микроорганизмов от методов определения сапрофитов в воде заключается в отсутствии этапа подращивания, с чем связана их экспрессность и, что особенно важно, возможность разработки на их основе приборов для быстрого объективного и автоматического учета общей бактериальной загрязненности воды. [c.78]

Сравнительная оценка модификации с применением фазово-контрастной микроскопии и метода А. С. Разумова при определении общего числа микроорганизмов в одних и тех же пробах воды Горьковского водохранилища показала довольно близкие результаты. Однако общее число бактерий, определяемое методом фазовоконтрастной микроскопии, выше (в среднем на 15%), чем полученное прямым счетом с окрашиванием. [c.85]

Вследствие неизбежной задержки получения результатов из-за длительного времени инкубации в традиционных тест-методах, контроль чаще всего основывается на ретроспективной проверке. Поэтому повторение теста в идентичных условиях становится невозможным. Результаты каждого теста необходимо рассматривать в контексте с результатами предьщущих и последующих исследований. Здесь важно выявить тенденции в изменении микробного загрязнения окружающей среды, которые могут заключаться в постепенном повышении или снижении общего числа микроорганизмов, или изменении качественного состава микрофлоры в течение определенного периода времени. Чтобы проследить тенденции микробной контаминации, можно использовать процедуры составления диаграмм или графиков. Интерпретация значимости отклонений в результатах тестов должна основываться на заключении квалифицированного специалиста [20]. [c.769]

Эти приемы упрощают и ускоряют исследование, однако анализ занимает самое меньшее 6 ч. Гораздо большие возможности сокращения времени анализа воды заложены в методах, в которых вообще исключено подращивание бактерий. Прямой микроскопический подсчет общего числа микроорганизмов может быть выполнен за несколько минут (А, С. Разумов, 1932 А. С. Разумов, Л. Е. Корш, 1962 Т. 3. Артемова, Л. Е. Корш, 1974). Принципиально возможно и прямое специфическое определение групп микроорганизмов с помощью, например, иммунофлуоресценции. Прямые методы позволяют создать приборы и автоматы для быстрого объективного учета общего микробного загрязнения воды. [c.71]

Количественная оценка роста микроорганизмов требует определения числа клеток в конкретный момент. Все эти методы подразделяют на прямые и косвенные. Прямые методы предполагают непосредственный подсчет клеток под микроскопом — в счетных камерах или на фиксированных мазках. При этом подсчитываются и живые, и мертвые клетки, к тому же такой подсчет возможен только для достаточно крупных микроорганизмов, не образующих агрегаты. К косвенным методам относятся высевы на твердые питательные среды, осаждение на мембранных фильтрах, определение параметров, пропорционально зависящих от количества клеток (биомасса, высушенная на фильтрах постоянной массы, мутность суспензии, общий азот, белок, поглощение кислорода и выделение углекислоты). Следует помнить, что нет универсального метода, лишенного недостатков. Любой метод имеет свои ограничения. Например, не все клетки способны дать колонии на твердой среде, нет питательной среды, подходящей для всех без исключения микроорганизмов, и т.д. [c.75]

Важной особенностью предписаний является их требование к ограничению времени фильтрации определенными пределами с целью предотвратить избыточный рост микроорганизмов до окончательной фильтрации, который вызывает образование эндотоксинов. Восемь часов — предельно допустимое время между вводом воды в смесительную емкость и стерилизацией последней порции фильтруемой жидкости. Кроме того, любые используемые в системе фильтры и мембраны должны быть либо очищены, либо заменены после 8 ч их работы. Размеры пор конечного мембранного фильтра не должны быть больше 0,45 мкм, даже если продукт высоковязкий и с трудом фильтруется. Прежде чем готовый продукт пустить в продажу, он должен пройти лабораторный контроль на содержание пирогенных веществ, отдельных частиц и на стерильность. Для контроля на пирогенность следует брать пробы из первого и последнего флаконов, заполненных в данной партии, а также из любых флаконов, при заполнении которых имел место значительный перерыв. При проверке на стерильность необходимо исследовать контрольные флаконы в каждой партии. В общем случае испытания на стерильность проводят методом мембранной фильтрации, описание которого приводится в разд. 7.11. Число флаконов, которые должны подвергнуться испытаниям на стерильность, может меняться, однако для больщих партий (состоящих из более 500 флаконов) их минимальное число должно составлять 20 (или не менее 2 %). Партия определяется как серия одинаково заполненных герметически закупоренных флаконов, приготовленных таким образом, что вероятность нарушения стерильности для них одинакова. [c.188]

Метод определения общего числа микроорганизмов в воде путем их микроскопического подсчета (прямой метод) был впервые предложен Н. Г. Холодным (1929). Метод сводится к концентрированию бактерий, содержащихся в воде, посредством аппарата Кольквииа на мембанном фильтре. Из концентрата берут одну каплю воды, подсушивают ее на предметном стекле, окрашивают эритрозином и подсчитывают бактерии на определенной площади мазка под микроскопом с иммерсионной системой при помощи окулярного сетчатого микрометра. С. И. Кузнецов и Г. С. Карзинкии (1930) независимо от Н. Г. Холодного разработали свой метод микроскопического подсчета количества микроорганизмов. Концентрирование микроорганизмов производят путем выпаривания воды в вакууме при температуре 38—40°С. Из концентрата готовят препарат на предметном стекле и подсчитывают число бактерий на определенной площади при помощи окулярного сетчатого микрометра. Л. Н. Гурфейн (1930) применила метод, предложенный Б. Л. [c.78]

Метод Разумова. Принципиально новый подход, предложенный А. С. Разумовым (1932),— концентрирование, окрашивание и подсчет микроорганизмов непосредственно на мембранном фильтре — исключил все названные недостатки ранее предложенных методов. Метод А. С. Разумова нашел признание как в иашей стране, так п за рубежом и до настоящего времени широко используется для определения общего числа микроорганизмов в воде водоемов. Метод называют также прямым , или методом прямого микроскопического счета бактерий . [c.79]

Книга посвящена изложению наиболее прогрессивных ускоренных и экспрессных методов определения в воде общего числа микроорганизмов, сапрофитных бактерий, бактерий группы кишечных палочек, энтерококков, клостридий, стафилококков, а также методов их идентификации с учетом новых тестов, комбинированных сред и в рамках современной классификации бактерий обращено внимание на методы, пригодные в экспедиционных и полевых условиях. [c.2]

Первый показатель дает представление об общей обсемененности воды аэробными сапрофитами, поэтому часто называется общим счетом аэробных сапрофитов или кратко общим счетом. Микробное число определяют методом посева на стандартную среду — мясо-пептонный агар (МПА). МПА готовят на мясном бульоне, добавляя на 1 л 10 г пептона, 5 г Na l и 20 г агар-агара, образующего плотный гель. МПА принят в качестве стандартной среды, так как его состав соответствует пищевым потребностям большинства сапрофитов. Посев инкубируют при температуре 37°С в течение 24 ч. Микробное число выражают числом клеток в 1 мл воды. В сточной, природной и водопроводной водах определение проводится одинаково, но при анализе сточных и большинства природных вод из-за высокого содержания в них микроорганизмов требуется предварительное разбавление пробы. [c.99]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология