Плазмида САМ гены вирулентности

Генетические механизмы изменчивости бактерий обусловлены модификациями, мутациями, рекомбинациями, а также приобретением различных плазмид. При этом изменяется один или несколько признаков одновременно в зависимости от числа мутировавших (при мутациях) или приобретенных (при рекомбинациях) генов. Так, например, при S->R мутации, как правило, изменяются морфология колонии, антигенные и вирулентные свойства бактерий. [c.68]

Для биотехнологии особенно интересны те гены плазмид, в которых закодирована способность к фиксаций азота и деградации органических соединений, а также факторы вирулентности патогенных бактерий. [c.306]

Рис. 20-72. Схема получения трансгенного растения. Интересующий нас ген кодирует бактериальный белок, токсичный для насекомых. Чтобы ген экспрессировался в растительной клетке, его 5 -конец соединяют с растительным промотором, а З -конец с сайтом полиаденилирования. Модифицированный ген токсина встраивают в плазмиду, содержащую кроме него и маркерный ген (например, ген устойчивости к канамицину), по которому можно проводить селекцию. Плазмида сконструирована таким образом, чтобы и ген токсина, и маркерный ген были окружены особыми повторами, размером 25 нуклеотидных пар, которые в норме окружают Т-ДНК. Плазмиду из клеток Е. oli переносят в Agroba terium, где на отдельной плазмиде присутствуют гены вирулентности. Если такую Agroba terium культивировать вместе с листовыми дисками, продукты генов вирулентности узнают повторы в Т-ДНК и перенесут ДНК, содержащую маркер и гены гоксина в хромосому растения. Все клетки листового диска затем заставляют делиться, помещая экспланты на соответствующую питательную среду, однако способность делиться и образовывать каллус сохранят лишь те клетки, которые содержат ген селективного маркера. Из каллуса затем получают трансгенные растения, которые экспрессируют

Введение генов непосредственно с помощью Ti-плазмид не используется, поскольку приводит к образованию опухолевых клеток, из которых невозможно получить целое растение. Для этих целей применяют векторные молекулы на основе Ti-плазмид с удаленными онкогенами. Вместо онкогенов в вектор можно встраивать стандартными методами по сайтам рестрикции последовательности клонируемой ДНК [193, 194]. В таких челночных векторных плазмидах сайты рестрикции, по которым производят клонирование, расположены в искусственной Т-области, фланкированной вышеупомянутыми повторами. В качестве селектируемых маркеров в этих плазмидах используют расположенные в Т-области гены устойчивости к антибиотикам или гербицидам, которые позволяют отбирать трансформированные клетки растений. После введения клонируемой последовательности рекомбинантным вектором трансформируют клетки агробактерий и с их помощью при участии vzr-генов осуществляют перенос всей генно-инженерной конструкции в клетки растений. Гены вирулентности могут находиться как в составе самого вектора, так и в ira/15-положении на плазмиде-помощнике. Для получения генетически модифицированных растений суспензию агробактерий можно инкубировать с протопластами, интактными клетками, тканями, листьями или даже целыми растениями. Во всех случаях достигается высокоэффективный перенос рекомбинантной ДНК в геном трансформируемых клеток. Интеграция рекомбинантной ДНК происходит случайным образом с небольшим предпочтением участков активно транскрибируемых генов. [c.140]

Y. entero oliti a — факультативные внутриклеточные паразиты. Патогенность иерсиний связана с инвазивными свойствами и действием цитокинов, вирулентные штаммы обладают устойчивостью к фагоцитозу и бактерицидному действию сыворотки. Эти свойства кодируют гены плазмид. Маркерами вирулентности являются кальцийзависимость и аутоагглютинация. [c.78]

Поскольку многие гены патогенности эшерихий находятся в составе плазмид вирулентности, для обнаружения патогенных [c.144]

Двухплазмидная система Agroba terium, предназначенная для переноса участка Т-ДНК, несущего клонированные гены, в растительные клетки. Гены вирулентности локализованы на одной плазмиде, а встроенный участок Т-ДНК — на другой. [c.544]

Принимая во внимание характер переноса генов, осуществляемого агробактериями, любую клонированную чужеродную ДНК можно перенести в геном клетки двудольного растения. Чужеродная ДНК, которую собираются перенести, должна быть фланкирована концевыми последовательностями Т-ДНК и стабильно поддерживаться в штамме агробактерии, несущем полный набор i iV-генов в цис- либо троне-положении (т. е. локализующихся на отдельной плазмиде — помощнике вирулентности или хелперной плазмиде). Здесь следует отметить, что были описаны и хромосомные гены агробактерий, связанные с вирулентностью. Считается, что их продукты участвуют в узнавании бактерией поверхностных компонентов растительной клеткп и последующем прикреплении. [c.18]

Участок Ti-плазмиды, встречающийся в хромосомах раститель-ньге клеток, называется Т-областью в бактерии и Т-ДНК в клетках растений. Т-область включает примерно 10% Ti-плазмиды и содержит гены, отвечающие за индукцию опухоли, синтез опинов и подавление дифференцировки (гормоннезависимый рост клеток). Важно отметить, что все гены, ответственные за перенос и интеграцию генов Т-области, находятся не в ней самой, а рядом — в области вирулентности — vir-области (рис. 5.17). [c.146]

Бактериальные вирусы делят на вирулентные, при инфицировании которыми все зараженные клетки гибнут с высвобождением новых фаговых частиц, и умеренные, вызывающие либо лизис инфицированных бактерий с высвобождением потомства новых фагов, либо их лизо-генизацию [4]. В лизогенном состоянии фаговый геном, называемый уже профагом, реплицируется синхронно с бактериальной хромосомой в форме плазмиды или включаясь в хромосому. Несмотря на то что вирулентные фаги и вирулентные мутанты умеренных фагов способны к трансдукции, в природе основной приток генов в бактерии за счет трансдукции обусловлен лизогенными умеренными фагами, которые представляют собой наиболее простые системы для изучения. [c.80]

Результаты экспериментов по оценке биологической опасности организмов с рекомбинантной ДНК позволяют утверждать, что случайное превращение потенциально непатогенных объектов в патогенную форму, по-видимому, невозможно. Патогенность предусматривает очень сложные взаимодействия с организмом-хозяином и регулируется большим числом генов. Опасность возможна лишь при переносе генов патогенного организма в близкородственный штамм, что может увеличить вероятность его превращения в вирулентный. Так, штаммы Е. oli становятся вирулентными, только приобретая плазмиды, кодирующие признаки адгезивности и синтеза энтеротоксина. [c.242]

Уже довольно давно из1вестно, что некоторые штаммы агробактерий дикого типа более вирулентны по отношению к одним видам двудольных растений, чем к другим (см., например, 112]). Полагают, что этот эффект практически не имеет отношения к онкогенности используемой Т-ДНК, а наоборот, зависит от эффективности конкретных игг-генов в процессе переноса Т-ДНК, функции участков Ti-плазмиды вне угг-областей и районов Т-ДНК, которые усиливают процесс переноса, а также от собственной бактериальной хромосомы используемого штамма агробактерий. Это ограничение круга хозяев очевидно и в том случае, когда для переноса Т-ДНК неонкогенных векторов используются угг-гены одной и той же Ti-плазмнды дикого типа. [c.31]

Многие факторы вирулентности бактерий (адгезия, колонизация, пенетрация, инвазия, подавление неспецифической и иммунной защиты макроорганизма) контролируются хромосомными и плазмидными генами. R-плазмиды детерминируют не только множественную резистентность к разным антибиотикам, но и их токсигенность. Токсинообразование детерминируется хромосомными генами или различными плазмидами (F, R, ol и др.), содержащими tox-транспозоны или умеренные фаги. Утрата плазмидных (в отличие от хромосомных) генов не приводит к гибели бактериальной клетки. [c.121]

Бактерии чумы отличаются высокой вирулентностью, проникают даже через неповрежденную кожу, ° образуют особый токсин, высокоядовитый для мышей, бактериоцины — пести-цины. Большинство факторов вирулентности (V-, W-антигены, мышиный токсин, F,, коагулаза и др.) контролируется генами плазмид. [c.265]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология