Мутант вирулентные

Вопрос. Из Ваших данных следует, что фаговые частицы, преодолевающие иммунитет, т. е. вирулентные мутанты, возникают после облучения в довольно высоком проценте. Если это так, то это невероятно. [c.174]

Первый тип — истинно вирулентные фаги. Инфекция клетки вирулентным фагом неизбежно ведет к гибели инфицированной клетки, ее разрушению и освобождению фага-потомства (исключая случаи абортивной инфекции). Такие фаги называют истинно вирулентными, для отличия их от вирулентных мутантов умеренных фагов. [c.169]

Нет единого мнения о значении лизогенных продуцентов, относящихся к разным видам бактерий, как возможных источников вирулентных фагов на производстве. Для ряда продуцентов происхождение некоторых вирулентных фагов, вызывающих фаголизис на производстве, доказано. В ряде других случаев столь же однозначно доказано, что многолетнее использование лизогенных продуцентов никогда- не приводило к возникновению или отбору вирулентных мутантов. [c.207]

Прозрачные и вирулентные мутанты [c.84]

Встречаюш.иеся в природе мутанты реовируса с измененной тропностью к ЦНС могут быть выделены экспериментально путем отбора вируса с измененным капсидным белком 51 — аналогом УР1 вируса полиомиелита [175]. 51 участвует в адсорбции вируса на клетках хозяина и представляет собой главную мишень для нейтрализующих антител [45, 193]. Мутанты реовируса, которые резистентны к действию нейтрализующих моноклональных антител, направленных против 51, обладают пониженной тропностью к специфическим участкам мозга экспериментально зараженных мышей [174]. Однако эти мутанты с измененным белком 51 нормально размножаются во внутренних органах мышей. Отобранные с помощью моноклональных антител мутации поверхностного гликопротеина вируса бешенства также могут приводить к аттенуации вируса для ЦНС [29, 33, 47],, причем у мутантов возможны реверсии к вирулентности, свойственной дикому типу вируса [47]. Эти наблюдения свидетельствуют о том, что вирус со сложным патогенезом, включающим в себя репликацию в месте проникновения и последующее распространение, может быть аттенуирован избирательным изменением сродства к органу-мишени. Неизвестно, является ли этот механизм главным или вообще единственным для аттенуации живых вирусных вакцин, используемых в настоящее время. Следует подчеркнуть, что к аттенуации ведет ограничение любой существенной функции вируса. Таким образом, мутация, которая снижает вирулентность, может возникнуть почти в каждом гене. [c.165]

У бактериофагов особенно легко выявляются такие мутанты, которые связаны с приобретением или утратой способности поражать некоторые типы бактерий. Если, например, бактериальную культуру, расположенную на агаровой пластинке, покрыть суспензией фаговых частиц, которые, вообще говоря, не способны поражать данный бактериальный штамм, то с большей частью агаровой пластинки ничего не произойдет. Однако в некоторых местах можно будет обнаружить круглые светлые дыркл (стерильные пятна или бляшки), которые образовались вследствие того, что бактерии под действием фага подверглись лизису. Лизис в свою очередь был вызван тем, что произошла спонтанная мутация, в результате которой определенная фаговая частица и все ее потомки стали вирулентными. Этот новый штамм можно выделить, если взять фагов из того места, где обнаружено пятно. [c.257]

В селекции растений на устойчивость к заболеваниям большое значение имеет хорошая изученность генетики возбудителя заболевания, спектра его изменчивости по вирулентности, механизмов расообразовательного процесса. В исследовании этих вопросов важную роль может сыграть применение индуцированного мутагенеза. В настоящее время мутанты фитопатогенных микроорганизмов успешно используются как для изучения частной генетики патогена, так и для изучения взаимодействий в системе паразит — хозяин [1]. Мутационный анализ признака вирулентности позволяет до некоторой степени оценить возможность появления в природе определенных рас фитопатогена в результате спонтанного мутирования. Применение мутантов с измененной вирулентностью, возможно, позволит вести упреждающую селекцию растений к расам паразита, которые могут появиться в будущем. [c.334]

При изыскании подходящего агента, пригодного для получения вакцин, высокий мутагенный эффект азотистой кислоты и гидроксиламина часто рассматривается как серьезный недостаток, способный привести к образованию сверхвирулентного мутанта. В действительности же среди многих сотен мутантов, полученных экспериментальным путем начиная с 1958 года (см. гл. IX, разд. Б), ни один не обладал необычной вирулентностью и почти у всех инфекционность, продуктивность и (или) стабильность были слабее, чем у дикого типа. Это и неудивительно, так как на протяжении длительной эволюции под влиянием естественного отбора образовались настолько совершенные формы вирусов, что сколько-нибудь заметное увеличение их вирулентности маловероятно. [c.198]

Оценка вирулентпости мутантов свидетельствует о сложности этого свойства и тонкой подгонке обменных процессов паразита к таковым у хозяина. Абсолютное большинство изменений в организме паразита, происходящих в результате различных мутаций, приводит к неспособности вызывать заболевание растения-хозяина. Аналогичная ситуация должна возникать и при изменениях в организме растения-хозяина, что может обусловить успешное применение индуцированного мутагенеза в получении устойчивых к вилту форм хлопчатника. Для выделения у патогена мутантов но вирулентности, способных поражать более широкий или иной круг сортов растения-хозяина, необходимо, по-видимому, изучение прежде всего форм, слабоотличающихся от дикого типа по другим признакам. [c.337]

Г. Е. Фрадкин. Ничего невероятного в наших данных нет. Они совпадают с литературными данными, например с результатами исследований Каплана, показавшего, что при ультрафиолетовом облучении умеренных фаговых частиц каппа выход вирулентных мутантов достигает 2%. Я хочу подчеркнуть, что в наших экспериментах сравнительно высокий выход фаговых частиц, преодолевающих иммунитет, был обнаружен только при облучении в условиях непрямого действия излучения, когда преобладают радиационнохимические реакции, близкие по своему механизму к химическим и фотохимическим (ультрафиолетовое излучение) реакциям, вызывающим мутации у покоящихся вирусных корпускул. Кроме того, необходимо заметить, что для фага X, как указывают Стент и Бертани, типично легкое возникновение фн-зиолого-генетических изменений, нарушающих функцию иммунитета. В наших эксперименгах мы в основном выявляли изменения эгого рода, и поэтому число частиц, преодолевающих иммунитет, столь непривычно велико. Весьма возможно, что изменения, называемые Стентом физиолого генетическими, являются точечными мутациями, легко репарируемыми клетками во время первого цикла репродукции. [c.174]

Преяаде всего американский штамм вируса я)де рного п<риэ(др01за, специфичный для непарного шелкопряда, по-видимому, мало вирулентен убивающие дозы можно произвести, но необходимое количество вируса обойдется слишком дорого. Ученые Лесного управления МСХ США пытаются решить проблему отбором вирулентных мутантов из местной популяции, а также испытывают относительную вирулентность штаммов, выделенных из непарного шелкопряда в Японии, Испании и Югославии. [c.311]

В 1963 г. в Голландии были начаты исследования по преиммунизации томатов для защиты от мозаики. Для этого всходы инокулировали ослабленным вирусом мозаики табака (индуцированный мутант), специфическая интерференция должна была подавлять заражение вирулентным диким штаммом. Подобный вирус для получения индуцированного иммунитета (штамм М П-16) оказался вполне пригодным и имеется в продаже [386]. Хорошие результаты применения этого метода получены также в Шотландии, НРР и СССР. В ГДР вирусный препарат под названием томавир допущен в производство. [c.221]

Явление трансформации впервые обнаружил в 1928 г. Гриффит (Griffith) при изучении пневмококковой инфекции мышей. Вирулентность (инфекционность) этой бактерии определяется капсульным полисахаридом, расположенным на поверхности клеточной стенки. Вирулентные бактерии образуют гладкие колонии, обозначаемые буквой S (от англ. smooth- гладкий ). Несколько типов пневмококков несут различные капсульные полисахариды. Любой из этих типов может дать мутантов, не способных к образованию капсульных полисахаридов. Такие бактерии растут в виде шероховатых колоний, обозначаемых буквой R (от англ. rough - шероховатый). Эти пневмококки авирулентны, т. е. не убивают мыши при инфицировании (поскольку из-за отсутствия капсульного полисахарида они фагоцитируются в организме животного). Но если мышей инфицируют бактериями R вместе с инактивированными нагреванием бактериями S (которые сами по себе не патогенны для мыши), животное погибает от пневмококковой инфекции. Погибшие животные содержат вирулентные бактерии S (рис. 2.1). [c.22]

Основная сложность при трансдукции вирулентными фагами заключается в создании условий для предупреждения гибели потенциальных трансдуктантов при заражении активными фагами. С этой целью можно использовать различные приемы. Это создание условий, подавляющих литическое действие фага (временное понижение температуры после адсорбции, использование голодающих культур в стационарной фазе роста, температурочувствительных мутантов фага), применение низкой множественности инфекции, облучение фага большими дозами УФ, использование в качестве реципиентов штаммов, непермиссивных для амбер-мутантов соответствующих фагов, удаление не-адсорбированного фага различными способами, предотвращение реадсорбции фага и лизиса клеток на чашках путем исключения катионов, необходимых для адсорбции. Следует отметить, что применение перечисленных методов повышает частоту появления трансдуктантов и при использовании умеренных фагов. [c.103]

ВИРУЛЕНТНЫЕ ФАГОВЫЕ МУТАНТЫ. Мутанты, неспособные лизогенизировать бактерии, а вызывающие их лизис, [c.520]

Бактериальные вирусы делят на вирулентные, при инфицировании которыми все зараженные клетки гибнут с высвобождением новых фаговых частиц, и умеренные, вызывающие либо лизис инфицированных бактерий с высвобождением потомства новых фагов, либо их лизо-генизацию [4]. В лизогенном состоянии фаговый геном, называемый уже профагом, реплицируется синхронно с бактериальной хромосомой в форме плазмиды или включаясь в хромосому. Несмотря на то что вирулентные фаги и вирулентные мутанты умеренных фагов способны к трансдукции, в природе основной приток генов в бактерии за счет трансдукции обусловлен лизогенными умеренными фагами, которые представляют собой наиболее простые системы для изучения. [c.80]

В монографии рассмотрены генетика и молекулярные основы репродукции вируса ipnnna, его эволюция и эпидемиология. Описаны геном вируса гриппа, транскрипция генома и геномные РНК-сегменты. Представлены данные об антигенной вариации и мутантах вирусов гриппа, экспрессии клонированных генов, генетическом базисе вирулентности вируса. Освещены наиболее крупные пандемии XX века. [c.4]

Неопределенность многих ранних экспериментов по генетике вирусов гриппа (а также некоторых более поздних исследований) можно объяснить вынужденным использованием неполных генетических маркеров. Поскольку вирусология животных возникла на основе ее первоначальной тесной связи с патологией, были все основания надеяться на маркеры, связанные с патогенностью вируса для экспериментальных животных. Полигенная природа таких явлений, как консолидация легочной ткани у мышей, была расшифрована впервые F. Burnet — пионером в этой области. Оказа-тось, что необходима серия мутации для адаптации вируса к репликации в легких мышей и последуюш его развития множественных легочных поражений [20]. Из маркеров вирулентности наибо-lee пригодным оказался маркер нейровирулентности, выявляемый а вумя независимо полученными мутантами оригинального штамма WS—NWS [118] и WS—N [31]. Однако этот маркер также оказался полигенным [49 см. также далее обсуждение проблемы виру-иентности]. [c.14]

То, как именно фаг попадает на производство, в существепной степени определяется характером самого производства. Так, например, в отраслях промышленности, где производство ведется в открытых емкостях, фаг может попадать в них из воздуха, с добавками и т. д. В случае таких производств (сыроделие, виноделие) фаголизисы вызываются в основном фагами, попавшими из внешней среды (экзогенные фаги). В этом случае единственной гарантией безлизисного производства может быть использование комплекса специально разработанных мер. Изредка, нри использовании лизогенных продуцентов, причиной лизиса может стать возникновение вирулентных мутантов (эндогенные фаги). В случае использования в производстве только одного пггамма бактерий аппаратурное оформление производства позволяет вести его в микробиологически стерильных условиях, основным источником фаголизиса должны быть фаги, имеющие эндогенное происхождение (вирулентные мутанты профагов лизогепных продуцентов), и лишь нри нарушении определенных технологических условий (некачественная стерилизация среды, воздуха, добавок и т. п.) лизис может быть вызван экзогенными фагами. Экзогенные фаги, вообще говоря, могут быть не только вирулентными, но и умеренными, если, например, в ферментеры попадают вместе с нестерильными компонентами лизогенные бактерии вида, родственного продуценту и выделяющие фаг, активный па клетках продуцента. [c.172]

В отличие от вируса осповакцины каждый из вирусов, раз-рещенных для использования в качестве живых вакцин, имеет четкую родословную. Во всех случаях штаммы происходят от вирусов человека. Аденовирусные вакцинные штаммы (типы 4 и 7) представляют собой дикие типы вирусов человека, вызывающие бессимптомную инфекцию благодаря способу их введения и ограничению репликации в месте введения, где болезнь не развивается [19]. Одним из наиболее широко используемых вакцинных штаммов является встречающийся в природе аттенуированный вирус полиомиелита, который был идентифицирован по отсутствию вирулентности при его введении в головной и спинной мозг обезьян (вирус полиомиелита тип 2, штамм 712) [169]. Остальные вакцинные вирусы получены серийными пассажами на неприродном хозяине, ведущими к появлению мутантов, размножение которых в организме человека частично ограничено в месте введения и (или) в органе-мишени. Аттенуированные таким образом мутанты вируса краснухи или вирусов полиомиелита типа 1 и 3 отобраны путем пассирования в культуре клеток почек обезьян [43, 163]. Вакцинные штаммы вируса желтой лихорадки (штамм 170) и вируса кори получены в культуре клеток куриного эмбриона, в то время как для аттенуации вируса паротита использовали сами куриные эмбрионы [43]. [c.161]

Удаление профага из лизогенных бактерий. Если обнаружено, что клетки штамма-продуцента лизогенпы и с определенной частотой образуют вирулентные мутанты фага, вызывакзщие фаголизис в производственных условиях, крайне желательно получить нелизогенный вариант бактерий или по крайней мере такой вариант, который не образует с высокими частотами жизнеспособных вирулентных мутантов фага. [c.191]

Иногда вполне достаточно придать фагу состояние дефектности. Нескольких мутаций, введенных в профаг обработкой ли-зогенпых клеток мутагенами, может быть достаточно для предотвращения в дальнейшем фаголизисов, обусловленных возникновением вирулентных мутантов. Такие дефектные лизогены не должны продуцировать жизнеспособного фага в результате реверсий, что и определяет их применимость для использования в качестве продуцентов. [c.192]

Как следует относиться к использованию лизогенных продуцентов По возможности этого следует избегать, но в тех случаях, когда это по тем или иным причинам невозможно, желательно сделать попытку получить клетки, вылеченные от профага. Для этого следует, во-первых, изучить способность соответствующего профага к индукции, во-вторых, проверить возможность возникновения вирулентных мутантов этого профага в лабораторных условиях в опытах после интенсивной мутагенной обработки и, в-третьих, попытаться вылечить бактерии от профага. Если использование данного лизогенного продуцента и не приводило ранее к отбору вирулентных мутантов, производство, использующее такие бактерии, должно быть под постоянным контролем. Дело в том, что возникновение вируле1ггных мутантов, и особенно из дефектного профага, может требовать многих мутационных или рекомбинационных событий, что, в свою очередь, требует времени и ие всегда может быть обнаружено в лабораторных условиях. [c.208]

Эндогенное происхождение вирулентного фага — как мутанта нрофага в данном продуценте — требует замены продуцента (если такие мутанты возникают с высокой частотой) или временного введения другого, устойчивого к данному фагу продуцента (позволяет освободить производство от данного фага), или принятия иных мер (придание профагу свойства дефектности — для понижения вероятности возникновения жизнеспособных вирулентных мутантов). [c.213]

Общая трансдукция оказалась следствием включения фрагментов ДНК Е. ali, зараженной фагом Р1, в инфекционные частицы бактериофага. Причем такие частицы вообще не содержат или содержат очень мало фаговой ДНК. Вследствие этого трансдуктан-ты, возникающие при множественности инфекции, равной 1 (одна частица на одну клетку), оказываются нелизогенными и не обладают иммунитетом к фагу Р1. Дефектность трансдуцирующих частиц Р1 подтверждает и то, что трансдукцию могут осуществлять даже вирулентные мутанты Р1. Это показывает, что транс-дуцирующие частицы действительно не способны инициировать нормальный цикл развития фага. Иначе клетки, зараженные вирулентным мутантом фага Р1, должны были бы погибнуть. [c.210]

Мутанты фага X по с1 не могут лизогенизировать клетки, при этом, подобно другим прозрачным мутантам и фагам дикого типа, они не способны лизировать клетки, лизогенные по фагу X. Еще один мутант фага X, который обозначается X vir (от англ. y/rulent-вирулентный), растет как на лизогенных, так и на нелизогенных бактериях. Такие мутанты, образующие прозрачные бляшки равно на лизогенных и нелизогенных клетках, возникают в популяции гораздо реже, чем обычные мутанты с прозрачными бляшками. Этот факт позволяет [c.85]

Фаг А-всего лишь один из представителей обширной группы фагов, которые инфицируют Е. соИ и могут лизогенизировать ее. Типичный представитель Х-подобных фагов-фаг 434. При росте на Е. oli он, как и фаг X, образует мутные бляшки для него известны вирулентные мутанты и мутанты с прозрачными бляшками. Удивительное свойство клеток, лизогенных по фагу 434, состоит в том, что они устойчивы к этому фагу, но чувствительны к фагу Х рост фага X на клетках, лизогенных по фагу 434, практически неотличим от роста на нелизогенных клетках. Точно так же клетки, лизогенные по фагу X, чувствительны к фагу 434. Такие взаимоотношения между фагами X и 434 называются гетероиммунностью. [c.86]

Определение конкурентоспособности это способность вирулентного штамма клубеньковых бактерий в присутствии других вирулент-ных штаммов обеспечивать преимуш,ественное инфицирование бобового растения. Если вирулентность штамма оценивать в монокультуре (растение выраш,ено в условиях асептики и заражено одним штаммом), то конкурентоспособность, проявляюш,уюся только при наличии двух или нескольких штаммов в зоне корня растения, определить довольно трудно. Для этой цели применяют серологический метод и метод метки штамма-мутанта по его антибиотикоустойчивости. [c.140]

Для других вакцинных вирусов экспериментальная система оценки вирулентности была недоступна. Поэтому их испытывали на аттенуацию непосредственно на людях. Сначала препараты вакцин против кори и краснухи не были достаточно аттенуированы, но дальнейшие пассажи вируса краснухи в культуре клеток почек обезьян и селекция холодоадаптированных температурочувствительных мутантов вируса кори дали удовлетворительные вакцинные штаммы. Аттенуацию вируса паротита также проверяли на людях. [c.162]

Миссенс-мутации возникают в результате замены оснований в вирусном геноме и отражаются в замене аминокислот в соответствующем участке кодируемого вирусного белка. Часто мутации этого типа можно идентифицировать прямо по наблюдаемым изменениям пораженного белка или косвенно — по изменениям сложной вирусной функции, связанной с измененным белком. Детально исследованы два типа миссенс-мутантов с легко определяемыми фенотипами, причем их проверяли на вирулентность и на потенциальную пригодность для получения аттенуированных мутантов, которые можно было бы использовать в качестве живых вирусных вакцин. К lПepвo y типу от- [c.169]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология