Биуретовый реагент

Методика. Смешивают 4,0 мл биуретового реагента и 1,0 мл раствора белка (разбавленного в случае необходимости), содержащего 1 -н 10 мг белка выдерживают смесь при комнатной температуре в течение 30 мин. Определяют поглощение при длине волны между 540 и 560 нм. [c.465]

Если нужно получить сшитый полимер, лучше применять трифункциональный реагент (например, триол) и катализатор, ускоряющий только реакцию изоцианата с гидроксилом. Преимущество этого метода состоит в том, что поперечные связи такого полимера более термостабильны, чем биуретовые или аллофанатные. [c.273]

Предложен интересный метод, в котором белок обрабатывается сначала биуретовым реагентом, а затем реагентом Фолина. Получена хорошая воспроизводимость результатов ( 2% для концентрации белка 50—600 мкг/мл). В координатах Хилла [284] кривая поглощения от концентрации белка преобразуется в прямую. [c.296]

Методика. Раствор, содержащий 50—1000 мкг белка, в пробирке разбавляют до объема 0,1 мл, добавлягбт 1,0 мл биуретового реагента, инкубируют 5 мин при 60 °С и измеряют поглощение при 545 нм. [c.296]

Метос)ика. К 2,5 мл биуретового реагента добавляют 0,5 мл раствора, содержащего 0,2—0,4 мг белка и 2% детергента. Смешивают и оставляют при комнатной температуре на 30 мин. Измеряют поглощение при 540 нм против 0,5 мл 2% раствора детергента. [c.297]

Отверждение форполимера ведут при температуре не ниже 80 °С. При использовании для отверждения гликолей образуется сетка аллофанатных узлов разветвления, при содержании в цепи мочевинных групп и их взаимодействии с избытком концевых МСО-групп образуются биуретовые узлы рааветвления. Биуретовые и аллофанатные структуры не относятся к стабильным 0браз10ва иям, поэтому часто для увеличения числа устойчивых поперечных уретановых связей в исходную смесь добавляют трехфункциональный агент. Скорость отверждения регулируется органическими производными двух- и четырехвалентного олова, аминами и др. Особенно важно использование катализаторов при одностадийном способе получения полиуретанов, когда необходимо соблюдать очередность вступления в реакцию каждого реагента. [c.19]

Широкое распространение получил также метод Лоури, в котором сочетаются две реакции — на ароматические аминокислоты (с реагентом Фолина) и биуретовая. Его чувствительность значительно выше — до 0,01—0,05 мг1мл. Однако его эффективность для белков, существенно различающихся по содержанию ароматических аминокислот, неодинакова. Кроме того, на правильность результатов определения по Лоури оказывают заметное влияние многие примеси, например, нуклеиновые кислоты. [c.34]

Реакции типа биуретовой, зависящие от способности белков связывать ионы меди, дают более согласующиеся результаты для разных белков [120], чем реакции, основанные на действии фенольного реагента. Первоначальные методы, основанные на биуретовой реакции, были сравнительно малочувствительны, но Уэстли и Ламбет [124] достигли 40-кратного повышения чувствительности, удаляя избыток меди на ионообменной смоле и определяя медь, связанную с белком, колориметрически с диэтилдитиокарбаматом. Гольдвассер и сотр. [121] сообщили о расхождениях в результатах, полученных этим методом и методом Лоури для фракций овечьего эритропоэти-па. Отсутствие определенных структурных обоснований для образования окраски и чувствительность диэтилдитиокарбамата меди к свету ограничивает ценность этого метода. [c.151]

Биуретовый метод основан на специфической реакции пептидной связи с ионами меди в щелочной среде методика проста в экспериментальном отношении. Метод ограничен низкой чувствительностью (предел обнаружения белка 300 мкг/мл). Предложено много вариантов реагента с целью увеличения интенсивности окраски, стабильности ее и исключения наложения фона, вносимого соединениями с сульфгидрильными группами (такими, как дитиотреит). [c.291]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология