Координаты Хилла

Рис. 81. Комплексообразование одновалентного лиганда с одним центром связывания. Зависимость кривой связывания в координатах Хилла

Рис. 141. Комплексообразование одновалентного лиганда с белком, содержащим два кооперативно взаимодействующих центра связывания. Влияние соотношения стехиометрических констант ассоциации на зависимости кривых связывания в координатах Хилла. Параметры в уел. ед. 0о=0,1, 7Са1=20, КаИ 1 — 0,5 (отрицательная кооперативность) 2 — 5 (отсутствие кооперативности) 3 — 25 (положительная кооперативность) (кривые построены исходя из данных, представленных иа рис. 140)

Рис. 29. Зависимость скорости реакции, катализируемой НАД-зависимой изоцитратдегидрогеназой, от концентрации с> бстрата — изоцитрата в отсутствие и присутствии аллостерических эффекторов активатора—АДФ а) и ингибитора — НАДН (б) [64] (данные представлены в координатах Хилла).

Оценка меры кооперативности в координатах Хилла. С использованием логарифмической шкалы строят график зависимости степени проявления эффекта от концентрации эффектора, т. е. [c.335]

При исследовании процессов комплексообразования лигандов с центрами связывания (рис. 89, а) наиболее часто результаты представляют в координатах Скэтчарда (рис. 89, б) и координатах Хилла (рис. 89, в). Методы определения параметров с помощью этих представлений рассмотрены выше. [c.201]

В координатах Хилла кривая связывания одновалентного лиганда с двумя независимыми центрами комплексообразования имеет вид, представленный на рис. 133. Как видно из рисунка, кривая связывания имеет точку перегиба, при этом асимптоты к конечным участкам кривой соответствуют процессам связывания [c.283]

На рис. 141 представлены теоретические кривые, соответствующие процессам связывания (12.1)—(12.2) в координатах Хилла. [c.311]

Зависимость процесса комплексообразования лигаида (ов) с центром ами) связыва ния в координатах Хилла ] [c.323]

Предложен интересный метод, в котором белок обрабатывается сначала биуретовым реагентом, а затем реагентом Фолина. Получена хорошая воспроизводимость результатов ( 2% для концентрации белка 50—600 мкг/мл). В координатах Хилла [284] кривая поглощения от концентрации белка преобразуется в прямую. [c.296]

Отметим TaKHie, что в случае одновременного связывания гормона с несколькими участками, различающимися по константам сродства (см, рис. 46Л),- анализ кривых титрования в координатах Хилла может показать (в силу известной ошибки биологического эксперимента) несуществующую кооперативность. Полученное в эксперименте отличие коэффициента Хилла о т единицы — условие обязательное, но недостаточное для заключения о кооперативности процесса связывания. [c.128]

Рис. 2.14. Зависимость степени насыщения гемоглобина кислородом (а) и представление этих данных в координатах Хилла (б) [Wyman, 1968].

На рис. 3.45 приведены наиболее типичные кривые насыщения, представленные в координатах Скэтчарда, для различных моделей рецепторного связывания. Как видно из рисунка, координаты Скэтчарда позволяют определить сложный характер лиганд-рецепторного взаимодействия, но зачастую не позволяют определить ту модель рецепторного связывания, которая позволяет наилучшим образом описывать экспериментальные данные. Поэтому для определения модели рецепторного связывания используют другие координатные методы. Рассмотрим только два дополнительных метода преобразования координат Хилла и Бьеррума. [c.394]

Анализ кооперативных лиганд-рецепторных взаимодействий, а также различных случаев, подозреваемых в кооперативном связывании, следует проводить в координатах Хилла (Хилл, 1910) [37]. [c.395]

Переход к координатам Хилла можно получить на основании схемы (3.16). Для этого запишем закон сохранения вещества для этой схемы в условиях равновесия [c.395]

Заметим, что в случае положительной кооперативности у< / . Значения у, меньшие п, могут наблюдаться, если не все места связывания на рецепторе ассоциированы с лигандом. В случае отрицательной кооперативности у = 1/л. При этом значения у, определенные с помощью координат Хилла с точностью до погрешности вычисления, совпадают со значениями у, определенными с помощью метода Скэтчарда (степень отклонения от прямой линии — см. рис. 3.44). [c.395]

Необходимо запомнить, что, как следует из уравнения (3.17) и только что проведенных рассуждений, тангенс угла наклона изотермы насыщения, представленной в координатах Хилла, [c.395]

Координаты Хилла позволяют практически во всех случаях достоверно определить наличие положительной кооперативности. Случай с у < 1 может быть как при наличии отрицательной кооперативности, так и при наличии нескольких типов мест связывания. Для того чтобы дискриминировать эти два случая, используются координаты Бьеррума. [c.396]

Аналитическое исследование показало, что тангенс угла наклона фафика в координатах Хилла, меньший единицы, не означает наличия случая отрицательной кооперативности. Такой же график может наблюдаться при условии наличия двух типов связывающих мест с близкими значениями констант диссоциации (отличающимися меньше чем на порядок). Поэтому координаты Хилла для дискриминации случая отрицательной кооперативно- [c.398]

В координатах Хилла (рис. 3.50а) предположение о наличии положительной кооперативности подтверждается угол наклона равен 0,7 рад. Следовательно, кажущаяся степень кооперативности ё равна у = агс1 (0,7) = 1,6. Точка пересечения графика с осью абсцисс равна 1о (2,5 нМ). Следовательно, К(1 = = 3,2 нМ. [c.402]

Исходя из вида кривой насыщения, представленной в координатах Скэтчарда, можно предположить, что ДАДЛЭ или взаимодействует с двумя типами связывающих мест, или имеется связывание ДАДЛЭ мембранами мозга с отрицательной кооперативностью. Как было указано выше, координаты Хилла не позволяют дискриминировать эти два случая. Поэтому представим изотерму связывания в координатах Бьеррума (рис. 3.52). Исходя из вида графика в этих координатах нельзя предположить существование более чем одного типа мест связывания. По точке перегиба log (1,3 нМ) определяем константу диссоциации (20 нМ). [c.403]

Каковы основные предпосылки модели лиганд-рецепторного взаимодействия, описываемой схемой (1.2) и уравнением (1.1) Какие из этих предположений могут нарушаться 2. Выведите уравнение, описывающее концентрацию лиганд-рецепторных комплексов в зависимости от количества добавленного лиганда, если концентрации лиганда и рецептора соизмеримы Как определять параметры рецепторного связывания в этом случае Приводит ли изменение концентрации лиганда за счет лиганд-рецепторного взаимодействия к изменению аналитического вида графиков, построенных в координатах Скэтчарда 3. Какие изменения наблюдаются в графиках, построенных в координатах Скэтчарда, при отсутствии равновесия в системе лиганд-рецептор 4. Какие характерные изменения наблюдаются в кинетике лиганд-рецепторного взаимодействия, если изменяется суммарная концентрация лиганда или рецепторов За счет каких процессов это может происходить 5. Как можно разграничить процессы рецепторного связывания, транспорта и деградации лиганда 6. Какие изменения в кинетике связывания наблюдаются при наличии двух типов мест связывания 7. Дайте определение понятию кооперативность . Какие виды кооперативного лиганд-рецепторного взаимодействия вы знаете 8. Выведите уравнение для преобразований Хилла. 9. Как с помощью координат Хилла определять степень кооперативности Сравните понятия степень кооперативности и кажущаяся степень кооперативности . 10. Выведите уравнение для преобразований Бьеррума. Как определять число мест связывания в координатах Бьеррума 11. Как с помощью координатных методов определить модель лиганд-рецепторного взаимодействия 12. Как определяются основные кинетические и равновесные параметры рецепторного связывания [c.404]

Достаточно часто определяют с помощью специального преобразования координат (logit-координаты), которые являются аналогом координат Хилла (см 3.3) [c.425]

Характер зависимости доза—эффект Тангенс угла наклона изотермы насыщения, представленной в координатах Хилла [c.482]

Координаты Хилла (1о [1,/ ]/([/ р]-[1,/г]) , 1о [1,]). Тангенс угла наклона в этих координатах равен кажущейся степени кооперативности рецепторов. Абсцисса точки пересечения с осью X изотермы насыщения, представленной в координатах Хилла, является оценкой для логарифма равновесной константы диссоциации комплекса лиганд-рецептор . [c.483]

Взаимодействие соизмеримых концентраций лиганда и рецептора (372). Концентрация лиганда много меньше концентрации рецепторов (375). Изменение суммарной концентрации лиганда или рецептора (376). Дискриминация процессов изменения концентрации лиганда и рецептора (381). Диффузия лиганда (384). Кинетика ассоциации лиганда с рецептором при наличии нескольких типов связывающих мест (385). Связывание нескольких молекул лиганда с одной молекулой рецептора. Кооперативное лиганд-рецепторное взаимодействие (390). Дискриминация моделей рецепторного связывания (394). Метод преобразования координат Хилла (395). [c.712]

Рис. 4. Зависимости теплоустойчивости тилакоидных мембран (ТМ), содержания ЗН-груш белков (8Н) и градиента протонов на тилакоидной мембране (Л]Я) от дозы действупцего фактора (прогрева, обезвоживания, фумигации 0 и засоления) в координатах Хилла.

Координаты Хилла позволяют сравнивать по величине реакцию клетки на факторы различной природы. Тангенс угла наклона прямой в координатах Хилла, больший I, свидетельствует о кооперативном характере отклика клетки [c.39]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология