Фолина реагент

Реагент Фолина — для обнаружения восстанавливающих аминокислот. [c.913]

В основу метода определения белка по Лоури положена реакция Фолина, открывающая в белке тирозин и триптофан. Окрашенный белковый комплекс получают в два этапа 1) реакция меди с белком в щелочной среде 2) восстановление фос-фомолибденово-фосфовольфрамового реагента белком, обработанным медью. [c.71]

Хроматограмму пропитывают 0,01 %-ным раствором 1,2-нафтохинон-4-сульфоната (реагент Фолина) в метаноле. Нагревают при 110- 120°С в течение 10 мин. [c.391]

Обзор методов определения меркаптанов был опубликован Уайлдом [128]. Их можно определять при помощи 18-фосфорновольфрамовой кислоты, которая восстанавливается до синих продуктов тиосоединениями, а также рядом других соединений. Путем снижения pH раствора до 5 и тщательного контроля времени можно устранить мешающее влияние многих менее энергичных восстановителей. Реагент Фолина [24], содержащий 18-фосфорноволь-фрамовую кислоту, применяли для фотометрического определения цистеина, цистина и аналогичных веществ [661, в том числе других сульфгидрильных и дисульфидных соединений [97, 102[. Метод неселективен. Обзор других реагентов для определения сульфгидрильных групп, включая феррицианид двухвалентного железа, феррицианид двухвалентной меди, 2,3,5-трифенилтетразолийхлорид и бруцин и персульфат калия, был выполнен Фрейтагом [26]. [c.329]

Нафтохинон-4-сульфонат (реагент Фолина). Хроматограмму опрыскивают 0,5%-ным раствором ( -нафтохинон-4-сульфоната, доведенным до pH 9,2-9,4 тетраборатом натрия. Прогревают в течение 10 мин при 100°С. Пантотеновая кислота дает интенсивное желтое пятно Р-аланин- красновато-оранжевое. Выдерживают на свету в течение нескольких часов до обесцвечивания фона. [c.425]

Реактивы. Пользуются фенольным реагентом и сернокислой ртутью, приготовленной по Фолину (см. выше). [c.125]

Б. Проводят опыт, как указано в разделе А, с тем изменением, что за I—2 мин, до прибавления реагента Фолина в колбочку внося- , м ЪТ i раствора формальдегида. [c.195]

Д. Реагент Фолина — Чикольте. После приготовления надо использовать в тот же день в настоящее время доступен комерческий препарат с более длинным сроком использования (хранение при О—4°С). Титруют аликвоту реагента до pH 10,0 (по фенолфталеину) и на основании результатов титрования разбавляют реагент приблизительно в два раза до концентрации [c.293]

Ранее широко применялся метод, основанный на осаждении фосфата магния и аммония, растворении осадка в кислоте и фо-тометрировании синего фосфорномолибденового комплекса [330, 332, 333, 339, 558, 693, 868, 938, 1147, 1243, 1244]. Применялось также много фотометрических методов с использованием 8-оксихинолина измерением поглощения 8-оксихинолина, связанного в осадок оксихинолината магния, в кислом растворе при 358 нм [649], превращением связанного с магнием 8-оксихинолина в азокраситель [500, 950], по образованию молибденовой сини с реагентом Фолина — Дениса [676, 1289], по образованию зеленого комплекса с Fe Ig в кислой среде [730, 798, 1259] метод, основанный на осаждении оксихинолината магния, добавлении раствора (NH4)2 e(NO3)e к фильтрату и фотометрировании избытка церия при 315 нм [1003]. Предлагались методы определения по уменьшению поглощения комплексона III при 225 нм в присутствии магния [671], а также определения с дипикриламином [1107], окситриазеном [322, 323], гипоиодидом [26], с дилитуро-вой кислотой [931], нефелометрическое определение с нафтол-гидроксаматом натрия [535]. [c.159]

Осаждение белков различными специфическими оса-дителями является одной из наиболее широко применяющихся операций биохимического анализа, для которой в то же время надежные доказательства немногочисленны. Вероятно, не существует осадителей, полностью отделяющих белки от всех других составных веществ биологической смеси. Многие такие вещества применяются для отделения белков при анализе на некоторые другие составные части смеси. Очевидно, что задачей аналитика является выбрать для белка такой осадитель, который не осаждал бы ничего, кроме белка, или, по крайней мере, не осаждал бы небелковый азот. Было показано, что кислоты, как осадители, удаляют меньше небелкового азота, чем основные реагенты. Наиболее часто применяются трихлоруксусная кислота и реактив Фолина — Ву или их модификации. Из некислотных осадителей наиболее распространены ацетон и спирт. Последние работы со спиртом [196] указывают, что при соответствующем использовании этого вещества можно получить хорошее отделение белков от небелковых веществ. Однако несомненно, что обычные методы введения реактива неудовлетворительны. [c.37]

Фосфорномолибденовольфрамовая кислота. Хроматограмму опрыскивают реагентом Фолина на фенолы (фирма ВОН), разбавленным непосредственно перед использованием 5 объемами воды. Обрабатывают парами аммиака в течение 5 мин. Эстрогены (0,5 мкг) дают синие пятна другие стероиды с а-кетольной боковой цепью - ярко-синие. [c.421]

Раствор Г. Коммерческий реагент Фолина - Чокальтеу (хранить в холодильнике), разбавленный водой до концентрации по кислоте 1 моль/л (обычно требуется 2-кратное разбавление). [c.466]

При действии бромциана протекает только деметилирование 4-метилфеномор-фолина без размыкания цикла. Подобным же образом восстановление хлорида 4,4-диметилфеноморфолиния амальгамой натрия—реагентом, который вызывает раскрытие цикла в случае аналогичного производного тетрагидрохинолина,— дает только 4-метилфеноморфолин [71]. [c.479]

Реагент Б. Разбавляют водой реагент Фолина — Чикольте (1 5). [c.294]

В основе метода лежит реакция цистина с сульфитом, в результате которой образуются цистеин и цистеин-5-сульфонат. В присутствии реактива Фолина цистеин вновь окисляется в цистин, а восстановление реактива приводит к развитию синей окраски [13—16]. Далее приведена модифицированная методика Спекмена и Стайна [17]. Для проведения реакции необходимо подготовить четыре реагента [c.395]

Мирский и Ансон [459] сделали важное наблюдение, что интенсивность окраски, образующейся при действии реагента Фолина и Маренци на эквивалентное количество цистеина 1 цистина в присутствии сульфита, точно равна отношению 2 1. Этот факт был в следующем году объяснен Кларком [165] (см. исторический обзор). [c.192]

Р-Нафтохинон-4-сульфокислота, применявшаяся Фолиным [98, 99] для анализа аминокислот в моче и крови, обладает умеренной реакционной способностью [100]. При реакции с аминогруппой желтая окраска, свойственная реагенту, очищенному по методу Фолина [98], переходит в желтовато-коричневую. В ходе реакции происходит арилирование аминогруппы с отщеплением сульфогруппы реагента. Определение проводят в несколько стадий [100] вначале инкубируют без доступа света реакционную смесь, включающую раствор белка, бикарбонатный буфер (pH 8,8), диоксан и раствор НХС в 50%-ном метаноле, а затем добавляют уксусную кислоту и диоксан. Далее определяют разницу в величине поглощения при 480 нм рабочего и контрольного раствора, не содержащего белка Аб48о = 3800 М см Ч При инкубации контрольный раствор приобретает интенсивную окраску, однако он почти полностью обесцвечивается при последующем подкислении уксусной кислотой. Окраска, свойственная производным по аминогруппе, не исчезает при подкислении. Присутствие диоксана до и после подкисления предотвращает осаждение модифицированного белка. В табл. 3 сопоставлены результаты модификации аминогрупп ряда белков с помощью НХС и некоторых других реагентов. [c.360]

Разделение проводилось в аппарате для противоточного распределения Qui kfit , поглощение определялось после обработки реагентом Фолина — Чикальтау более высокий [c.277]

Хроматографические свойства этих соединений, как и соединений других типов, зависят от нх гидрофильности, т. е. от числа полярных функциональных групп, главным образом гидроксильных. Для обнаружения соединений этой группы используются специфические реакции с участием фенольных гидроксильных групп. К числу основных обнаруживающих реагентов относятся 0,1%-ный раствор хлорида железа(П1), который дает зеленую окраску с о-диоксифенолами и чернильно-синюю окраску с вицинальными триоксифенолами, нитрат серебра (ОР-2), растворы диазотированных аминов, например сульфаниловой кислоты (ОР-20) или п-нитроанилина (ОР-19). Реже применяется классический реагент Фолина-Дениса или Гиббса (1%-ный этанольный раствор 2,6-дихлорхинонхлоримида). Удобен также реагент, в состав которого входят хлорид железа (III) и ферри-цианид калия (ОР-21) в реакцию с этим реагентом вступают не только фенолы, но и все другие восстанавливающие вещества. Флавоноиды и кумарины можно также обнаружить по их флуоресценции. Флавоноиды, если только не происходит гашения флуоресценции, обычно проявляют себя флуоресценцией от желтого до зеленого цвета, которая усиливается после обработки хроматограммы парами аммиака. Кумарины чаще всего об- [c.115]

Широкое распространение получил также метод Лоури, в котором сочетаются две реакции — на ароматические аминокислоты (с реагентом Фолина) и биуретовая. Его чувствительность значительно выше — до 0,01—0,05 мг1мл. Однако его эффективность для белков, существенно различающихся по содержанию ароматических аминокислот, неодинакова. Кроме того, на правильность результатов определения по Лоури оказывают заметное влияние многие примеси, например, нуклеиновые кислоты. [c.34]

Другое применение иермутита описано Оберстом, который использовал пермутит для определения морфия в моче [20]. Для извлечения этого алкалоида применяли насыщенный раствор соды в присутствии фенольного реагента Фолина—Дениса. Благодаря образующейся ири реакции алкалоида с реагентом голубой окраске было возможно определить его колориметрическим способом. [c.289]

Подобным же образом, не существует специфического метода блокирования индольной группы в остатке триптофана. Она слабо реагирует с весьма немногими белковыми реагентами и энергично взаимодействует с формальдегидом при рН 11. Остаток триптофана -препятствует определению числа незамещенных ти розильных остатков, проводимому по методу Фолина. Амидные группы также энергично реагируют с формальдегидом в щелочной среде, но по отношению к другим реагентам они инертны. До сих пор нет указаний на то, являются ли индольные и амидные группы существенными для проявления биологической активности белков. [c.282]

Описано много] методов колориметрического определения магния после осаждения его оксихинолята в аммиачном растворе. Осадки очень слабо растворимы в щелочных растворах. Сообщают, что растворимость оксихинолята магния в буферном растворе смеси хлорида аммония и аммиака, обеспечивающем pH 10, равна 1,9-10" моль л, что соответствует 46у магния на 1 Содержание оксихинолина в осадке можно определить при помощи фенольного реагента Фолина раствора железа (III) в уксусной кислоте или в очень разбавленной соляной кислоте (по зеленой окраске РеОж +) при помощи диазобензолсульфоновой кислоты переходящей [c.537]

Фенолы типа флороглюцина, катехина и протокатеховой кислоты можно обнаружить на пластинках с силикагелем либо по тушению флуоресценции (если слой сорбента содержит флуоресцентный индикатор), либо с помощью одного из реагентов на фенолы (см. табл. 12.2). Опрыскивание хроматограмм предпочтительнее проводить реагентом Фолина — Чиокалтеу, а не раствором хлорида железа и феррицианида. В качестве альтернативного реагента на все типы фенольных соединений предложен раствор кобальтинитрита натрия в разбавленной уксусной кислоте этот реагент дает окраску от коричневой до желтой и позволяет обнаружить до 2 мкг вещества [49]. С помощью раствора хлорида титана в концентрированной соляной [c.258]

Наиболее широкое применение нашел метод Лоури [225]. Возникающая окраска в основном определяется реакцией фенольного реагента (Фолина — Чикольте) с остатками Туг, но определенный вклад дают некоторые другие аминокислоты — Тгр, His и ys, а также пептидные связи. Зависимость интенсивности окраски от количества белка-стандарта не линейна. Определению мешают детергенты, используемые для солюбилизации белков. Предлолсепо много различных модификаций метода. [c.291]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология