Биуретовый метод

Из различных спектрофотометрических методов, которые могут быть использованы для определения количества белка, входящего в состав веществ биологического происхождения, наиболее подходящим является биуретовый метод [25]. Этот метод не очень чувствителен и, как показывает опыт, его применение связано с рядом ограничений. Белок обладает способностью осаждаться совместно с гидратом окиси меди. На этом основан классический метод определения белка [26], согласно которому раствор белка [c.315]

Объясните принципы биуретового метода определения содержания белка в сыворотке крови. [c.47]

Метод Лоури приблизительно в 100 раз чувствительнее биуретового метода и в 10—20 раз спектрофотометрического метода измерения концентрации белка по поглощению света с длиной волны около 280 нм (ультрафиолетовая область). С помощью метода Лоури можно определить количество белка в растворе, если его содержание составляет 10—20 мкг в 1 мл, [c.20]

На каких реакциях основано количественное определение белка биуретовым методом, методом Лоури [c.23]

Биуретовый метод 1 г/л Аминокислотный илн пептидный буфер Быстрота Низкая точность или чувствительность результаты варьируют в зависимости от аминокислотного состава [67. 70. 89] [c.347]

Биуретовый метод относится к колориметрическим методам анализа и основан на цветной биуретовой реакции (см. стр. 9). [c.227]

Биуретовый метод для образцов, содержащих тиолы [291]. [c.296]

Биуретовый метод в применении к образцам, содержащим детергенты [393]. [c.297]

Биуретовый метод в применении к образцам, полученным экстракцией тканей [24J. [c.297]

Определение белка. Для определения белка используют микро-биуретовый метод (см. с. 81). В случае сиектрофотометрического определения концентрацию белка рассчитывают с учетом коэффициента поглощения Л " 1см=13,2 при 280 нм. [c.234]

Рассчитывают удельную активность фермента. Для этого надо знать содержание ферментного препарата в 1 мл пробы и концентрацию белка в нем. Так, если в 4 мл пробы содержится 0,4 мл ферментного препарата, то в 1 мл пробы — 0,1 мл фермента. Концентрацию белка в ферментном препарате определяют заранее биуретовым методом или пользуются готовым результатом. Например, концентрация белка в ферментном препарате [c.48]

Определяют содержание белка в ферментном препарате биуретовым методом. Для этого в пробирку вносят 1 мл ферментного препарата и 4 мл биуретового реактива, хорошо перемешивают и через 20 мин колори-метрируют на ФЭКе против контроля реактивов (1 мл воды и 4 мл биуретового реактива) при длине волны 540— 560 нм (зеленый светофильтр). Концентрацию белка рассчитывают по калибровочному графику. [c.66]

Биуретовый метод основан на специфической реакции пептидной связи с ионами меди в щелочной среде методика проста в экспериментальном отношении. Метод ограничен низкой чувствительностью (предел обнаружения белка 300 мкг/мл). Предложено много вариантов реагента с целью увеличения интенсивности окраски, стабильности ее и исключения наложения фона, вносимого соединениями с сульфгидрильными группами (такими, как дитиотреит). [c.291]

Олределение белков сыворотки крови биуретовым методом. [c.6]

Р а бота № 113 Определение белков сыворотки крови биуретовым методом [c.227]

Прямые методы. 1. Сырую биомассу определяют после осаждения клеток центрифугированием. После центрифугирования отмытых клеток можно определить сухую массу. Оба метода не свободны от довольно больших систематических ошибок. 2. Гораздо большую точность обеспечивает определение общего азота (метод микро-Кьельдаля и микродиффузионный метод определения аммиака), а также определение общего содержания углерода (по ван Слай-ку-Фолчу). 3. В повседневной практике часто определяют содержание бактериального белка. Хорошие результаты дают модификации биуретового метода и другж колориметрические методы. Микрометоды основаны на измерении количества характерных компонентов белка тирозина, триптофана (по Лоури или Фолину). [c.192]

После завершения опыта определяли в сыворотке крови общий белок (рефрактометрическим и биуретовым методами), белковые фракций — методом высаливания сернокислым аммонием [c.378]

Метод Кьельдаля относительно сложен, требует предварительного выделения белка из смеси, медленен, но при соблюдении всех предосторожностей — точен. Биуретовый метод — средней точности, быстр, может быть весьма полезным для сравнительных анализов. Безусловно, лучшим является широко используемый сейчас фотометрический метод Лоури. Интенсивность окраски, возникающей при одновременном протекании в нем биуретовой реакции и реакции Фолина, значительно большая, чем при применении одного лишь биуретового реактива. Установлено, что метод Лоури в 100 раз чувствительнее биуретовой реакции и в 10—20 раз — чем метод, основанный на измерении поглощения света при 280 ммк. [c.139]

Скорость ультрафильтрации w мл час) определяли по количеству добавленного раствора из бюретки в ли рный цилиндр за определенный промежуток времени. Концентрацию обн его белка с (вес,%) определяли биуретовым методом [19], Разд( ление белков по фракциям осуп ествляли методом электрофореза на бумаге [19], Относительную вязкость плазмы измеряли с помощью вискозиметра ВК-4 [20], Структурные [c.174]

Работа 5. Определение концентрации общего белка в сыворотке (плазме) крови биуретовым методом (набор НТК Анализ-Х ) (УИРС) [c.41]

Содержание общего белка в сыворотке крови практически здоровых людей составляет у взрослых — 65-85 г/л, у детей до 6 лет — 56-85 г/л, у новорожденных— 53-89 г/л. Из колориметрических методов количественного определения белка особого внимания заслуживает биуретовый метод, основанный на биуретовой реакции. В щелочной среде ионы меди образуют с белками комплексы фиолетового цвета. Интенсивность окрашивания в определенных пределах пропорциональна концентрации белка. Содержание белка устанавливается по интенсивности светопоглощения при 540-560 нм фотометрически. Для расчета количества белка в исследуемом растворе необходимо пользоваться калибровочным графиком, построенным по стандартным растворам белка. [c.42]

С ошибками, которые по опубликованным данным присущи трем обычно используемым методам определения белка биуре-товому методу, методу Лоури и методу Бредфорда. Для этих трех методов ошибки определений устанавливали, сравнивая опубликованные данные (Инструкция по определению белка фирмы Bio-Rad, с. 3—4) с количествами белков, определяемыми гравиметрически. В качестве стандартов для определения по Лоури и Бредфорду использовали бычий -у-глобулин, а для определения биуретовым методом — БСА. Несмотря на некоторые различия в определениях при двух длинах волн, диапазон ошибок (средний уровень отклонений) для определений по площади пиков при 205 нм укладывается в диапазон ошибок для трех стандартных колориметрических определений. Петерсон (Peterson, 1983) в своем обзоре указывает, что измерение по поглощению при 205 нм в два раза чувствительнее, чем модифицированный фенольный метод Фолина при определении белка по Лоури. [c.127]

Выполните лабораторную работу Количественное определение белка биуретовым методом . [c.336]