Гель-электрофорез в крахмальном геле, вертикальный

Фиг. 84. Экспериментальная установка для вертикального электрофореза в крахмальном геле [39].

Фиг. 85. Результаты разделения образцов сыворотки 6 здоровых людей методом вертикального электрофореза в крахмальном геле [39],

Приборы для вертикального электрофореза. Вертикальный электрофорез более трудоемок, чем горизонтальный, но обладает значительными преимуществами [449, 1200]. При горизонтальном электрофорезе в крахмальном геле электродекантация раствора белка, внесенного в канавку, может привести к искажению формы полос, что исключено в случае вертикального электрофореза. Кроме того, при использовании вертикального прибора теплоотдача идет с одинаковой скоростью с обеих поверхностей геля, а это позволяет применять более высокие градиенты напряжения, в результате чего разделение улучшается. Охлаждение геля при помощи рубашек дает возможность еще больше повысить градиент напряжения. [c.71]

Электрофорез в крахмальном геле. Гель готовят из гидролизованного крахмала. Горячий гель заливают в кювету глубиной 5—6 мм, которую закрывают специальной крышкой, устроенной так, что в застывшем геле остается поперечный ряд узких щелей (0,3—0,7 мм). В щели вносят кусочки фильтровальной бумаги, смоченной раствором исследуемого вещества, и проводят одномерный или двумерный электрофорез в горизонтальных или вертикальных установках. Преимущество горизонтального варианта — простота исполнения, вертикального — большая разрешающая сила. [c.147]

Вертикальный электрофорез на крахмальном геле в боратном буфере. Заметна несколько большая подвижность полосы О в сыворотке пуповины, чем в сыворотке взрослого человека, обработанной [c.125]

Разделение группоспецифических веществ осуществляют также с помощью вертикального электрофореза в крахмальном геле [95, 973]. Группоспецифические вещества располагаются при этом в постальбумйновой области. У каждого типа гомозигот группоспецифический белок представлен двумя зонами, причем более медленная зона Gel мигрирует с той же скоростью, что и более подвижная зона G 2. У гетерозигот наблюдаются три зоны [681]. [c.340]

Насыщенный буфером носитель, на который нанесен образец, обычно располагают горизонтально горизонтальный электрофорез) на плоской поверхности изолирующего материала, например плексигласа (рис. 4.1), При горизонтальном Электрофорезе разделение можно проводить на бумаге, ацетате целлюлозы, в гелевых пластинах и в тонком слое, хотя работа с тонкими слоями при более высоких напряжениях требует применения металлических охлаждающих пластин, как при высоковольтном электрофорезе (разд. 4.4.1), Иногда гели и тонкие слои прикрывают пластиной из изолирующего материала, чтобы предотвратить испарение. Для работы с низким напряжением имеется простое оборудование для вертикального электрофореза (рис, 4.2) можно использовать пластины крахмального геля, помещая их вертикально в специальные камеры. [c.120]

Кичин и др. [681, 682] применяли вертикальный электрофорез в пластинах 5%-ного полиакриламидного геля в буфере трис-борат-ЭДТА (pH 8,2). Полученная картина была аналогична той, которую дает вертикальный электрофорез в крахмальном геле. В обоих случаях было выявлено несколько вариантов фенотипов. Дальнейшее уточнение фенотипов группоспецифических веществ было достигнуто с помощью перекрестного иммуноэлектрофореза [239]. Белки, разделенные путем электрофореза в полиакриламидном геле, подвергали затем электрофорезу в агарозном геле, содержавшем антитела к труппоспецифическим веществам. [c.340]

Смитис [1199] предложил использовать для определения фенотипа гаптоглобинов горизонтальный электрофорез в крахмальном геле. Электрофоретические методы этого типа до спх пор широко применяются при повседневных анализах. Вертикальный электрофорез [1200] дает более высокое разрешение, так как он лишен недостатков, присущих горизонтальному электрофорезу (см. гл. I.I0). Однако для определения фенотипов гаптоглобина вполне пригоден и горизонтальный электрофорез. Смитис [1199] рекомендует использовать в качестве разделяющего буфера смесь 30 мМ борной кислоты и 12 мМ NaOH (конечный pH после смешивания с крахмалом равен [c.342]

Азен и Смитис [75] предложили другой подход. Они проводили электрофорез на вертикальных пластинах крахмального геля в буфере трис-НС1 (pH 8,9), содержавшем 2 мМ М5С12 при напряжении 16 В/см [75]. Оба метода давали в основном сравнимые результаты [32]. [c.348]

Анализ изоферментов, проведенный в гомогенатах линий клеток 25 видов, показал, что этот биохимический признак можно использовать для подтверждения вида [11]. Определяя спектры трех изоферментных систем (глюкозо-6-фосфат дегидрогеназы (ГФД), лактатдегидрогеназы (ЛД) и нуклеозидфос-форилазы (НФ)) с помощью вертикального электрофореза в крахмальном геле, можно с высокой степенью надежности оп- [c.120]