Фиксация препаратов

Наиболее полно отражает численность клеток в почве метод прямого подсчета под микроскопом, требующий высокой квалификации исследователя. Для подсчета зародышей методом Виноградского в модификации Шульгиной на предметное стекло наносят определенный объем суспензии, готовят из него мазок на определенной площади, затем мазок фиксируют, красят и подсчитывают под микроскопом количество клеток микроорганизмов. Фиксация препарата не дает возможности выявить- количество жизнеспособных клеток. В какой-то мере этот недостаток можно устранить при использовании метода флуоресцентной микроскопии. [c.141]

При электронно-микроскопическом наблюдении видно, что нуклеоид прокариот, несмотря на отсутствие ядерной мембраны, довольно четко отграничен от цитоплазмы, занимает в ней, как правило, центральную область и заполнен нитями ДНК диаметром около 2 нм. Не исключено, что на выявляемую в электронном микроскопе организацию прокариотной хромосомы большое влияние оказывают условия фиксации препарата. По имеющимся наблюдениям, в живой клетке нуклеоид занимает больше места в цитоплазме. [c.55]

Укрупнение размеров ча стиц может оказаться полезным, облегчая фиксацию препарата в месте введения в организм. [c.40]

В токсикологической лаборатории Института гигиены труда и профзаболеваний АМН СССР для проведения анафазного метода учета хромосомных перестроек используют костный мозг бедренной кости (мелких лабораторных животных), которую извлекают тотчас после обезглавливания животного и помещают в фиксатор, состоящий из трех частей 96° этанола и одной части ледяной уксусной кислоты. После 4-часовой фиксации препарат перемещают сначала в 96° этанол (на [c.260]

После фиксации препарат красят 5%-ным водным раствором малахит-грюн —60 сек, время от времени нагревая до появления слабых паров (3—5 [c.71]

Серьезные помехи в проведении реакции Фельгена иногда создаются под влиянием ядерных белков [13], [17]. Как выяснилось, определенные фракции негистоновых белков клеточного ядра являются ингибиторами реакции Фельгена. Эти белки сравнительно хорошо удаляются при фиксации препарата после замораживания, а также при получении изолированных ядер в сахарозной среде. По нашим данным, главная причина здесь заключается в том, что белковые компоненты блокируют ДНК, участвуя в молекулярной организации компактного хроматина [c.143]

Проведение реакции. Для окраски берут материал, фиксированный 10%-ным нейтральным формалином в течение 3— часов. После фиксации препарат промывают в струе водопроводной воды, затем дистиллированной водой и обрабатывают 1) 1 н. ТХУ при комнатной температуре в течение нескольких минут 2) 1 н. ТХУ при 60° в течение 15 минут (длительность гидролиза подбирается опытным путем) 3) реактивом Шиффа-ТХУ при комнатной температуре в течение 1 часа [c.146]

При исследовании насекомых, погибших от болезни, по гистологическим препаратам можно установить, что определенные ткани в момент фиксации препарата были уже мертвыми, в то время как другие полностью функционировали. У насекомых, не находящихся в диапаузе и поглощающих пищу, разложение тканей тела, приводящее к смерти, всегда начинается с кишечника. Если в кишечнике отсутствует пища и нет микробов, насекомое может оста- [c.27]

Фиксация препарата преследует несколько целей убить микроорганизмы, т. е. сделать безопасным дальнейшее обращение с ни- и обеспечить лучшее прилипание клеток к стеклу сделать мазок более восприимчивым к окраске, так как мертвые клетки окрашиваются лучше, чем живые. Самым распространенным способом фиксации является термическая обработка. Для этого препарат обычно трижды проводят через наиболее горячую часть пламени горелки, держа предметное стекло мазком вверх. Не следует перегревать мазок, так как при этом происходят грубые изменения клеточных структур, а иногда и внешнего вида клеток, например их сморщивание. Для исследования тонкого строения клетки прибегают к фиксации различными химическими веществами (см. Приложение). Фиксирующую жидкость наливают намазок, либо препарат на определенное время погружают в стакан с фиксатором. [c.100]

Для выявления нуклеоида поступают следующим образом. На предметном стекле делают мазок суточной культуры бактерий, высушивают его на воздухе и фиксируют в течение 2—3 мин в парах 2%-ного раствора осмиевой кислоты. С этой целью на дно чашки Петри наносят 2-—3 капли фиксатора, а предметное стекло помещают мазком вниз на обрезки стекла. По окончании фиксации препарат опускают на 2—3 мин в стаканчик с раствором [c.108]

ЮТ 5 МИН в этаноле, регидратируют ЗФР, меняя его два или три раза, и заключают в глицерин, забуференный фосфатами. Фиксация препаратов предотвращает какие бы то ни было изменения в распределении меченых молекул на клеточной мембране. Такие изменения могли бы произойти во время микроскопического исследования, если бы клетки оставались нефиксированными при комнатной температуре. Наш собственный опыт показал, что этот метод весьма удобен для подсчета редко встречающихся клеток, например клеток, связывающих антиген. В этом случае важно не посчитать одну и ту же клетку дважды и такой оплошности легко избежать, если мазок приготовлен штрихами. [c.176]

Оценка числа копий с помощью метода реассоциации в условиях насыщения. А. Отжиг разных количеств препарата Н-меченной цепи клонированного сегмента ДНК с одинаковым количеством фрагментированной денатурированной геномной ДНК (в растворе). Две верхние кривые отражают ситуацию, когда в реакционную смесь добавляли клонированный не радиоактивный сегмент в количестве, эквивалентном одной и двум копиям. Б. Фиксация препаратов денатурированной геномной ДНК в виде пятен на нитроцеллюлозном фильтре (рис. 7.39). После инкубации препаратов с Р-меченной ДНК фильтр промывали и либо получали радиоавтограф (как в данном случае), либо вырезали пятна и подсчитывали число импульсов в каждом из них. [c.342]

Метод Леффлера. Суспензию бактерий наносят на предметное стекло и сушат при комнатной температуре. Допускается фиксация препарата быстрым одноразовым проведением через пламя. Далее препарат обра батывают протравителем в течение 3—5 мин, нагревая его до появления паров, или 15—20 мин при комнатной температуре, потом промывают сильной струей дистил- [c.47]

Для выявления нитрифицирующих бактерий обеих фаз из культуры на гелевых пластинах разработан прием (Е. 3. Теппер), который дает весьма удовлетворительные результаты. В чашку, в которой прошли процессы нитрификации, осторожно вливают дистиллированную воду, бактерии при этом собираются на поверхности воды. Если к поверхности воды прикоснуться чистым обезжиренным предметным стеклом, то на нем остаются нитрифицирующие бактерии. После сушки и фиксации препарата его красят фуксином и рассматривают под микроскопом с иммерсионной системой. [c.117]

Анализ белков вируса UUK показал наличие двух гликопротеинов, основного белка нуклеокапсида и минорных количеств большого белка [184, 185, 251]. Гликопротеины видны как хорошо различимые пустые цилиндрические морфологические единицы длиной 8—10 нм диаметром 10—12 нм и с центральной полостью размером 5 нм [209—211, 250]. Негативное окрашивание и фиксация препаратов UUK глутаральдегидом с последующим применением техники замораживания — скалывания показывает, что поверхностные единицы являются кластерами пептонов — гексонов, уложенных в икосаэдрическую решетку с 7= 12, Р = 3 и расстоянием между гексонами - 12,5—16 нм для окрашенных частиц и 17 нм для замороженных [250]. Анализ трансляции РНК in vitro позволяет предположить, что два гликопротеина происходят из общего предшественника [242]. [c.390]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология