Фибробласты кожи

Дифференциальная диагностика. Сходство клинических и лабораторных данных с другими лизосомными болезнями накопления (например, муколипидозами) позволяет установить окончательный диагноз только на основе исследования конкретных ферментов в лейкоцитах и/или культивируемых фибробластах кожи. [c.396]

Другим синдромом болезни, наблюдаемой у людей, при которой нарушается репарация ДНК, является прогерия — состояние, приводящее к преждевременному старению и многим биохимическим аномалиям, а также к атаксической телеангиэктазии. Фибробласты кожи таких больных в культуре не способны к репарации повреждений типа тех, [c.292]

Это было установлено путем ферментного анализа лейкоцитов и клеток культуры фибробластов кожи больных детей. Механизм токсического действия накапливающихся соединений неизвестен. [c.341]

Гемофилия В Фактор IX Аутологичные фибробласты кожи [c.486]

Если в культивируемые фибробласты кожи (клетки, которые в норме никогда не экспрессируют мышечно-специфичные гены) ввести ген регуляторного белка из миобласта (туо D1), такие клетки приобретают способность к слиянию и другие свойства мышечных клеток (рис. 10-10). Очевидно туо D1 является главным регуляторным белком, который в норме и определяет миобласт . [c.182]

Дефект маркера для распознавания лизосомных гидролаз [1242]. В 1967 г. Де Марс и Лерой обнаружили странные клетки в культуре фибробластов кожи, взятых у [c.37]

Результаты генной терапии можно рассмотреть на конкретном примере. У мальчика, больного гемофилией из-за дефицита девятого фактора свертывания крови, с помощью биопсии были выделены фибробласты кожи и культивированы в клеточной культуре, В эти клетки был введен искусственный вектор, созданный на основе ретровируса и содержащий гены, которые увеличивают активность девятого фактора. Инфицированные клетки были размножены в клеточной культуре и возвращены в организм мальчика подкожно в районе спины и ягодиц. Клетки прижились, в результате была увеличена активность девятого фактора свертывания крови, и симптомы гемофилии у пациента были сглажены. Таким образом, генно-инженерные работы создают подходы к лечению гемофилии человека. [c.74]

Рис 10-10. Иммунофлуоресцентная микрофотография фибробластов кожи куриного эмбриона, превратившихся в клетки мышц при экспрессии в них гена myoDl, которая была вызвана искусственным путем Эти фибробласты выращивали в культуре и за три дня до съемки трансформировали рекомбинантной плазмидной ДНК В состав этой плазмиды входили последовательности, кодирующие белок myoD, которые соединены с промотором/энхансером вирусного происхождения, активным в куриных эмбрионах. Несколько процентов фибробластов включало ДНК и продуцировало белок myoD Эти клетки слились с образованием удлиненных миофибрилл, которые на этой фотографии помечены антителами, выявляющими белок, специфичный для мышц В контрольной культуре, трансфицированной другой плазмидой, мышечные клетки [c.182]

Решение старой загадки синдром Дауна обусловлен трисомией по 21 хромосоме. Предположение Ваарденбурга было окончательно подтверждено весной 1959 г., когда Лежен с соавт. [417] опубликовали результаты изучения хромосом в культивируемых фибробластах кожи от девяти детей с болезнью Дауна. Было исследовано 57 диплоидных клеток. Во всех клетках оказалось 47 хромосом. Авторы описали лишнюю хромосому как маленькую и телоцентрическую . В качестве наиболее подходящего объяснения наличия дополнительной хромосомы было выдвинуто предположение о нерасхождении гомологов в мейозе. [c.38]

Так, например, кольцевая хромосома 13 была обнаружена у 14-месячного ребенка с умственной отсталостью и такими признаками, как микроцефалия, эпикант, широкая спинка носа, выступающие ушные раковины, микрогнатия [382]. В 85% лимфоцитов крови и в 82% фибробластов кожи выявлялось простое кольцо, идентифицированное как 13г (р11 q34). В 7% лимфоцитов и в 6% фибробластов можно было наблюдать двойное дицентрическое кольцо, которое состояло из двух хромосом 13. В 5% лимфоцитов и в 8% фибробластов кольцо отсутствовало, одна метафаза была с двумя сцепленными двойными кольцами, остальные клетки содержали другие аномалии. На рис. 2.40 показана судьба кольцевой хромосомы в митозе. В большинстве случаев кольцо реплицируется и проходит через митоз нормально. Иногда происходит один сестринский обмен и формируется двойное кольцо с двумя центромерами. Двойной сестринский обмен может привести к образованию двух сцепленных колец. В следующей интерфазе двойное кольцо может снова претерпеть один, два или более сестринских обмена, что в свою очередь приведет к двойным сцепленным кольцам или к четверным кольцам. Таким образом, возможно [c.85]

Метаболическая кооперация. Изучение культуры фибробластов кожи дает возможность идентифицировать гетерозиготных носителей мутации Если получить клоны из отдельных фибробластов и определить активность фермента, измерив с помощью радиоавтографии количество поглощаемого клетками гипоксантина, меченного тритием, то оказывается, что примерно у половины клонов активность HPRT нормальная, а у половины фермент дефектен. Однако в культурах фибробластов, которые получены без клонирования, подавляющее большинство гетерозиготных клеток обладали активностью. Очевидно, при контакте клеток, дефектных по HPRT, с нормальными клетками их метаболический дефект подвергается коррекции [1090]. Этот вывод подтверждается опытами, в которых нормальные и дефектные клетки смешивали в одной культуре. Феномен назвали метаболической кооперацией . [c.46]

Первичными клетками называются клетки, полученные от животного и поддерживаемые в культуре вплоть до субкультивирования. Эта глава посвящена описанию методов получения клеток от животных. Что касается человека, то задача получения первичных клеток осложняется необходимостью свести к минимуму наносимый донорам вред. В связи с этим, как правило, используются два типа клеток лимфоциты и фибробла- сты кожи. Лимфоциты (обычно неделящиеся клетки) требуют митогенной стимуляции, для чего используются ФГА или другие растительные лектины. Стимулированные лимфоциты претерпевают несколько делений, после чего гибнут. Фибробласты кожи также имеют ограниченный, хотя и более продолжительный период жизни в культуре (Hayfli k, 1965а), но их редко удается получить в таком же количестве, как лимфоциты. [c.60]

Рестрикционный анализ показывает, что разные штаммы EHV-1 могут принадлежать как субтипу 1, так и субтипу 2. Первый связан с выкидышами у кобыл, хотя выделяют его и из респираторного тракта. Второй относится к вирусам респираторного типа и не связан с выкидышами [21—23]. Вирусы субтипа 1 размножаются во многих культурах. В нашей лаборатории мы обычно используем клетки линии RK13, хотя в других лабораториях предпочитают использовать клетки лошадей (например, эмбриональные фибробласты кожи лошадей). Кроме того, вирусы субтипа 1 успешно размножаются в культурах клеток L-M [24]. Некоторые штаммы субтипа 1 были адаптированы к росту на хомяках [25]. Вирусные изоляты субтипа 2 растут только в клетках лошадей. Используя метод 1, описанный в разд. 2.5.1, можно проводить очистку вирусов обоих субтипов. На рис. 10.7 показаны спектры полипептидов EHV-1 (субтипа 1), BMV, PRV, ВПГ-1 и ВПГ-2. [c.285]

Сущность этой гипотезы состоит в следующем. Мезенхимальные клетки после дифференцировки во время эмбриогенеза в специализированные соединительнотканные клетки (фибробласты кожи, хондробласты, остеобласты, сухожильные клетки, ке-ратобласты) реализуют заложенную в них генетическую программу ( архитектурный план ) на всех этапах и уровнях орга низации соответствующей ткани. [c.120]

В дальнейшем различается были созданы микроматрицы с нанесенными в строгом порядке образцами ПЦР-фрагментов кДНК для сотен и тысяч известных генов человека и других организмов. Часто создают специализированные микроматрицы для анализа экспрессии определенных типов генов контролирующих клеточный цикл, апоптоз, сплайсинг, трансляцию, синтез цитокинов, комплемента, факторов свертывания крови, факторов транскрипции и др. Например, Т. Шенк с сотрудниками (1998 г.), используя четыре микрочипа, содержащих в сумме фрагменты кДНК для 6600 генов человека, изучили на первичной культуре фибробластов кожи человека, как инфицирование цитомега-ловирусом человека влияет на экспрессию этих генов. Оказалось, что данная вирусная инфекция достоверно изменяет (увеличивает или уменьшает) экспрессию 258 генов. [c.55]

В качестве клеток-мишеней для генотерапии также рассматриваются фибробласты кожи, эндотелиальные клетки кровеносных сосудов и др. [c.411]

Выделение вируса. Для выделения оспенных вирусов 0,1 — 0,2 мл исследуемого материала (неразведенного и разведенного 1 10) вводят шприцем на ХАО 11 — 12-дневных куриных эмбрионов. Затем эмбрионы инкубируют в течение 3 — 5 сут при 35 С. Вирус натуральной оспы образует на ХАО мелкие белые, куполообразные оспины. Он обладает низкой патогенностью для куриных эмбрионов, не размножается при температуре выше 38,5 С и характеризуется слабой гемагглютинирующей активностью. Дифференциацию вирусов натуральной оспы и вакцины проводят путем заражения 3 —4-суточных культур перевиваемых линий клеток HeLa, НЕр-2, FL, фибробластов кожи человека и животных при их параллельной инкубации при 35 °С и 39 —40 С (см. табл. 4.3). [c.289]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология