Вирусы, выделение

ШТАММ. Чистая культура микроорганизмов, вирусов, выделенная из одного источника (почвы, воды, растительного или животного организма). Термин Ш. применяется к тем культурам микроорганизмов и вирусов, которые относятся к одному и тому же виду. Выделенные Ш. отличаются своей вирулентностью. Так, при производстве ветеринарных бактериологических препаратов используют уже известные Ш. в целях получения сывороток и вакцин соответствующей активности. Понятие Ш. имеет важное значение при производстве бактериальных удобрений. [c.360]

Некоторые виды опухолей вызываются вирусами. Выделенные из них вирусы инфицируют нормальные клетки и, внося в них свою РНК или. ДНК, трансформируют эти клетки в опухолевые. Первым из таких опухолеродных (онкогенных) вирусов был вирус саркомы Рауса, вызывающий соединительнотканные опухоли (саркомы) у птиц. Он стал важным объектом исследований, так же как и ряд других онкогенных вирусов, открытых позже. [c.426]

Первоначальная информация о структуре вируса гриппа была> получена методом электронной микроскопии. Вирусы гриппа, прошедшие несколько циклов культивирования на хорион-аллантоис-ной мембране куриного эмбриона, выглядят в электронном микроскопе при негативном контрастировании как регулярные структуры диаметром 80—120 нм. Штаммы же вируса, выделенные ог человека или животных и накопленные ограниченной серией пассажей в культуре ткани, демонстрируют более выраженную [c.31]

За редким исключением, эти технические приемы представляют собой надежные методы для генотипирования реассортантных вирусов, полученных в лаборатории. Однако при анализе вирусов, выделенных в естественных условиях, получаемые данные обычно не столь убедительны. Поскольку родительские штаммы точно неизвестны, имеется возможность только определить, какой прототипный вирус содержит сегмент РНК, наиболее близкий определенному сегменту реассортантного вируса. [c.298]

Идентификацию выделенных вирусов проводят с помощью серологических реакций нейтрализации, РСК, РТГА, преципитации в агаре и др. Выбор той или другой реакции связан с особенностями антигенной структуры исследуемого вируса. Выделение вируса и его идентификация требуют сравнительно много времени от 7—10 до 30 дней и более. Это объясняется тем, что во многих случаях приходится 2—3 раза пассировать вирус в культуре клеток для его накопления (слепые пассажи). Поэтому особое значение для ускорения проведения анализов имеет иммунофлюоресцентный метод, позволяющий в некоторых случаях обнаружить и идентифицировать вирус в исследуемом материале в течение 30—60 мин. [c.230]

Астахова A. B. Некоторые биологические и физико-химические свойства вируса, выделенного из культуры клеток почек куриного эмбриона // Вопр. вирусологии. [c.123]

К этой же группе был отнесен ряд вирусов, выделенных в [c.266]

Чтобы установить и поддерживать персистентную инфекцию, следует нейтрализовать нормальное цитопатическое действие вируса при этом резко снижается его способность реплицироваться. Персистентная инфекция может запускаться стандартным вирулентным вирусом, если его репликацию подавить предварительной обработкой клеток интерфероном или заражать им совместно с большим количеством ДИ-частиц. Поддержание персистентной инфекции коррелировало со многими факторами, которые варьировали в разных линиях, но все, без исключения, снижали уровень репликации вируса. И ДИ-частицы, и интерферон важны не только для установления, но и для поддержания персистенции. Тем не менее обнаружилось, что главную роль в поддержании персистенции играет отбор мутантов. В целом вирусы, выделенные из персистентно зараженных клеток, существенно отличаются от тех, которые использовали для заражения. Как правило, VSV, выделенные из персистентно зараженных клеток, образуют мелкие бляшки, реплицируются хуже, чем родительский штамм, и приобретают /s-фенотип. Хотя в ходе долговременной персистенции в вирусном геноме могут накапливаться сотни мутаций, отбору подвергаются мутанты с фенотипом РНК , пока такой фенотип не становится преобладающим в вирусной популяции. Такие мутанты способны вызывать персистентную инфекцию при переносе в незаражен-ную культуру даже в отсутствие интерферона или ДИ-частиц. [c.442]

Номер опыта Исходное содержание Выделение вирусов, Выделение вирусов, [c.339]

При групповом разделении методом гель-фильтрации удается в значительной мере избежать разбавления, если учитывать объемные соотношения, подробно рассмотренные в разделе Обессоливание . При очистке суспензии вируса (выделенного из столовой свеклы) от сопутствующих пигментов путем гель-фильтрации на 4—6-кратном (по отнощению к объему образца) объеме сефадекса 0-75 разделение составляло лишь 20—30% [14]. Свободные от белков катехоламины — адреналин и норадреналин — были выделены без разбавления из 20 мл сыворотки (27% объема колонки) гель-фильтрацией на сефадексе 0-25 (2X25 сж, 78 мл) [15]. Кислюк [16] показал, что с помощью гель-фильтрации на сефадексе 0-50 удается гораздо легче отделить фермент от его кофакторов, чем с помощью диализа. Таким путем удается получить кофакторы в сравнительно небольшом объеме и изучить эффект их вторичного присоединения к ферменту. После гель-фильтрации был выделен совершенно неактивный белок, активность которого вновь восстанавливалась (до 86% исходной) после добавления низкомолекулярной фракции. При диализе активность фермента снижалась только до 38% [16]. Групповое разделение гель-фильтрацией оказалось чрезвычайно удобным методом отделения низкомолекулярных антигенов от антител. Диссоциацию комплекса антиген — антитело часто осуществляют, добавляя избыток гаптена, который затем можно легко отделить от белка гель-фильтрацией [17]. В бактериологии гель-фильтрация на сефадексе 0-75 или биогеле Р-100 может служить для удобного выделения экстрацеллюлярных токсинов. Перед засевом культуральную среду освобождают от высокомолекулярных примесей гель-фильтрацией. Затем на той же колонке после удаления бактерий можно вновь отделить высокомолекулярные токсины от культуральной среды [18]. [c.142]

Френкель-Конрата по получению вирусов-гибридов. Были взяты два вируса вирус табачной мозаики и вирус, выделенный пз подорожника. И. обоих вирусов были получены РНК п белки. Затем были реконструированы те же самые вирусы путем соединения вновь РНК с белком. Полученные вирусы вызывали обычное заражение, свойственное каждому из исходных вирусов. [c.78]

Позднее А. Херши и М. Чейз повторили и подтвердили эти эксперименты с помощью метода меченых атомов. При осмотическом шоке ДНК действительно выходила из вирусов. Она оставалась в растворе, где ее можно было идентифицировать как ДНК, но легко расщеплялась ферментами, утратив свою защитную белковую оболочку. Что касается белковой оболочки вируса, выделенной из раствора и помещенной в культуру бактерий, то она обнаруживала неизменную способность нападать на бактерии и убивать их. Она сохранила также способность реагировать с антивирусной сывороткой. [c.140]

И ДПК-, и РПК-содержащие вирусы (в частности, ретровирусы) могут участвовать в трансформации нормальной клетки в опухолевую. Это можно экспериментально продемонстрировать как на лабораторных животных (у которых некоторые вирусы способны вызывать рак), так и в культуре клеток, где те же вирусы изменяют поведение инфицированных клеток. Эти клетки приобретают способность к делению в условиях, при которых нормальные клетки делиться не могут (см. разд. 13.4.1, где перечислены свойства неопластически трансформированных клеток в культуре). Два интенсивно изучаемых примера таких вирусов - это 8У40 (ДПК-содержащий вирус, выделенный из клеток обезьяны) и вирус саркомы Рауса - куриный ретровирус. Сложнее обстоит дело с ролью вирусов в развитии рака у человека среди множества причин, приводящих нрактически ко всем известным видам раковых заболеваний человека, вирусы не фигурируют. Возможно, от многих вирус-индуцированных опухолей нас защищает иммунная система, разрушающая инфицированные вирусами клетки, которые могли бы стать источником опухолей. Тем не менее сейчас имеются веские доказательства того, что причиной возникновения некоторых типов рака человека являются вирусы (табл. 21-3). Они могут оказывать либо непрямое промоторное действие, либо способствовать неопластической трансформации инфицированных клеток. [c.466]

Хотя обычно считается, что вирусы гриппа С, подобно вирусу гриппа В, обнаруживаются только у человека, недавно появилось сообщение о выделении вируса гриппа С от свиней на скотобойне в Бейджинге (Китай) [40]. В тестах перекрестной нейтрализации и РТГА было выявлено, что вирусы, выделенные от свиней, являются вирусами гриппа С, отличающимися от референс-штамма С/1233/47. У 19 из 100 обследованных свиней имелись отчетливые титры антител в РТГА к вирусу гриппа С. Это сообщение свидетельствует, что свиньи могут служить природным резервуаром для вируса гриппа С человека. [c.292]

У нтиц разных видов патогенез инфекций, вызванных птичьими вирусами гриппа, различается в значительной степени, проявляясь от бессимптомной инфекции желудочно-кишечного тракта у водоплавающих до летального диссеминированного процесса у цьшлят и индюков [18]. Вирусы, выделенные из содержимого же-лудочно-кишечного тракта пли из фекалий уток, имели разнообразные подтипы НА и NA в настоящее время недостаточно данных, чтобы связать адаптацию вирусов гриппа к тканям желудочно-кишечного тракта с отдельными генами или набором генов этих вирусов. [c.301]

Вирусы гриппа — это содержащие однонитевую РНК оболочечные вирусы, вызывающие серьезные эпидемические заболевания человека и многих видов животных, в частности лошадей, свиней, тюленей и домашней птицы. Известны три типа данных вирусов, выделенные на основании различий между нуклеокап-сидами в реакции связывания комплемента они отличаются также по биохимическим и биологическим свойствам. Вирусы типа А, способные к быстрым и резким изменениям антигенных свойств (антигенный дрейф), являются главной причиной пандемий гриппа человека поэтому они исследованы наиболее подробно. Большинство методов выращивания, очистки и титрования вирусов гриппа разработаны именно для вирусов этого типа. Вирусы типа В, хотя и не способны к антигенному дрейфу, по всем остальным биохимическим и биологическим свойствам очень близки к вирусам типа А поэтому их, как правило, можно выращивать и титровать, пользуясь теми же методами. С другой стороны, вирусы типа С по своим биохимическим свойствам весьма далеки от вирусов типов А и В соответственно они имеют и другие ростовые свойства. Поскольку вирусы этого типа изучены намного хуже, чем другие, в настоящей главе основное внимание уделено методам, разработанным для вирусов типов А и В, в особенности тем, с которыми авторы знакомы по собственному опыту. Тем не менее большинство этих методов применимы и к вирусам типа С. Данная глава представляет собой практическое руководство, и соответственно теоретические основы методов, как правило, не рассматриваются. При необходимости упоминаются некоторые биологические особенности вирусов и даются ссылки на соответствующую литературу однако полное описание этих свойств можно найти в недавно опубликованных подробных обзорах [1—3]. [c.161]

Принимая во внимание сложный механизм гибели клетки при рабдовирусной инфекции, кажется вероятным, что персистентная инфекция отражает не нарушение специальной летальной функции вируса, а угнетение вирусных функций ниже уровня, необходимого для гибели клетки. До сих пор непонятно, почему в популяции вирулентного вируса отбору подвергаются частицы, дефектные по репликации. Хотя вирусы, выделенные при персистентной инфекции, чувствительны к температуре, клеточные культуры обычно ведутся при температурах, полностью пермиссивных для вирусов дикого типа и лишь полупер-миссивных для /s-мутантов. Тем не менее такие мутанты распространяются в культуре. Эксперименты по коинфекции показали, что /s-мутанты VSV способны подавлять репликацию вируса дикого типа, ж то время как репликация самих мутантов лишь усиливается [50]. Эти результаты объясняют, почему /s-мутанты поддерживаются в популяции и даже пользуются [c.442]

Одной из задач изучения молекулярной организации вирусов является исследование свойств белковых субструктур, т. е. элементарных молекул белков, из которых построена оболочка вируса. Выделение белковых субъединиц вируса проводят в условиях, при которых не изменяется первичная структура полипеитидной цепи. При этом необходимо получать гомогенные препараты, пригодные для аналитических исследований. В то же время вполне допустимы незначительные или обратимые изменения вторичной и третичной структуры (разрыв некоторых связей). Это, вероятно, основное условие, иа которое необходимо обратить внимание при выделении вирусного белка. Изменения, вследствие которых наступает денатурация, приводят белок в нерастворимое состояние, и дальнейшая работа с такими белковыми препаратами становится невозможной. [c.168]

Недавно Листер (личное сообщение) сообщил, что различные растения-хозяева могут избирательно поддерживать репликацию частиц среднего компонента отдельных штаммов вируса погремковости табака в том случае, когда их инокулируют совместно. Листер заражал разные растепия эквивалентными количествами слабого и сильного Орегонского штамма, а затем определял, какая часть общего количества частиц среднего компонента продуцируется каждым штаммом. Например, в препарате вируса, выделенного из N. levelandii, частицы среднего компонента составляли 71% из них 63% приходилось иа долю слабого штамма и 8% — на долю сильного. В случае Petunia hybrida частицы среднего компоиента составляли 59% . из них на долю слабого штамма приходилось 33 %, а пэ долю сильного — 26%. [c.200]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология