Фермент щелочная фосфатазаХ

Второй пример касается выработки фермента щелочной фосфатазы у кишечной палочки. Щелочная фосфатаза у этого микроба вырабатывается только тогда, когда в среде нет необходимых количеств неорганического фосфата. Функция щелочной фосфатазы [состоит в том, чтобы производить неорганический фосфат, когда его нет в среде в готовом виде, за счет отщепления его от различных органических соединений. Наоборот, при накоплении неорганического фосфата синтез фермента, за ненадобностью , прекращается. Регуляция синтеза этого белка-фермента оказалась следующей. Для цистрона-оператора и структурного цистрона, ответственных за синтез щелочной фосфатазы, имеется свой цистрон-регулятор. Однако этот цистрон-регулятор вырабатывает репрессор, который непосредственно не действует на цистрон-оператор и не может его закрыть. При этом цистрон-оператор открыт и благодаря этому структурный цистрон вырабатывает информационную РНК, которая является матрицей для синтеза белка-фермента щелочной фосфатазы, вследствие чего фермент продуцируется непрерывно. Однако, если во внешней среде появился неорганический фосфат, то он, взаимодействуя с репрессором, его активирует. Активированный репрессор начинает действовать на цистрон-оператор и, следовательно, на структурный цистрон, прекращая его деятельность, и в результате всего этого прекращается образование щелочной фосфатазы. [c.94]

Б. Индикаторный фермент — щелочная фосфатаза [c.291]

I, 2 - трансмембранные белки, пример гликофорин, рецептор адреналина 5 — связывание с белками, погруженными в бислой, пример фермент митохондрий — сукцинатдегидрогеназа 4 — связывание с поверхностью бислоя, пример миелиновый основной белок 5 - заякоривание с помощью короткого концевого домена, пример цитохром Ьз 6 — заякоривание с помощью кова-лентно-связанного липида, пример фермент щелочная фосфатаза. [c.98]

При катализе ферментами химической реакции может реализоваться любой из вышеприведенных механизмов катализа. Например, имидазольное кольцо остатка гистидина в ферменте а-химотрипсии (разд. 4.4) способно играть роль обгдеосновного катализатора, тогда как в ферменте щелочная фосфатаза тот л<е остаток может действовать в качестве нуклеофильного катализатора. Действительно, ферменты — это сложные катализаторы, в ходе действия которых реализуется несколько механизмов. Именно благодаря успешному сочетанию разных каталитических процессов скорость катализируемой реакции повышается в Ю раз (по сравнению со скоростью некатализируемой реакции). Более того, именно такая комбинация факторов приводит к специфическому катализу. [c.195]

Наиболее часто в качестве меток используют два фермента —щелочную фосфатазу (ЩФ) и пероксидазу хрена (ПХ). Выбор зависит от возможности оптического детектирования превращения субстратов этих ферментов и от легкости соединения фермента без потери активности. Щелочная фосфатаза представляет димерный гликопротеин с молекулярной массой 140 ООО, содержаний много свободных аминокислот для соединения. Аналогично пероксидаза хрена содержит четыре лизнновых остатка для соединения и имеет молекулярную массу 44000. В некоторых случаях для соединения можно использовать углеводные остатки. [c.594]

Добавляют биотинилированный фермент — щелочную фосфатазу или пероксидазу хрена (рис. 9.4, В). [c.190]

Ингвал и др. [324] применилн принцип радиоиммуноанализа, описанный для определения кроличьего иммуноглобулина G однако вместо меченных радиоактивным изотопом антигенов они конъюгировали последние с ферментом — щелочной фосфатазой. Основой конкурентного иммуноаналнза является разделение свободных и связанных с антителами антигенов, так чтобы антигены можно было определить количественно. Это разделение можно облегчить фиксацией антител на твердой фазе путем физической сорбции на стенках полистирольных пробирок. [c.382]

Используя различные фосфорные эфиры в качестве субстратов для фермента щелочной фосфатазы, можно изменять силу связи в субстратах и таким образом проверять, будет ли расщепление идти в точках, предсказанных теорией. В глюкозо-1-фосфате связь гли-козил — кислород слабее, чем связь Р — О, и поэтому, согласно [c.73]

Таким же методом были определены другие ферменты щелочная фосфатаза [115], фосфогексозоизомераза [146], холинэстераза [172] и трансаминазы [48]. [c.57]

Обратная картина наблюдается у фермента щелочной фосфатазы из Е. соИ. Этот белок состоит из двух одинаковых субедипиц, и тогда он активен. Но стоит разделить оба блока друг от друга (с помощью изменения pH в щелочную сторону), и ферментативная активность падает до нуля. Особенно интересны случаи, когда белковые частицы бифункциональны, т. е. имеют по две группы, способные соединяться друг с другом. Тогда происходит полимеризация белковых глобул и образуются белковые волокна. Два очень ярких примера подобного рода представляют белки мышцы — [c.115]

Для проявления иммуноблотов используют и другой индикаторный фермент — щелочную фосфатазу (фосфогидролазу моноэфиров фосфорной кислоты, КФ 3.1.3.1) (Turner, 1983 O onner, 1982). В работе (Muilerman et al., 1982) описано также использование и визуализация фосфодиэстеразы I из печени крысы (КФ 3.1.4.1), как нативной, так и обработанной ДСН, в сочетании с двухцентровым иммуноанализом. Авторы этой работы предлагают интересные возможности ферментативного окрашивания зон после переноса (с использованием неочищенной антисыворотки против индикаторного фермента) для смесей белков, денатурированных ДСН. [c.362]

Еще в 1975 г. в работе [16] было предложено в биосенсоре фосфат-иона использовать комбинацию ингибируемого фосфатом фермента, щелочной фосфатазы, и GOD. Аналогичный подход использовали при создании фосфатного сенсора, который легко [c.270]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология