Люминесцентная (флуоресцентная) микроскопия

Люминесцентный химический анализ, или, правильнее, флуоресцентный анализ, основан на вынужденной люминесценции различных химических соединений под действием облучения их растворов кварцевой лампой как источником ультрафиолетовых лучей. В аналитической химии применяют также люминесцентные индикаторы, люминесцентную хроматографию и люминесцентный микроскоп. [c.480]

Флуоресцирующую антисыворотку ( конъюгат ) и флуоресцирующую нормальную сыворогку растворяют в воде. Готовят несколько порций флуоресцирующей антисыворотки, разбавляя ее каждый раз вдвое (например, 1 5 1 10 1 20 1 40 1 80) в фосфатном буфере с добавлением Na l [фосфатно-солевой буфер (ФСБ), см. разд. 20.4.17]. При каждом разведении антисыворотки с помощью метода окрашивания, описанного ниже, а также с помощью подходящего флуоресцентного (люминесцентного) микроскопа (разд. 1.4) определяют степень флуоресценции бактериальных клеток по шкале О, 1-Ь, 2 +, З-Ь, 4+ (максимум). Рабочее разведение антисыворотки составляет /2 максимального разведения, которое дает степень флуоресценции 4 +. Например, если максимальная степень флуоресценции 4-Ь достигается при разведении сыворотки 1 20, то рабочее разведение равно 1 10. Эквивалентное разведение флуоресцирующей нормальной сыворотки пе должно давать флуоресценции. [c.67]

ЛЮМИНЕСЦЕНТНАЯ (ФЛУОРЕСЦЕНТНАЯ) МИКРОСКОПИЯ [c.18]

Применение. В гистологии, бактериологии, ботанике, в частности в гистологии насекомых, как краситель для флуоресцентной микроскопии, а также 8 качестве витального красителя. Может быть использован в ветеринарной микробиологии для люминесцентной микроскопии туберкулеза и паратуберкулеза. [c.64]

Люминесцентный микроскоп. Для наблюдения люминесцирующих кристаллических веществ можно пользоваться люминесцентным (флуоресцентным) микроскопом ". Этот прибор представляет собою обычный микроскоп, снабженный соответствующим осветителем (ртутной лампой) и светофильтрами, задерживающими видимые лучи света, но пропускающими ультрафиолетовые лучи. [c.34]

Применение. В микроскопии для качественного и полуколичественного определения белка в срезах тканей для флуоресцентной метки белков для получения люминесцентных сывороток с зеленым свечением. [c.147]

Применение. В обычной и флуоресцентной микроскопии для выявления нуклеиновых кислот и кислых мукополисахаридов в клеточных и тканевых структурах. В гистохимии в качестве флуорохрома для выявления муцина [2] и нуклеиновых кислот. При исследовании нефиксированных тканей с помощью флуоресцентного микроскопа в сиЕзем свете ядра (ДНК) окрашиваются в зеленый цвет, нуклеиновые кислоты (РНК) ядрышек и цитоплазмы — в красный, волокнистая соединительная ткань окрашивается в зеленый цвет [3, 4]. В бактериологии в качестве флуорохрома для диагностики туберкулеза [5]. В гельминтологии для выявления трихомонад методом люминесцентной микроскопии [OJ. Для прижизненной окраски ядра живая клетка во флуоресцентном микроскопе дает зеленое свечение, мертвая — медно-красное [7, 8]. [c.17]

Применение. В флуоресцентной микроскопии в качестве красителя и для окрашивания ядер. В качестве дополнительного красителя для контрастирования люминесцентно-микроскопической картины. Составная часть красителя Грейфсвальдера. Как сенсибилизатор в фотографии. [c.208]

МЫ приготовляем его раствор в ацетоне в концентрации 5 мг/мл и храним при —20°С во флаконе, закрытом фольгой. Перед опытом мы этот основной раствор разбавляем в 100 раз физиологическим раствором и 10 мкл его прибавляем к клеточной суспензии.) Флуорохромированную суспензию помещаем в счетную камеру и подсчитываем живые флуоресцирующие клетки в люминесцентном микроскопе. Обычно пользуются стандартным флуоресцентным микроскопом с опак-иллюминатором (освещение сверху через объектив) и соответствующими возбуждающими и запирающими фильтрамиЖизнеспособными обычно остаются от 10 до 50% исходных отвечающих клеток. Эти живые лимфоциты называют примнрованными отвечающими клетками (ПОК). [c.250]

Метод флуоресцентной микроскопии. Флуорес-цин диацетат растворяют в ацетоне (10 мг в 5 мл) и две-три капли добавляют к нескольким мл 10%-го раствора сахарозы (для злаков—30%), до появления молочного оттенка. Наносят раствор сахарозы на предметное стекло, проводят посев пыльцы, накрывают покровным стеклом и изучают препарат под люминесцентным микроскопом с голубыми фильтрами в течение 10 мин. Живые пыльцевые зерна флуоресцируют. Этот метод предложили Дж. и И, Хеслоп-Харрисоны в 1970 г. [c.215]

Методом мениска цветовую интенсивность цветного пенетранта и световую интенсивность люминесцентного пенетранта характеризуют минимальной, еще выявляемой, толщиной цветового или флуоресцентного слоя. На обезжиренную ровную стеклянную плитку наносится 1-2 капли пенетранта, сверху накладывается выпуклая линза малой кривизны, линза легко прижимается. Белое пятно, которое образуется на месте контакта, рассматривается и измеряется под просвечивающим микроскопом при нужном увеличении. Если контуры белого пятна размыты, то проводится измерение светопро-пускания от точки к точке с помощью спектрального микрофотометра. В случае люминесцентных пенетрантов осуществляется боковое облучение УФ-светом, причем интенсивность облучения нормируется и должна составлять 500 мкВт/см . [c.628]

Люминесцентная микроскопия в сочетаний с методикой флуоро-хромирования с успехом используется для дифференциации микроколоний на мембранных фильтрах.. При этом исследуемая вода фильтруется через мембранные фильтры № 3, которые помещаются на плотные питат ьные среды, применяемые для вьфащивания патогенных или санитарно-показательных микроорганизмов. После выращивания в термостате в течение 6—8 часов фильтры снимаются с поверхности среды и окрашиваются в течение 5 минут раствором акридина оранжевого 1 5 ООО. С этой целью на крышку чашки Петри наносят 3—5 капель раствора флуоресцентного красителя и на них помешают фильтр нижней его поверхностью. Послё [c.164]

Флуорохромы (люмогены) используют отнюдь не только в люминесцентной микроскопии их с успехом применяют и во многих других случаях, например для получения флуоресцентных адсорбентов при хроматографировании бесцветных и нелюминесцирующих соединений. Зоны вен ества на хроматограмме обнаруживают по отсутствию люминесценции адсорбента в тех местах, где вследствие абсорбции веществом возбуждающего излучения адсорбент не люминесцирует. Брокман и Байер [31 ] рекомендуют морин для покраски адсорбента, но только если хроматографируют на окиси алюминия, на окиси магния или на карбонате кальция если адсорбент — кремнезем, пользуются берберином применение натриевой соли 3-оксипирен-5,8,10-трисульфокислоты для покраски подкисленной соляной кислотой окиси алюминия (80 мг на 1 кг) позволяет выявлять вещества, спектр поглощения которых простирается в область коротких длин волн. В другой работе [32] описан метод получения твердых флуоресцентных колонок их преимущество в отсутствии стеклянных стенок, препятствующих выявлению зон вещества, спектр поглощения которых лежит в той же области длин волн, где поглощает стекло (230 — 290 ммк). [c.74]

Применение. В молекулярной биологии в качестве флуоресцентного красителя длй метки белков 1—3]. В иммунологии для приготовления люминесца-рующих сывороток [4]. Глобулины иммунных сывороток, соединенные прочной химической связью с красителем, обладают зеленой люминесценцией. Такие сыворотки специфически реагируют с соответствующими антигенами (бактериальными, вирусными, тканевыми и др.) и легко выявляются методом люминесцентной микроскопии [c.420]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология