Микроскопия флуоресцентная

Набор красителей для флуоресцентной микроскопии [c.580]

Определение общего количества бактерий в почве с использованием метода флуоресцентной микроскопии (в модификации Звягинцева). Метод основан на контрастной окраске почвенных частиц и клеток микроорганизмов в флуоресцентном микроскопе. [c.162]

Люминесцентный химический анализ, или, правильнее, флуоресцентный анализ, основан на вынужденной люминесценции различных химических соединений под действием облучения их растворов кварцевой лампой как источником ультрафиолетовых лучей. В аналитической химии применяют также люминесцентные индикаторы, люминесцентную хроматографию и люминесцентный микроскоп. [c.480]

Наиболее полно отражает численность клеток в почве метод прямого подсчета под микроскопом, требующий высокой квалификации исследователя. Для подсчета зародышей методом Виноградского в модификации Шульгиной на предметное стекло наносят определенный объем суспензии, готовят из него мазок на определенной площади, затем мазок фиксируют, красят и подсчитывают под микроскопом количество клеток микроорганизмов. Фиксация препарата не дает возможности выявить- количество жизнеспособных клеток. В какой-то мере этот недостаток можно устранить при использовании метода флуоресцентной микроскопии. [c.141]

Волоконная оптика позволяет прочитывать в ДНК-чипах последовательности мономеров в молекулах нуклеиновых кислот и моментально определять активность тех или иных генов. Интересующие исследователей цепочки ДНК или РНК помечают флуоресцентными метками. Затем, освещая чип лазером, можно в микроскоп наблюдать местонахождение светящегося участка и тем самым определять последовательность нуклеотидов в данной цепочке. Эта методика из года в год продолжает усовершенствоваться, и одним из наиболее интенсивно развиваемых в последние годы подходов стало использование световодов. [c.156]

С помощью конфокальной флуоресцентной микроскопии исследована кинетика накопления и локализации полученных соединений в раковых клетках. Показано, что в зависимости от природы заместителей при атоме азота сенсибилизаторы могут концентрироваться при различных клеточных органеллах ядре клетки, митохондрии или аппарате Гольджи. [c.17]

КРАСИТЕЛИ ДЛЯ ФЛУОРЕСЦЕНТНОЙ МИКРОСКОПИИ [c.642]

ЛЮМИНЕСЦЕНТНАЯ (ФЛУОРЕСЦЕНТНАЯ) МИКРОСКОПИЯ [c.18]

К физическим методам относятся методы экстракции, поляризационная микроскопия, флуоресцентная микроскопия, окрашивание жирорастворимыми красителями. [c.146]

Наиболее детально изучено распределение в слоях клеточной стенки лигнина и целлюлозы. При этом использовались окрашивание реактивами, растворение полисахаридов в кислотах, выделение отдельных слоев клеточной стенки микроманипулятором и их химический анализ, ультрафиолетовая и флуоресцентная микроскопия. [c.319]

Ясно, что молекулы в компактной или разреженной конформациях обладают подвижностью, отличной, например, от подвижности молекул вытянутой формы. Конформации можно наблюдать с помощью лазерной флуоресцентной микроскопии. [c.104]

Конформации, показанные на рис. 103, можно наблюдать методом лазерной флуоресцентной микроскопии. [c.105]

Методами флуоресцентной и атомно-силовой микроскопии изучается фазовая структура пленок смесей полимеров, сформированных из раствора [6]. Например, при изучении пленок смеси полистирола и полиметилметакрилата, полученных испарением растворителя (толуола) из 4 %-ного раствора смеси, обнаружено, что морфология слоя пленки, расположенного на границе с воздухом, существенно зависит от скорости испарения растворителя. Когда растворитель медленно удаляется из пленки, на поверхности появляются практически монодисперсные и равномерно распределенные в плоскости поверхности частицы полиметилметакрилата. За этой плоскостью расположен слой толщиной около 18 мкм, практически свободный от ПММА. При быстром испарении растворителя пленка состоит из случайно распределенных полидисперсных частиц ПММА. [c.576]

В электронном микроскопе вместо светового излучения используется пучок ускоренных электронов. Изображение изучаемого объекта наблюдается на флуоресцентном экране или фиксируется фотографическим способом. Увеличение в электронном микроскопе примерно на два порядка выше, чем у оптических микроскопов, и достигает 10 . . 10. Разрешающая способность в зависимости от техники исследования может составлять от 6... 10 нм до 0,2.. 0,5 нм. Это позволяет изучать разнообразные надмолекулярные образования у синтетических полимеров, фибриллярную структуру целлюлозосодержащих клеточных стенок древесины и других растительных тканей, ультраструктуру волокнистых полуфабрикатов целлюлозно-бумажного производства. [c.144]

При окрашивании почвы раствором акридина оранжевого почвенные частицы в флуоресцентном микроскопе выглядят красными, а клетки микроорганизмов — зелеными. Метод дает возможность подсчитывать не только свободные клетки, но н клетки в микроколонии, адсорбированные на поверхности почвенных частиц и микроагрегатов, а также рассматривать вегетативные клетки, клетки в состоянии спор и частично дифференцировать живые и мертвые клетки. Водоросли и содержащие хлорофилл микроорганизмы рассматривают в флуоресцентном микроскопе без окрашивания почвенной суспензии, так как пигмент сам обладает интенсивной красной флуоресценцией. [c.162]

В микроскопии. Акридиновые краски, например фосфин и акридиновый оранжевый, применяются не только в флуоресцентной микроскопии, но также в микроскопических исследованиях, особенно при распознавании свободных и связанных нуклеиновых кислот [311]. [c.423]

Красильников Н. А., Бехтерева М. Н. Применение метода флуоресцентной микроскопии для распознавания живых и мертвых клеток актиномицетов,— Микробиология , 1956, К 3, с, 279—285, Кузнецов С. И., Романенко В. И. Микробиологическое изучение внутренних водоемов. Лабораторное руководство, М,—Л,, Изд-во АН СССР, 1963, [c.257]

Флуоресценцию наблюдают в темнопольном микроскопе флуоресцентной приставкой. Ядра, содержащие Т-антиген, имеют желто-зеленую окраску и темные ядрышки (рис. 8.7). Позднее (через 36—48 ч после начала инфекции) Т-антиген локализуется уже не только в ядрах, но и в цитоплазматических включениях. В качестве контроля исследуют неинфициро-ванные культуры, обработанные флуоресцирующей антисывороткой, для исключения неспецифической флуоресценции. При подсчете положительных клеток учитываются только те, в которых четко видны окрашенные ядра. Мертвые клетки обычно дают высокий уровень неспецифической флуоресценции. [c.244]

Д. Г. Звягинцев (1966) рекомендует микроорганизмы в флуоресцентном микроскопе подсчитывать следующим образом. [c.162]

В идеальных условиях (высокие значения квантовых выходов люминесценции, молярных коэффициентов поглощения, отсутствие поправки на контрольный опыт и др.), даже применяя в качестве источника возбуждения лампы, удается достичь пределов обнаружения на уровне пикограммов в миллилитре. В модельных экспериментах с родамином 6Ж, сорбированном на отдельных частицах кремнезема диаметром 10 мкм, при использовании флуоресцентного микроскопа с лазером в качестве источника возбуждения излучения удалось определить 8000 молекул красителя ( 6 -10" г), сорбированных на индивидуальной частице. [c.298]

Схема автоэлектронного микроскопа очень проста (рис. V-19) [П1]. Острие из тугоплавкого металла, например вольфрама, тщательно (и часто безуспешно ) подвергается электрополировке до образования почти полусферического кончика радиусом около 10 см. Между этим острием и полусферическим флуоресцентным экраном создается разность потенциалов примерно в 10 000 В. Если радиусы кривизны острия и экрана равны а и 6, то поле Fa на кончике можно рассчитать следующим образом. Напряженность поля F убывает обратно пропорционально квадрату расстояния, поэтому F должно быть равно kr- . Суммарную разность потенциалов между кончиком и экраном можно записать как [c.231]

Если 1/Ь пренебрежимо мало по сравнению с 1/а, то k = aV и Fa —V/a. Таким образом, в данном случае Fa составляет 10 В/см. Эта очень высокая напряженность поля эквивалентна 10 В/А. Ее достаточно для того, чтобы вытянуть электроны из металла и затем направить их с ускорением по радиальным линиям к флуоресцентному экрану. Центрами эмиссии здесь служат отдельные атомы. Различные грани кристалла сильно отличаются по эмиссионной способности, так как она зависит от плотности упаковки и работы выхода. Поскольку коэффициент усиления Ь/а очень велик (порядка 10 ), то, казалось бы, на экране можно увидеть отдельные атомы. На практике, однако, разрешение ограничивается кинетической энергией движения электронов в металле под прямыми углами к направлению эмиссии и достигаемое разрешение составляет около 30—50 А. Тем не менее в электронном микроскопе видны удивительные картины различные кристаллические плоскости, [c.231]

Применяя различные сочетания увеличений микроскопа с площадью квадратов окулярной сетки и ходом тубуса, можно осуществлять счет бактерий в довольно широком диапазоне их концентрации в суспензии (от 5-10 до 5-10 клеток/мл) без предварительного разведения. Сочетание этого метода с флуоресцентной микроскопией позволяет одновременно учитывать живые и мертвые бактериальные клетки. При проверке метода па суспензии В. зиЬ Из ошибка счета составила 0,59. [c.88]

VII. Автоэлектронная (АЭМ) и автоионная (ЛИМ) микроскопия приобрели за последние годы большое значение д.чя исследования структуры поверхностей. Принцип методов заключается в создании поля очень высокой напряженности (>10 В/см) между полированным металлическим острием и флуоресцентным экраном. Такие поля вырывают электроны (АЭМ) из атомов, составляющих острие, посылая их радиально к экрану в методе-АИМ на острие подается положительный заряд, и приближающаяся молекула газа (обычно Не, находящийся в сверхвысоковакуумиой камере) ионизируется и посылается на экран. В таком ионном микропроекторе разрешающая способность составляет десятые доли нм. На рис. IX. 1 светлые пятна — отдельные атомы вольфрама, располагающиеся в соответствии с геометрией плоскостей вольфрамового острия. [c.140]

Колонна микроскопа (от электронной пушки до флуоресцентного экрана) откачивается до высокой степени разрежения (10-5 мм рт. ст.) с помощью ротационного и маслянодиффузионного насосов, предотвращая таким способом сильное рассеяние электронов воздухом. [c.102]

Фенил-акридииовый оранжевый хлоргидрат предложен для применения в качестве красителя в флуоресцентной микроскопии при определении липоидов. Его получают циклизацией 2,2 -диамино-4,4 -бис- (диметиламнио) -трифенилметана с последующим окислением образовавшегося лейкооснова-ния красителя [1—3]. Исходное соединение получают конденсацией бензальдегида (1 М) с л -аминодиметиланилином (2 М) в спиртовой среде в присутствии соляной кислоты [1—3]. [c.121]

Методом мениска цветовую интенсивность цветного пенетранта и световую интенсивность люминесцентного пенетранта характеризуют минимальной, еще выявляемой, толщиной цветового или флуоресцентного слоя. На обезжиренную ровную стеклянную плитку наносится 1-2 капли пенетранта, сверху накладывается выпуклая линза малой кривизны, линза легко прижимается. Белое пятно, которое образуется на месте контакта, рассматривается и измеряется под просвечивающим микроскопом при нужном увеличении. Если контуры белого пятна размыты, то проводится измерение светопро-пускания от точки к точке с помощью спектрального микрофотометра. В случае люминесцентных пенетрантов осуществляется боковое облучение УФ-светом, причем интенсивность облучения нормируется и должна составлять 500 мкВт/см . [c.628]

Конструкция и свойства зонда зависят не только от параметров объекта, на измерение которых он настроен, но и от типа прибора, в паре с которым он работает. Наибольшее распространение получили флуоресцентные зонды для стационарной флуорнметрин и флуоресцентной микроскопии. По принципу передачи информации такие зонды следует поделить на три группы флуоресцентные метки, интенсометрнческие зонды и рацнометрическне зонды. Флуоресцентные метки (рис. 1а) информируют только о местоположении объекта исследования, о его количестве и/нли о его геометрических размерах. В этой связи к ним предъявляют лишь одно важное требование они должны как можно ярче светиться при контакте с объектом. Яркость свечения определяется высокими значениями молярного коэффициента поглощения и квантового выхода флуоресценции. [c.385]

VII. Автоэлектронная (АЭМ) и автоионная (АММ) микроскопии пр юбрелн за последние годы большое значение для исследования структуры поверхностей. Принцип методой заключается в создании поля очень высокой напряженности (>10 В/см) между полированным металлическим острием и флуоресцентным экраном. Такие поля вырывают электроны (АЭМ) нз атомов, составляющих острие, посылая их радиально к экрану в методе АИМ на острие подается положительный заряд и приближающаяся молекула газа (обычно Не, находящийся в сверхвысоковакуумной камере) ионизируется и посылается на экран, В t Ikom [c.127]

Люминесцентная микроскопия в сочетаний с методикой флуоро-хромирования с успехом используется для дифференциации микроколоний на мембранных фильтрах.. При этом исследуемая вода фильтруется через мембранные фильтры № 3, которые помещаются на плотные питат ьные среды, применяемые для вьфащивания патогенных или санитарно-показательных микроорганизмов. После выращивания в термостате в течение 6—8 часов фильтры снимаются с поверхности среды и окрашиваются в течение 5 минут раствором акридина оранжевого 1 5 ООО. С этой целью на крышку чашки Петри наносят 3—5 капель раствора флуоресцентного красителя и на них помешают фильтр нижней его поверхностью. Послё [c.164]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология