Метод гидразинолиза по Акабори

Гидразинолиз — метод Акабори. [c.513]

Гидразинолиз по Акабори. Метод определения С-кон-цевых аминокислот действием безводного гидразина был предложен в 1952 г. Акабори Пептид или белок нагревают с безводным гидразином [c.75]

В альбумине С-концевого аланипа. Однако более поздние исследования с использованием метода гидразинолиза Акабори и Ниу и Френкель-Конра-та [100] показали, что в яичном альбумине С-концевым остатком является пролин с концевой последовательностью аминокислот. ..Уа1-Зег-Рго. Известное в литературе наблюдение, что аланин является С-концевым остатком, можно объяснить либо тем, что исследованный белок был разновидностью плакальбумина (раздел 10), либо тем, что связь карбоксила этого остатка аланина менее устойчива к химическим воздействиям, чем обычные пептидные связи в цепи. Поэтому наиболее вероятно, что молекула яичного альбумина [c.17]

Срюди химических методов определения С-концевых аминокислотных остатков заслуживают внимания метод гидразинолиза, предложенный С. Акабори, и оксазалоновый метод В. Матсуо. В первом из них при нагревании пептида или белка с безводным гидразином при 100 — 120 °С пептидные связи гидролизуются с об- [c.38]

Известные в настоящее время методы определения С-концевых остатков менее удовлетворительны. Для этого определения может быть использован фермент карбоксипептидаза (представляющий собой, по существу, группу сходных ферментов). Карбоксипептидаза действует только на свободные а-карбоксильные группы, подобно тому как лейцинаминопептидаза действует на свободные а-аминогруппы. Другой метод, разработанный Акабори, основан на полном гидразинолизе полипептида. Гидразин реагирует с каждой пептидной связью, превращая все аминокислоты (за исключением С-кон-цевой, карбоксил которой не участвует в образовании пептидной связи) в ацилгидразипы. С-концевую аминокислоту отделяют и идентифицируют хроматографически. Значительно реже используется метод, основанный на восстановлении С-концевой карбоксильной группы до спиртовой с помощью подходящих доноров гидрид-иона. При последующем полном гидролизе полипептида образуется аминоспирт, соответствующий С-концевой аминокислоте. Этот аминоспирт может быть выделен и идентифицирован. [c.88]

Акабори впервые использовал для аналитических целей гидразинолиз белков и полипептидов. В дальнейшем метод гидразинолиза усовершенствовался и была показана универсальность и перспективность его для установления структуры полипептидов и белков - . Деструктирующее действие гидразина по С = М-свя-зям на примере полиазина, полученного из диацетила, отмечалось Цим мерманом и Лохте . [c.194]

Реакция с безводным гидраанном. Реакция с безводным гидразином является единственным химическим методом определения С-концевых аминокислот, который во многих случаях дает достоверные результаты. Два остальных метода — восстановление гидратами металлов и тиогидантоиновый метоД — дают, как правило, невоспроизводимые и недостоверные результаты. Метод предложен Акабори в 1952 г. Белок нагревают с гидразином (безводным) в запаянной ампуле при 100—120° в течение 8—10 часов. При этом происходит расщепление белка—гидразинолиз, в результате чего все аминокислоты, кроме С-концевой, образуют гидразиды. Обработкой бензальдегидом гидразиды аминокислот переводят в нерастворимые производные, которые удаляют фильтрованием. Свободные же С-концевые аминокислоты определяют хроматографически. [c.72]

Из химических методов определения С-концевой аминокислоты наибольшее значение имеет метод Акабори [99]. При кипячении с безводным гидразином (100 °С, 5 ч) все аминокислоты, за исключением С-концевой, превращаются в гидразиды. Отделение значительного избытка гидразидов аминокислот осуществляется реакцией с изовалериановым (или другим) альдегидом. Можно также смесь, полученную непосредственно после гидразинолиза, обработать динитрофторбензолом и после подкисления выделить ДНФ-аминокислоту. [c.368]

Предложен также химический метод Акабори (8. АкаЬог ), который основан на гидразинолизе полипептида [c.54]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология